一、不同品种、外植体和光照条件对花生体细胞胚诱导的影响（论文文献综述）
邹春好[1]（2021）在《基于体细胞胚胎发生的苹果遗传转化体系的建立》文中研究表明苹果是多年生果树,在遗传上高度杂合,采用传统的杂交育种方法培育一个优良品种难度大且周期长。现代生物技术,尤其是转基因技术的快速发展为苹果的良种选育提供了新的途径,但是目前苹果的遗传转化主要以叶片器官发生为再生体系,其转化效率较低,限制了该技术在实际育种工作中的应用。通过体细胞胚胎发生获得再生植株的方法具有数量多,速度快,成苗率高,遗传稳定性好等优点,并且以直接体细胞胚胎发生为基础的遗传转化可以减少转基因嵌合体的发生率。因此我们建立了苹果叶片直接体细胞胚胎发生体系,并以该体系为基础进行遗传转化。现有研究结果如下:1.体细胞胚胎发生体系的建立:我们以‘嘎啦’苹果组培苗为材料,通过对外植体材料的选择、培养基激素的调整、培养条件的优化等过程,建立最佳的苹果直接体细胞胚胎发生体系为:选择继代培养30天的组培苗顶部第2-4位的展开叶,切取叶片靠近叶柄部位的叶块为外植体,先在MS+TDZ 0.5 mg/L+NAA 6 mg/L+2,4-D 0.6 mg/L+蔗糖30 g/L的胚性细胞诱导培养基中黑暗培养8天,再转入MS+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L的胚胎发生培养基黑暗培养25天。经光照壮苗30天后,叶片体细胞胚胎发生率为82.3%,单叶平均再生体细胞胚数量为9.1个。2.遗传转化体系的建立:以叶片直接体细胞胚胎发生体系为基础,通过调整预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间、筛选压力,以GUS瞬时转化效率为指标建立了有效的遗传转化体系为:叶片先在胚性细胞诱导培养基中预培养6天,侵染时农杆菌菌液浓度为OD600=0.4、侵染时间10 min,共培养2天然后在胚胎发生培养基中进行脱菌、筛选。3.转基因植株的获得:为直观的展示基于体细胞胚胎发生的苹果遗传转化体系的可行性,我们构建了CRISPR/Cas9载体对苹果PDS基因进行基因突变,成功获得转基因白化植株。
张梦妍[2]（2021）在《‘香玲’核桃体细胞胚胎发生影响因素研究》文中研究表明核桃（Juglans regia L.）,是胡桃科核桃属植物。核桃的果实营养丰富、木材坚实耐用,是一种重要的经济林树种。核桃的适应性强,在我国的种植范围广泛。核桃在生产中存在良种应用率不高、病虫危害严重等问题,因此,加快良种的繁育和加强抗逆品种的培育有利于推动核桃产业的发展。体细胞胚具有繁殖快、结构完整、植株再生率高等特点,研究核桃体细胞胚胎发生对核桃良种繁育和基因功能研究等方面有重要的意义。本研究以‘香玲’核桃为实验材料,探究影响‘香玲’核桃体细胞胚胎发生影响因素,对‘香玲’核桃体细胞胚胎发生过程的适宜外植体、最佳离体培养条件进行筛选,并对体胚的增殖和成熟培养进行了初步探讨,主要研究结果如下:1.核桃外植体茎段和果实最佳消毒方法为70%酒精30s+0.1%Hgcl2消毒10min。花药适合的消毒方式为70%酒精30s+5%NaClO（有效氯8%）消毒8min+0.1%Hgcl2消毒3min的表面灭菌方式。2.核桃体胚诱导的最佳外植体材料为幼胚,花后第8周采样,胚性愈伤诱导率为66.67%。胚珠的胚性愈伤组织诱导率次之,诱导率为53.33%。3.核桃幼胚愈伤组织诱导的最适外源激素配比为DKW培养基添加2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为96.67%,此时体胚发生为间接发生途径;DKW培养基添加1.0mg/L TDZ的诱导率为80.00%,此时体胚发生多为直接发生途径。4.核桃幼胚愈伤组织诱导培养基添加0.5g/L谷氨酰胺时诱导胚性愈伤组织率为66.67%;添加30g/L的蔗糖浓度的胚性愈伤诱导率为65.6%。黑暗培养条件下诱导胚性愈伤组织率为63.33%,高于光照处理诱导率,核桃体胚的诱导过程适宜在暗培养条件下进行。5.体胚的增殖培养基为DKW液体培养基添加1.0mg/L6-BA+0.25mg/LNAA+0.5g/L谷氨酰胺+30g/L蔗糖,增殖方式为液体悬浮培养,增殖率为315.60%。6.体胚的成熟:成熟培养基为DKW培养基添加45g/L蔗糖+2.0mg/LABA+7g/L琼脂可以有效促进体胚成熟。
宋胜利[3]（2020）在《细叶百合体细胞胚发生过程中LpABCB21和LpPILS7功能初步解析》文中研究说明体细胞胚发生对于野生百合资源保存与种质创新具有重要意义。目前研究表明生长素对于体细胞胚发生具有重要调控作用,而生长素转运是外源生长素发挥功能的第一步,但生长素转运如何调控体细胞胚发生尚不清楚。本研究旨在筛选并挖掘细叶百合中生长素转运相关基因,并探究其在细叶体细胞胚发生过程中的调控功能,为阐明生长素调控百合体细胞胚发生的分子机理奠定基础。主要研究结果如下:1.为挖掘影响百合体细胞胚发生的关键因素,对细叶百合体细胞胚诱导过程中外源毒莠定（picloram,PIC）浓度、PIC处理时间、光照条件、培养基p H值和培养基营养成分等进行了探讨。结果表明:适宜的PIC浓度和酸性培养条件是百合体细胞胚发生的关键因素,酸性培养条件可能通过影响PIC的存在形式进而调节PIC的转运过程;光照条件和培养基中的营养元素能够促进体细胞胚发生;缩短PIC处理时间和光照条件会促进体细胞胚萌发;在光培养（16/8 h）条件下,细叶百合鳞片在添加1.0 mg/L PIC、p H 5.8的MS培养基中处理3 d后转移到无激素的MS培养基中即可诱导体细胞胚发生,且诱导率高达80.0%。2.利用SMART测序技术成功构建了细叶百合体细胞胚全长转录组文库,结合课题组前期获得的二代转录组数据的纠错与校正,获得119,649条转录本,N50为3406,转录本最大长度达到了13,678 bp,平均长度为2,017 bp,其中110,888条（92.68%）转录本被成功注释。这些被注释的转录本在KEGG代谢通路中主要参与碳水化合物代谢（6,072条,5.07%）和信号转导（5,396条,4.51%）,在GO分类中主要参与代谢过程（35,123条,29.36%）和催化活性（33,163条,27.72%）。3.对细叶百合中生长素转运相关基因家族成员进行了克隆与鉴定,并构建了生长素转运相关基因在体细胞胚发生过程中的表达谱。通过保守结构域比对和功能注释分析共获得63个ABCs、11个PIN/PILSs和3个AUX1/LAXs家族成员,其中7个ABCBs、5个PIN/PILSs和2个AUX1/LAXs成员参与生长素转运过程。对14个生长素转运相关基因在体细胞胚发生过程中的表达模式分析发现,除了Lp ABCB2以外,所有生长素转运相关基因都呈现出不同程度上调表达,其中Lp ABCB21和Lp PILS7的表达差异最显着,而且Lp ABCB21和Lp PILS7在整个体细胞胚发生过程中显着差异表达,通过表达趋势分析发现Lp ABCB21和Lp PILS7具有促进体细胞胚形成和发育的作用。4.优化了本团队创建的细叶百合高效遗传转化技术体系。结果表明:降低重悬液和共培养培养基的p H为5.0,并增加萌发培养基的氯化钙浓度为1.32 g/L时,获得的阳性植株数量提高了3—6倍,使农杆菌介导的百合稳定遗传转化效率在本团队之前建立的百合高效遗传转化技术体系的基础上提高了5.7—13.0%,最高可达46.3%。5.构建了Lp ABCB21和Lp PILS7过表达载体和CRISPR/Cas9敲除载体,通过转基因技术,获得Lp ABCB21过表达株系3株和突变株系7株,Lp PILS7过表达株系7株和突变株系6株。通过转基因株系的体细胞胚诱导结果以及组织形态学观察,初步证实了Lp ABCB21调控体细胞胚的早期形成,但表达量过高会抑制体细胞胚诱导效率,还能够调节体细胞胚以外起源方式发生;Lp PILS7主要调控体细胞胚诱导效率,并调节体细胞胚以内起源方式发生。本研究明确了细叶百合体细胞胚发生的关键影响因素,鉴定了细叶百合体细胞胚中的生长素转运相关基因家族成员,并通过过表达和CRISPR/Cas9基因编辑技术初步验证了Lp ABCB21和Lp PILS7在细叶百合体细胞胚发生过程中的调控作用。本研究为阐明生长素转运介导百合体细胞胚发生的分子机制奠定了基础,为百合基因功能研究提供了基因参考文库和技术手段。
侯辛辛[4]（2020）在《海南白花油茶离体快速繁殖和再生体系的建立及应用》文中研究说明油茶（Camellia oleifera）是山茶科（Theaceae）山茶属（Camellia）植物中油脂含量较高的植物的总称,是原产我国的重要木本油料树种。油茶籽油是国际粮农组织推荐的一种营养、健康的纯天然高级植物食用油,油茶与油橄榄、油棕和椰子并称为世界四大木本食用油料植物。油茶是我国得天独厚的植物资源,是我国木本粮油产业发展不可替代的战略性资源,也是海南省重要的乡土油料树种。适应当地气候和土壤条件的良种少、良种壮苗匮乏是当前制约海南油茶良种推广种植和油茶产业进一步发展的两大瓶颈。挖掘、保存和利用热带油茶优良种质资源;选育含油率高、品质优良、适应性强的海南油茶优质高产新品种以及加快新品种良种繁育和推广,是加快海南油茶产业发展和维持海南油茶产业可持续健康发展的有效策略。海南地区的主栽品种为白花越南油茶（Camellia vietnamensis T.C.Huang ex Hu）,本研究分别以海南本地白花油茶良种的未成熟胚、花药为外植体,主要通过分生结节和体细胞胚状体途径建立了白花油茶的再生体系;以顶芽和含腋芽茎段为外植体,主要通过器官直接发生途径,建立了海南白花油茶离体快速繁殖体系,为海南白花油茶今后的种质资源离体保存、良种壮苗繁育、缩短杂交育种世代周期以及利用基因工程进行油茶功能基因研究和定向分子育种等奠定技术基础。主要研究结果如下:1. 以油茶未成熟胚为外植体时,盛花期后240-300 d的油茶幼胚为最适宜外植体,接种在改良MS+Kt 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+Zt 5.0 mg/L培养基上,初代诱导率90%以上,以分生结节组织为主;改良MS+Kt（1.0～2.0）mg/L+NAA0.2mg/L培养基适合分生结节组织的增殖,增殖系数约为4.6;未成熟胚分生结节组织在1/2改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+IAA 0.2 mg/L+Zt 5.0 mg/L+CH400 mg/L培养基上以分化不定芽为主,平均每块分生结节组织块诱导不定芽11.3个,不定芽以无糖暴露培养生根方式为宜,再生植株移栽成活率91.6%;分生结节在1/2改良MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+Zt 5.0 mg/L+CH 400 mg/L上分化体胚为主,每块分生结节分化6.5个体胚,具双子叶的体细胞胚状体在改良MS+6-BA 0.2 mg/L+IAA 2.0 mg/L+GA30.5 mg/L+CH 200 mg/L培养基上有效成熟和萌发,萌发率72.1%,胚芽和胚根有效伸长形成体胚再生植株,再生植株移栽成活率94.7%。2. 以油茶花药为外植体时,以花粉发育处于单核靠边期的花药为诱导花药胚性愈伤组织的合适外植体,花蕾横纵比在0.53左右;适宜海南油茶花药胚性愈伤组织诱导的初代培养基为改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+Zt 2.0 mg/L;胚性愈伤组织在增殖与再分化培养基1/2改良MS+6-BA 2.0 mg/L+Zt 1.0 mg/L+NAA 0.5mg/L中以暗培养的方式培养可有效增殖,并分化出体细胞胚;体细胞胚在1/2改良MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上可诱导体胚成熟和体胚萌发形成再生植株,但诱导率较低,培养基配比仍有待进一步的优化。3. 以油茶腋芽和顶芽为外植体时,最适消毒方法为2%次氯酸钠溶液15min和0.1%Hg Cl2溶液12min的复合消毒方式,污染率可降至9.7%;将外植体以保留1/3叶片的接种方式接种在初代诱导培养基改良MS+GA30.5 mg/L+Zt 1.0mg/L中,顶芽的成芽率、成梢率和多芽率分别为68.9%、40.3%和41.9%,腋芽的成芽率、成梢率和多芽率分别为82.2%、40.6%和38.7%;最佳增殖培养基为改良MS+Zt 2.0 mg/L+IAA 0.3 mg/L,顶芽和腋芽的增殖系数分别达到了5.6和6.8;油茶组培增殖芽壮芽的最佳培养基为改良MS+IAA 0.5 mg/L+GA30.5mg/L+CH 200 mg/L,定芽茎粗有效增粗85%、芽长有效增高了79%。4. 以组培芽作为芽苗砧嫁接接穗,嫁接前组培芽基部在6-BA中浸泡2～3min可显着提高嫁接成活率。以常规半木质化枝条一叶一芽接穗做为对照,组培苗无菌单芽作为接穗进行芽苗砧嫁接,前期生长相对缓慢,但在后期表现出优势,嫁接92 d、252 d,组培芽嫁接苗新梢长度和新增叶片与对照无显着差异,但新梢茎粗比半硬枝一叶一芽嫁接苗的分别显着增加了171%和41.8%。
王钱钱[5]（2020）在《五种月季品种的快繁和再生体系的优化探究》文中进行了进一步梳理月季（Rosa Chinensis）是多年生生长的常绿灌木,是深受人们喜爱观赏花卉之一。月季具有花色多样、香味浓郁、花型丰富多彩、花期较久等特点,当外在条件适宜时,可一年四季开花,其抗逆性较强,月季自古以来深受大众的喜爱,在其在人们的生活工作中都扮有十分重要的作用,在市场需求中具有一定的买卖商业价值和科研价值,越来越受人们的关注。本试验对两种现代流行的月季品种进行了快繁体系的建立,将该快繁体系应用到其余3个品种以获得大量无毒苗后,其中以月季的叶脉、叶片为外植体,对月季体细胞胚的发生和再生体系的构建进行了系统的完善。为更快、更好构建月季快繁体系和再生体系提供了更多的理论基础。本试验的研究结果主要如下:1.月季快速繁殖体系的构建本试验选用现代月季品种‘小玫瑰’、‘蓝色风暴’为实验材料,腋芽的繁殖速度与生长状态不仅取决于试验材料的基因型,还受外植体类型的影响,在实验操作过程中外植体的消毒时间和培养基中激素种类及浓度配比都是影响快繁苗生长过程中重要的影响因子。以‘仙容’、‘蓝色风暴’的枝条带芽的茎段为外植体,进行植物组织培养,对其组织培养过程中的外植体消毒、初代培养、继代培养、生根培养与炼苗培养等必要环节都进行了试验探究,筛选出最优培养基配方。试验研究结果表明:‘小玫瑰’、‘蓝色风暴’均在MS+1.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Sucrose+7.5g/L Agar+1mg/L ZPL的快速增殖培养基上增殖效果最好,快繁苗的长势健壮,大大提高了外植体的成苗率。2.月季再生体系构建的初步探究选择两种现代月季品种‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’,实验选取‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’的叶片、叶柄作为外植体来诱导月季的愈伤组织,对‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’再生体系进行初步探究。在经过一系列的实验操作之后:培养基中激素的种类及浓度配比对月季体细胞胚的诱导及萌发出完整再生植株都具有重要影响,同时‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’的外植体部位的选择和日常光照条件也具有重要作用。在暗培养条件下,用小玫瑰和薰衣草花环两种月季的复叶柄在MS培养基上,分别添加了植物激素5.0mg/L 2,4-D和添加剂10mg/L Ag NO3、400mg/L L-p,在此培养基上愈伤组织的诱导结果可观。具体分别达81.6%和74.25%,两周后移至到MS培养基,另添加适量激素6-BA和NAA,在此培养基上光照培养,每四周继代一次,12周之后愈伤的长势翠绿壮实,但均没有体细胞胚的产生。紧接着用四种月季品种‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’、‘紫精灵’、‘大地之蓝’组培苗的叶脉做外植体,在培养基MS+5.0mg/L 2,4-D+10mg/L Ag NO3+400mg/L L-p+30g/L Glucose+3.0g/L GEL中先暗条件下培养一周,然后光下再培养两周,然后再移至培养基MS+1.0mg/L TDZ+0.01mg/L NAA+0.1mg/L GA3+30g/L Glucose+3.0g/L GEL中光下培养,四周后,只有‘小玫瑰’和‘大地之蓝’的愈伤组织有胚性愈伤组织的产生,诱导率分别为16.67%和29.20%。‘小玫瑰’和‘大地之蓝’产生的胚性愈伤组织及体细胞胚在培养基1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.01mg/L NAA+30g/L Glucose+3.0g/L GEL可快速萌芽,全部萌芽,4周后萌发成苗后,转入MS培养基,培养基成分含有0.5mg/L 6-BA、0.01mg/L NAA和0.1mg/L GA3,中光下培养一段时间,待再生苗长至4-5cm株高,然后将再生苗接种到含0.5mg/L IBA的1/2MS生根培养基上,可顺利生根,生根率达100%。
习洋,孙宇涵,李云[6]（2020）在《林木体细胞胚发生研究进展》文中研究说明体细胞胚发生是植物发育过程中的独特现象,是体细胞向胚胎发生途径转变的重建过程,也是证明细胞全能性理论的经典实例。在林学上,体细胞胚再生途径是实现基因转化的常用再生体系,也是对树木进行繁育和遗传改良的重要试验平台。对影响植物体细胞胚发生的多个影响因素进行了综述,并探讨应用体细胞胚技术时存在的重点和难点。
董建军[7]（2019）在《花生再生体系的建立及AhRR基因家族分析》文中指出花生（Arachis hypogaea L.）是世界上重要的经济作物和油料作物,中国是世界上花生第一生产和消费大国,培育高产、优质的花生新品种是促进花生产业发展的主要手段。传统杂交育种可以改良花生的产量和品质,但存在花生遗传基础狭窄、优良基因与不良性状紧密连锁、种间杂交不亲和、育种周期长、部分珍贵种质材料繁殖效率低等诸多因素,严重限制了花生育种进程和效率。通过组织培养和植株再生可以提高复种指数、缩短育种周期,是花生品种改良的重要途径之一。本研究通过对不同发育时期花生胚的离体培养来探究种子萌发到长成植株的最短生长周期,可以有效提高花生生长进程,提高育种效率;同时以花生胚轴为外植体进行组织培养,建立了花生胚轴的高效离体再生体系;并对AhRR转录因子家族进行了生物信息学和表达分析。主要研究结果如下:1、以花生品种农大花103不同发育时期的幼胚为外植体,采用组织培养的方法再生成花生植株。结果表明,通过组织培养能够促使花生幼胚正常发芽生长成植株,其中果针入土后30 d的花生幼胚在培养基中能够正常发育,发芽率为97.99%,成苗率为76.06%,生长状态接近于正常成熟胚;成熟种胚的发芽率为100%,成苗率达到了87%。2、以花生胚轴为外植体,对胚轴不同部位、激素类型及配比和不同基因型等方面做了系统研究,建立了以花生胚轴为外植体的高频植株再生体系:最佳外植体部位为靠近胚芽部位的胚轴;最佳芽诱导培养基为MS+6-BA（8mg/L）+NAA（0.1mg/L）,丛生芽诱导率高达90%以上,最佳基因型为远杂9102,从接种外植体到成苗约经历6570d,平均每个胚轴可再生68棵组培苗。3、AhRR转录因子基因家族在组织分化过程中起着重要作用。本文对Ah RR转录因子家族进行了生物信息学分析,结果表明:花生中共有21个AhRR基因,包括14个A类和7个B类;21个Ah RR基因CDS长度在513bp2175bp之间,氨基酸残基长度在170aa724aa不等,氨基酸序列平均长度为374aa;AhRR家族成员含有59个外显子,48个内含子;AhRR蛋白的结构域是高度保守的,所有的AhRR蛋白均含有D-D-K结构域;AhRR基因主要分布在花生栽培种的1号、3号、5号、8号、10号、11号、13号和15号染色体上。4、利用RT-PCR技术对花生AhRR基因家族中的两个基因ArAhy.69B3L2和ArAhy.QRG75F进行表达分析,结果表明:远杂9102胚轴在接种后的不同时期,两个基因的表达模式不同,ArAhy.69B3L2基因呈现下降趋势,在接种7d时表达量最高;而Aray.QRG75F基因在接种后14d时达到最高值,呈先升后降趋势;在接种14d和21d时两基因的表达量差异呈极显着水平。进一步分析了不同基因型远杂9102和花7567在接种14d时两个基因的表达量,结果表明:两个基因ArAhy.69B3L2与Aray.QRG75F在花7567中的表达量均低于远杂9102,差异达极显着水平。
李文静[8]（2016）在《花生再生体系的优化及AhSAD基因启动子的转化》文中提出本研究选用花生品种远杂9307、冀甜1号、罗汉果、花37、白沙1016的上胚轴为外植体,对愈伤组织诱导和再生体系进行研究,通过比较不同预培养时间、不同激素配比、不同基因型的诱导愈伤差异确立适宜花生上胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基。分别从体细胞胚发生途径和器官间接发生途径探索花生上胚轴离体再生的最佳途径。确立最适宜的培养条件进行19种不同花生品种筛选。在优化的再生体系基础上进行农杆菌介导的遗传转化。遗传转化方面,对农杆菌介导的遗传转化条件进行优化,分别从Km筛选浓度,受体材料、侵染时间、共培养时间完善转化流程,将花生Δ9-硬脂酰-ACP脱氢酶基因启动子AhSAD转化不同花生品种的受体材料,获得阳性植株,主要研究结果如下:（1）预培养时间不同,愈伤组织状态存在明显差异,预培养0d的上胚轴易形成胚性愈伤,预培养7d的上胚轴状态优于3d和10d。（2）确定MSB5+Pic3mg/L为最适宜诱导培养基,胚性愈伤诱导率最高可达60%以上,该类培养基适宜本研究中多数花生品种的愈伤诱导,并可进行多次继代培养得到重复性体胚发生培养物。MSB5+Pic3mg/L+Gln1g/L（+）AgNO3（2mg/L）为最佳继代培养基。（3）愈伤组织进一步诱导体细胞胚发生的最佳培养基为MS+0.4mg/L6-BA+0.1mg/LNAA,成苗率最高为46.77%。继代过程先在6-BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L再生,交替使用MS+6-BA3.0mg/L+NAA 0.5mg/L成苗状况较好;愈伤组织诱导不定芽的最佳培养基为MS+TDZ0.2mg/L+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,可诱导出不定芽且分化率最高为42%。（4）不同基因型的花生品种在相同的培养基中出现诱导和再生差异,9048,9102出愈率在70%-80%之间,9020,9092,9110出愈率为60%-70%,9059出愈率最低仅为16%。9099,9097再生率在40%-50%之间,9036,9093次之。（5）最终确定胚性愈伤组织和无菌苗上胚轴作为受体材料时,卡那霉素筛选浓度为80mg/L和100mg/L,两者侵染时间在10min时褐化率最低,转化率最高。胚性愈伤共培养2d时,抗卡那霉素的抗性芽数最多;无菌苗的上胚轴共培养3d时,抗性愈伤诱导率最高。（6）经过卡那霉素筛选,获得36抗性植株,其中7株经GUS组织活性检测和PCR检测鉴定为阳性植株。
苗利娟,张新友,黄冰艳,石磊,齐飞艳,高伟,董文召,汤丰收[9]（2015）在《河南省育成花生品种的幼叶体细胞胚胎诱导》文中研究指明选用河南省育成的5个不同类型的花生品种,在6种培养基配方及2种光照处理下进行胚小叶外植体诱导体胚效率研究。结果表明,豫花1号、豫花22号、豫花9719、豫花9847等4个品种体细胞胚诱导率均在2,4-D浓度为15 mg/L时最高,2种光周期处理的趋势一致,豫花9719的体细胞胚诱导率最高。在4周全黑暗培养条件下,豫花12号体细胞胚诱导率在2,4-D浓度为5 mg/L时最高,而在暗2周转光暗交替（其中光照培养16 h,黑暗培养8 h）2周处理条件下,2,4-D浓度为10 mg/L时体细胞胚诱导率最高,达45.00%;可见暗培养的平均诱导率低于暗2周转光暗交替2周处理。因此,以育成品种胚小叶为外植体直接诱导体细胞胚,2,4-D浓度以1015 mg/L为宜,暗2周转光暗交替2周处理的体细胞胚诱导率较高。
蒋菁,熊发前,唐秀梅,钟瑞春,贺梁琼,李忠,韩柱强,唐荣华[10]（2013）在《赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响》文中指出【目的】完善花生离体再生繁殖体系,为花生的遗传转化提供技术支持。【方法】以桂花系列花生品种为材料,以胚小叶为外植体,MS+10mg/L2,4-D为体细胞胚诱导基本培养基,MS+3mg/L6-BA+0.8mg/LNAA+（0～15mg/L）GA3为苗诱导基本培养基,研究光照、赤霉素和基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响。【结果】在光暗比14∶10条件下,花生体细胞胚诱导率明显高于全黑暗培养,体细胞胚诱导率增加7.5～37.5个百分点。在不同花生品种中,桂花26体细胞胚诱导率最高,达62.8%,桂花833最低,为21.7%。在成苗培养基中添加5～15mg/LGA3利于提高体细胞胚的成苗率。桂花26和桂花771在5mg/LGA3处理下成苗率最高,分别为42.8%和35.3%;桂花836、桂花1026、桂花833在15mg/LGA3作用下成苗率最高,分别为38.7%、33.3%、26.4%。所有品种与GA3组合中,以桂花26与5mg/LGA3组合成苗率最高,其次是桂花836与15mg/LGA3组合。【结论】适宜的光照条件有利于花生体细胞胚的发生;成苗培养基中添加GA3利于促进体细胞胚诱导成苗;桂花26和桂花836是体细胞胚诱导植株再生较理想的材料。
二、不同品种、外植体和光照条件对花生体细胞胚诱导的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、不同品种、外植体和光照条件对花生体细胞胚诱导的影响（论文提纲范文）
（1）基于体细胞胚胎发生的苹果遗传转化体系的建立（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 植物组织培养与细胞全能性 |
| 1.1.1 器官发生 |
| 1.1.2 体细胞胚胎发生 |
| 1.2 苹果的组织培养与体细胞胚胎发生 |
| 1.2.1 苹果组织培养研究进展 |
| 1.2.2 苹果的体细胞胚胎发生 |
| 1.2.3 影响苹果体细胞胚胎发生的因素 |
| 1.2.3.1 基因型 |
| 1.2.3.2 外植体类型 |
| 1.2.3.3 激素种类与配比 |
| 1.2.3.4 培养基组成 |
| 1.2.3.5 培养条件 |
| 1.2.3.6 外植体的处理方式 |
| 1.2.3.7 体细胞胚胎发生相关转录因子 |
| 1.3 农杆菌介导的苹果遗传转化 |
| 1.3.1 苹果转基因研究进展 |
| 1.3.2 影响苹果遗传转化的因素 |
| 1.3.2.1 再生体系 |
| 1.3.2.2 菌株类型 |
| 1.3.2.3 共培养时间 |
| 1.3.2.4 抗生素种类及浓度 |
| 1.3.2.5 其他因素 |
| 1.3.3 基于体细胞胚胎发生的遗传转化 |
| 1.4 本实验的目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 载体与菌株 |
| 2.1.3 实验药品 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.1.5 培养基配方 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 无菌苗的获得 |
| 2.2.2 胚性细胞诱导培养基的筛选 |
| 2.2.3 胚性细胞诱导时间的确定 |
| 2.2.4 叶片不同位置对体细胞胚胎发生影响 |
| 2.2.5 暗培养时间对体细胞胚胎成苗的影响 |
| 2.2.6 再生植株的壮苗与生根 |
| 2.2.7 项目测定 |
| 2.2.8 体细胞胚胎发生的显微观察 |
| 2.2.9 低熔点琼脂糖包埋震荡切片 |
| 2.2.10 CTAB法提取‘嘎啦’苹果总RNA |
| 2.2.11 RNA反转录获得‘嘎啦’苹果cDNA |
| 2.2.12 载体构建 |
| 2.2.12.1 引物设计 |
| 2.2.12.2 PCR扩增 |
| 2.2.12.3 DNA电泳及胶回收 |
| 2.2.12.4 克隆载体构建 |
| 2.2.12.5 热激法转化大肠杆菌及筛菌测序 |
| 2.2.12.6 大肠杆菌质粒DNA提取 |
| 2.2.12.7 表达载体的构建 |
| 2.2.13 原位杂交分析 |
| 2.2.13.1 材料固定 |
| 2.2.13.2 材料包埋 |
| 2.2.13.3 石蜡切片 |
| 2.2.13.4 探针制备 |
| 2.2.13.5 探针半定量 |
| 2.2.13.6 脱蜡与乙酰化 |
| 2.2.13.7 原位杂交 |
| 2.2.13.8 杂交后处理 |
| 2.2.14 卡那霉素敏感性实验 |
| 2.2.15 农杆菌介导的苹果遗传转化 |
| 2.2.15.1 EHA105农杆菌感受态细胞的制备 |
| 2.2.15.2 冻融法转化农杆菌感受态细胞 |
| 2.2.15.3 叶盘法转化苹果叶片 |
| 2.2.16 菌液浓度对遗传转化影响 |
| 2.2.17 预培养对遗传转化影响 |
| 2.2.18 共培养时间对遗传转化影响 |
| 2.2.19 转基因材料GUS染色 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 胚性细胞诱导 |
| 3.1.1 外源激素对胚性细胞诱导的影响 |
| 3.1.2 暗培养时间对胚性细胞诱导的影响 |
| 3.2 体细胞胚胎发生 |
| 3.2.1 叶片不同部位对体细胞胚胎发生的影响 |
| 3.2.2 暗培养时间对体细胞胚成苗的影响 |
| 3.2.3 再生植株的壮苗与生根 |
| 3.3 苹果体细胞胚形态和组织学观察 |
| 3.3.1 体细胞胚形态学观察 |
| 3.3.2 体细胞胚组织学观察 |
| 3.4 胚胎特征基因在早期体细胞胚中表达 |
| 3.4.1 合子胚特征基因LEC1和SERK1在体细胞胚胎发生早期表达 |
| 3.4.2 顶端分生组织特征基因STM在体细胞胚胎发生过程中表达 |
| 3.5 体细胞胚胎发生过程中抗生素选择压力的确定 |
| 3.6 农杆菌转化条件的优化 |
| 3.6.1 菌液浓度及侵染时间对遗传转化的影响 |
| 3.6.2 预培养及共培养时间对遗传转化的影响 |
| 3.7 遗传转化体系的验证 |
| 3.7.1 CRISPR/Cas9载体的构建 |
| 3.7.2 CRISPR/Cas9系统介导苹果MdPDS基因突变 |
| 3.7.3 CRISPR敲除后苹果MdPDS基因的突变情况 |
| 4 讨论 |
| 4.1 苹果叶片直接体细胞胚胎发生 |
| 4.2 体细胞胚胎发生过程中特征基因的表达 |
| 4.3 体细胞胚的萌发、成苗与生根 |
| 4.4 胚性细胞对外界环境更加敏感 |
| 4.5 基于体细胞胚胎发生的苹果遗传转化体系 |
| 4.6 CRISPR/Cas9系统在苹果中的应用 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
（2）‘香玲’核桃体细胞胚胎发生影响因素研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 核桃概述 |
| 1.2 核桃组织培养研究概况 |
| 1.3 植物体胚发生研究现状 |
| 1.3.1 植物体细胞胚胎发生 |
| 1.3.2 木本植物体细胞胚胎发生研究进展 |
| 1.3.3 核桃属体细胞胚胎发生研究进展 |
| 1.3.4 植物体胚发生的组织细胞学研究进展 |
| 1.4 研究的目的与意义 |
| 1.4.1 研究的意义 |
| 1.4.2 研究的目的 |
| 1.4.3 技术路线 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.1.1 植物材料 |
| 2.1.2 药品与仪器 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 愈伤组织的诱导试验 |
| 2.2.2 胚性细胞团的增殖试验 |
| 2.2.3 体细胞胚胎的成熟试验 |
| 2.2.4 体细胞胚胎发生的组织细胞学观察 |
| 2.2.5 数据分析 |
| 第三章 结果与分析 |
| 3.1 ‘香玲’核桃胚性愈伤组织的诱导 |
| 3.1.1 外植体消毒方法的筛选 |
| 3.1.2 不同外植体对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.1.3 幼胚不同采样时期对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.1.4 外源生长调节剂对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.1.5 蔗糖浓度对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.1.6 有机附加物对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.1.7 光照对胚性愈伤组织诱导的影响 |
| 3.2 ‘香玲’核桃胚性细胞团的增殖培养 |
| 3.3 ‘香玲’核桃体细胞胚胎的成熟培养 |
| 3.4 ‘香玲’核桃体细胞胚胎发生的组织细胞学观察 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 胚性愈伤组织的诱导 |
| 4.2 胚性细胞团的增殖培养 |
| 4.3 体细胞胚的成熟培养 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录Ⅰ DKW培养基配方 |
| 附录Ⅱ 缩略词表 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（3）细叶百合体细胞胚发生过程中LpABCB21和LpPILS7功能初步解析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 植物体细胞胚发生研究进展 |
| 1.1.1 体细胞胚发生过程 |
| 1.1.2 体细胞胚的应用价值 |
| 1.1.3 激素对体细胞胚发生的影响 |
| 1.1.4 生长素对体细胞胚发生的影响 |
| 1.1.5 生长素转运对体细胞胚发生的影响 |
| 1.1.6 百合体细胞胚发生研究现状及存在问题 |
| 1.2 百合遗传转化研究进展 |
| 1.3 研究思路与技术路线 |
| 1.3.1 研究思路 |
| 1.3.2 技术路线 |
| 第二章 细叶百合体细胞胚发生关键影响因素鉴定 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试剂与仪器 |
| 2.1.3 试验方法 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 PIC处理时间及光照对体细胞胚发生的影响 |
| 2.2.2 PIC浓度、pH值和培养基成分对体细胞胚发生的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 适宜浓度PIC和酸性条件决定百合体细胞胚发生 |
| 2.3.2 营养元素促进百合体细胞胚发生 |
| 2.3.3 缩短PIC处理时间促进百合体细胞胚萌发 |
| 2.3.4 光照促进体细胞胚发生和萌发 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 细叶百合体细胞胚发生中生长素转运相关基因鉴定 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 样品培养与取材 |
| 3.1.3 Pac Bio文库构建与测序 |
| 3.1.4 全长转录本获得 |
| 3.1.5 全长转录本功能注释 |
| 3.1.6 lnc RNA预测 |
| 3.1.7 全长转录本ORF预测 |
| 3.1.8 生长素转运相关基因家族成员鉴定 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 Pac Bio测序结果概述 |
| 3.2.2 转录本功能注释和分类 |
| 3.2.3 生长素转运相关基因鉴定与分析 |
| 3.2.4 生长素转运相关基因进化分析 |
| 3.2.5 生长素转运相关基因保守结构域分析 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 全长转录组对百合体细胞胚研究的作用 |
| 3.3.2 碳水化合物代谢与体细胞胚发生 |
| 3.3.3 生长素转运相关基因进化分析 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 生长素转运相关基因克隆及表达模式分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试剂与仪器 |
| 4.1.3 RNA提取 |
| 4.1.4 RNA反转录 |
| 4.1.5 基因全长cDNA克隆 |
| 4.1.6 基因全长cDNA测序验证 |
| 4.1.7 生长素转运相关基因表达模式分析 |
| 4.2 试验结果 |
| 4.2.1 生长素转运相关基因克隆与验证 |
| 4.2.2 体细胞胚发生中关键生长素转运相关基因鉴定 |
| 4.2.3 Lp ABCB21和Lp PILS7 在体细胞胚发生中的作用 |
| 4.2.4 Lp ABCB21和Lp PILS7 的影响因素分析 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 生长素转运与体细胞胚发生 |
| 4.3.2 PIC浓度、酸碱度、营养成分与体细胞胚发生 |
| 4.3.3 环境胁迫与体细胞胚发生 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 Lp ABCB21和Lp PILS7 在体细胞胚发生中的功能研究 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 试验材料 |
| 5.1.2 主要试剂 |
| 5.1.3 菌株和载体 |
| 5.1.4 过表达及CRISPR/Cas9 敲除载体构建 |
| 5.1.5 农杆菌介导的百合遗传转化体系改良 |
| 5.1.6 转基因植株获得与鉴定 |
| 5.1.7 Lp ABCB21和Lp PILS7 在百合体细胞胚发生中的功能鉴定 |
| 5.1.8 生长素信号基因表达谱构建 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 Lp ABCB21和Lp PILS7 表达载体构建 |
| 5.2.2 百合遗传转化体系改良 |
| 5.2.3 转基因植株获得与鉴定 |
| 5.2.4 遗传转化效率分析 |
| 5.2.5 Lp ABCB21和Lp PILS7 对百合体细胞胚发生的影响 |
| 5.2.6 Lp ABCB21和Lp PILS7 对生长素信号基因的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.3.1 pH对百合遗传转化的影响 |
| 5.3.2 CaCl2对体细胞胚发生与萌发的影响 |
| 5.3.3 Lp ABCB21和Lp PILS7 调控百合体细胞胚发生 |
| 5.3.4 生长素信号基因对百合体细胞胚发生的影响 |
| 5.3.5 百合体细胞胚发生的调控网络预测 |
| 5.4 小结 |
| 全文结论 |
| 主要创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（4）海南白花油茶离体快速繁殖和再生体系的建立及应用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 油茶简介 |
| 1.1.2 海南油茶良种壮苗生产现状 |
| 1.2 油茶组织培养研究概况 |
| 1.2.1 植物组织培养再生途径 |
| 1.2.2 油茶组织培养研究进展 |
| 1.3 油茶组织培养再生体系的应用 |
| 1.3.1 组织培养快速繁殖上的应用 |
| 1.3.2 油茶种质资源保存中的应用 |
| 1.3.3 幼胚植株再生体系技术在杂交育种上的应用 |
| 1.3.4 稳定、高效的再生体系是建立遗传转化体系的前提技术 |
| 1.4 研究目的与意义 |
| 1.5 技术路线 |
| 2 未成熟胚再生体系的建立和优化 |
| 2.1 试验材料 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 外植体消毒 |
| 2.2.2 海南油茶合子胚萌发初代基本培养基的筛选优化 |
| 2.2.3 适宜诱导直接分化分生结节组织的合子胚发育时期的筛选 |
| 2.2.4 分生结节组织的增殖 |
| 2.2.5 分生结节组织的再分化 |
| 2.2.6 分生结节组培芽的生根和植株再生 |
| 2.2.7 分生结节体细胞胚状体萌发和植株再生 |
| 2.2.8 分生结节组织再生植株的移栽 |
| 2.2.9 统计分析 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 不同基本培养基对海南油茶未成熟合子胚诱导萌发的影响 |
| 2.3.2 不同胚龄合子胚对初代诱导培养的影响 |
| 2.3.3 不同浓度和配比的Kt、6-BA和 NAA对分生结节组织增殖的影响 |
| 2.3.4 不同种类、浓度和配比的植物生长调节剂对分生结节再分化的影响 |
| 2.3.5 分生结节再分化芽的生根和植株再生 |
| 2.3.6 分生结节再分化体细胞胚状体的萌发和植株再生 |
| 2.3.7 未成熟胚分生结节组织再生植株的移栽 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 适宜海南油茶组培的基本培养基 |
| 2.4.2 适合海南油茶合子胚诱导分生结节组织的最佳胚发育期 |
| 2.4.3 油茶未成熟胚再生植株的初代诱导、增殖与分化 |
| 2.4.4 分生结节再生植株的生根和移栽 |
| 3 花药再生体系的建立 |
| 3.1 植物材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 油茶花药不同发育时期的观测 |
| 3.2.2 花药消毒和初代诱导培养 |
| 3.2.3 体细胞胚增殖与再分化培养 |
| 3.2.4 体细胞胚的成熟和植株再生 |
| 3.2.5 再生植株的移栽 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 花蕾、花药的外部形态及其对应的花粉发育时期 |
| 3.3.2 不同初代诱导培养基对油茶花药愈伤组织诱导的影响 |
| 3.3.3 不同培养条件对胚性愈伤组织增殖和再分化的影响 |
| 3.3.4 花药体细胞胚成熟和植株再生 |
| 3.3.5 再生植株的移栽 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 最适花药外植体发育时期的筛选 |
| 3.4.2 植物生长调节剂对愈伤组织诱导的影响 |
| 3.4.3 培养条件对胚性愈伤组织分化的影响 |
| 4 顶芽和腋芽快速繁殖体系的建立 |
| 4.1 试验材料 |
| 4.2 试验方法 |
| 4.2.1 外植体消毒 |
| 4.2.2 初代诱导培养 |
| 4.2.3 增殖培养 |
| 4.2.4 壮芽培养 |
| 4.2.5 组培芽生根和移栽 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 不同消毒处理对油茶去叶片接种外植体消毒的影响 |
| 4.3.2 接种方式对油茶腋芽和顶芽的芽诱导率的影响 |
| 4.3.3 细胞分裂素对油茶腋芽和顶芽的芽诱导率的影响 |
| 4.3.4 不同种类和浓度配比植物生长调节剂对油茶无菌定芽增殖的影响 |
| 4.3.5 油茶组培增殖芽的壮芽培养 |
| 4.3.6 油茶组培芽生根和移栽 |
| 4.4 讨论 |
| 4.4.1 油茶外植体消毒 |
| 4.4.2 接种方式对芽启动诱导的影响 |
| 4.4.3 细胞分裂素对芽诱导率的影响 |
| 4.4.4 植物生长调节剂对芽的增殖的影响 |
| 4.4.5 油茶组培芽的壮芽 |
| 5 以良种组培芽为接穗的芽苗砧嫁接苗的繁殖 |
| 5.1 试验材料 |
| 5.2 试验方法 |
| 5.2.1 一年生半木质化枝条一芽一叶接穗处理 |
| 5.2.2 组培芽接穗处理 |
| 5.2.3 砧木制备 |
| 5.2.4 嵌穗和绑扎 |
| 5.2.5 芽苗砧嫁接苗的栽植 |
| 5.2.6 调查统计 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 植物生长调节剂对嫁接成活率的影响 |
| 5.3.2 不同类型油茶芽苗砧嫁接接穗对嫁接苗成活率的影响 |
| 5.3.3 不同类型接穗的油茶芽苗砧嫁接苗第72d苗木长势 |
| 5.3.4 不同类型接穗的油茶芽苗砧嫁接苗第92d的苗木长势 |
| 5.3.5 不同类型接穗的油茶芽苗砧嫁接苗第252d的苗木长势 |
| 5.4 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录一 :缩略词 |
| 硕士阶段发表论文情况 |
| 致谢 |
（5）五种月季品种的快繁和再生体系的优化探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词表 |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 国内外月季育种的研究进展 |
| 1.3 月季植物组织培养研究进展 |
| 1.3.1 月季组培快繁研究进展 |
| 1.3.2 植物月季快繁的影响因素 |
| 1.4 月季再生体系的研究进展 |
| 1.4.1 月季的再生途径 |
| 1.4.2 月季愈伤组织诱导的影响因素 |
| 1.4.3 月季体细胞胚及胚性愈伤诱导的影响因素 |
| 1.5 本研究的目的及意义 |
| 第二章 月季组织培养与快速繁殖体系的建立 |
| 2.1 试验材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 快繁的培养条件 |
| 2.1.4 实验数据统计与分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 升汞不同脱毒时间对‘小玫瑰’、‘蓝色风暴’腋芽萌发的影响 |
| 2.2.2 不同月季品种对腋芽生速度的影响 |
| 2.2.3 抗生素对腋芽萌发率、污染率的影响 |
| 2.2.4 组培苗初代、增殖继代培养 |
| 2.2.5 不同浓度IBA处理对‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’生根的影响 |
| 2.2.6 不同炼苗时间对‘小玫瑰’、‘薰衣草花环’成苗率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第三章 月季再生体系的初步探究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 环境条件和基本培养基 |
| 3.1.3 试验方法 |
| 3.1.4 数据统计与分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 月季愈伤组织诱导的影响 |
| 3.2.2 不同浓度TDZ对胚性愈伤组织的诱导影响 |
| 3.2.3 6-BA和葡萄糖不同浓度组合对体细胞胚的增殖影响 |
| 3.2.4 不同浓度6-BA对体细胞胚/胚性愈伤萌发的影响 |
| 3.2.5 不同浓度IBA对月季再生苗生根的影响 |
| 3.2.6 月季再生苗移栽 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 月季愈伤组织诱导的影响因素 |
| 3.3.2 不同月季品种和TDZ浓度对月季体细胞胚的诱导的影响 |
| 3.3.3 植物激素对体细胞胚的增殖的影响 |
| 3.3.4 植物激素对体细胞胚萌发的影响 |
| 3.4 结论 |
| 3.4.1 月季愈伤组织诱导的影响 |
| 3.4.2 不同月季品种和TDZ浓度对月季体细胞胚的诱导的影响 |
| 3.4.3 植物激素对体细胞胚的增殖的影响 |
| 3.4.4 植物激素对体细胞胚萌发的影响 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）林木体细胞胚发生研究进展（论文提纲范文）
| 1 理论基础 |
| 2 国内外研究进展概况 |
| 3 植物体细胞胚发生的影响因素 |
| 3.1 基因型对体细胞胚发生的影响 |
| 3.2 外植体对体细胞胚发生的影响 |
| 3.3 基本培养基对体细胞胚发生的影响 |
| 3.4 外源植物生长调节剂对植物体细胞胚发生的影响 |
| 3.5 培养方式对植物体细胞胚发生的影响 |
| 3.6 培养条件对植物体细胞胚发生的影响 |
| 3.6.1 温度 |
| 3.6.2 光照 |
| 3.6.3 培养基渗透压 |
| 4 林木体细胞胚发生的问题与展望 |
（7）花生再生体系的建立及AhRR基因家族分析（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 1 文献综述 |
| 1.1 立题依据及意义 |
| 1.2 植物组织培养的意义 |
| 1.2.1 植物组织培养应用于植物离体快繁 |
| 1.2.2 植物组织培养应用于无病毒苗木培育 |
| 1.2.3 植物组织培养应用于遗传转化研究 |
| 1.2.4 植物组织培养应用于种质资源保存 |
| 1.3 花生组织培养研究进展 |
| 1.3.1 器官发生途径再生植株 |
| 1.3.2 体细胞胚发生途径再生植株 |
| 1.4 细胞分裂素响应调节因子RR |
| 1.4.1 转录因子简介 |
| 1.4.2 RRs转录因子 |
| 2 引言 |
| 3 材料与方法 |
| 3.1 花生不同发育时期种胚离体培养及植株再生 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 主要实验设备及基本培养基和培养条件 |
| 3.1.3 试验方法 |
| 3.2 花生胚轴离体培养及植株再生 |
| 3.2.1 试验材料 |
| 3.2.2 实验设备及基本培养基和培养条件 |
| 3.2.3 试验方法 |
| 3.3 花生AhRR转录因子基因家族的生物信息学分析 |
| 3.3.1 家族成员鉴定 |
| 3.3.2 家族进化分析及重新命名 |
| 3.3.3 保守结构域分析 |
| 3.3.4 基因结构分析 |
| 3.3.5 染色体物理分布 |
| 3.3.6 理化性质分析 |
| 3.4 AhRR基因的表达 |
| 3.4.1 试验材料 |
| 3.4.2 试验方法 |
| 4 结果与分析 |
| 4.1 农大花103 不同发育时期种胚的离体培养及植株再生 |
| 4.1.1 农大花103 不同发育时期幼胚离体培养情况 |
| 4.1.2 农大花103 成熟种胚离体培养情况 |
| 4.1.3 农大花103 不同发育时期幼胚生长状况与成熟胚对比情况 |
| 4.2 花生胚轴离体培养及植株再生 |
| 4.2.1 花生胚轴不同部位对芽诱导的影响 |
| 4.2.2 花生不同激素配比对芽诱导的影响 |
| 4.2.3 花生不同基因型对胚轴再生的影响 |
| 4.2.4 丛生芽的伸长 |
| 4.2.5 组培苗生根 |
| 4.2.6 胚轴离体再生体系的建立 |
| 4.3 花生AhRR基因家族的生物信息学分析 |
| 4.3.1 花生AhRR转录因子的家族进化关系分析 |
| 4.3.2 花生AhRR转录因子基因家族生物信息学分析 |
| 4.3.3 花生AhRR转录因子家族基因结构分析 |
| 4.3.4 花生AhRR转录因子家族保守结构域分析 |
| 4.3.5 花生AhRR转录因子家族的染色体定位预测 |
| 4.4 AhRR基因在花生胚轴分化过程中的表达分析 |
| 4.4.1 RNA提取质量检测 |
| 4.4.2 AhRR基因在花生胚轴分化过程中的表达分析 |
| 5 结论与讨论 |
| 5.1 讨论 |
| 5.1.1 花生不同发育时期种胚离体培养研究 |
| 5.1.2 花生胚轴离体再生体系的建立 |
| 5.1.3 AhRR转录因子基因家族的生物信息学分析 |
| 5.2 结论 |
| 参考文献 |
| Abstract |
（8）花生再生体系的优化及AhSAD基因启动子的转化（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 引言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1 花生组织培养的研究进展 |
| 1.1 花生器官发生途径的研究进展 |
| 1.1.1 器官直接发生途径 |
| 1.1.2 器官间接发生途径 |
| 1.2 花生体细胞胚发生途径的研究进展 |
| 1.3 花生组织培养存在的主要问题 |
| 2 花生遗传转化的研究进展 |
| 2.1 基因枪介导的遗传转化方法 |
| 2.2 农杆菌介导的遗传转化方法 |
| 2.3 其他转化方法 |
| 2.4 花生遗传转化存在的主要问题 |
| 3 花生启动子的研究 |
| 4 研究的内容和意义 |
| 4.1 研究内容 |
| 4.2 研究目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 植物材料 |
| 1.2 植物激素 |
| 1.3 培养基 |
| 1.4 农杆菌菌株和启动子表达载体 |
| 1.5 实验试剂和仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 愈伤组织诱导和再生 |
| 2.1.1 愈伤组织诱导 |
| 2.1.2 花生愈伤组织再生成苗 |
| 2.1.3 花生基因型筛选 |
| 2.1.4 生根培养 |
| 2.2 花生遗传转化条件优化 |
| 2.2.1 受体材料对遗传转化的影响 |
| 2.2.2 Km抗生素浓度的确定 |
| 2.2.3 侵染时间对遗传转化的影响 |
| 2.2.4 共培养时间对遗传转化的影响 |
| 2.3 花生启动子的转化 |
| 2.3.1 菌液活化 |
| 2.3.2 受体材料侵染、共培养及再生 |
| 2.4 GUS活性检测 |
| 2.5 PCR检测 |
| 2.5.1 DNA提取 |
| 2.5.2 PCR检测 |
| 2.6 阳性植株进行生根 |
| 第三章 实验结果与分析 |
| 3.1 愈伤组织诱导 |
| 3.1.1 不同预培养时间对外植体诱导愈伤的差异 |
| 3.1.2 不同诱导培养基的愈伤诱导差异 |
| 3.1.3 不同继代培养基的愈伤诱导差异 |
| 3.2 花生愈伤组织再生成苗 |
| 3.2.1 体细胞胚发生途径 |
| 3.2.2 间接器官发生途径 |
| 3.3 不同花生基因型的筛选 |
| 3.4 遗传转化条件优化 |
| 3.4.1 Km选择剂浓度的确定 |
| 3.4.2 侵染时间对遗传转化的影响 |
| 3.4.3 共培养时间对遗传转化的影响 |
| 3.5 花生品种农杆菌转化效率 |
| 3.5.1 GUS活性检测 |
| 3.5.2 PCR检测 |
| 3.6 生根 |
| 第四章 结论与讨论 |
| 4.1 影响花生上胚轴愈伤组织诱导的因素 |
| 4.1.1 外植体及预培养时间的选择 |
| 4.1.2 不同激素对上胚轴外植体的影响 |
| 4.2 影响花生上胚轴再生的因素 |
| 4.2.1 不同激素对体细胞胚再生途径的影响 |
| 4.2.2 不同激素对间接再生途径的影响 |
| 4.2.3 不同基因型对花生上胚轴再生的影响 |
| 4.3 影响AhSAD基因启动子转化的因素 |
| 4.3.1 Km浓度的筛选 |
| 4.3.2 侵染时间对遗传转化的影响 |
| 4.3.3 共培养时间对遗传转化的影响 |
| 4.3.4 基因型对遗传转化的影响 |
| 4.3.5 受体材料对遗传转化的影响 |
| 4.3.6 转化植株的鉴定 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（9）河南省育成花生品种的幼叶体细胞胚胎诱导（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1. 1植物基因型 |
| 1. 2胚小叶外植体制备及培养 |
| 1. 3统计分析 |
| 2结果与分析 |
| 2. 1体细胞胚的形成 |
| 2. 2不同基因型品种体细胞胚诱导率 |
| 2. 3光周期对体细胞胚再生率的影响 |
| 3结论与讨论 |
| 3. 1 2,4 - D最佳浓度差异 |
| 3. 2基因型诱导反应差异 |
| 3. 3光周期处理差异 |
（10）赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.2.1 不同光周期处理对体细胞胚诱导的影响 |
| 1.2.2 比较不同品种的体细胞胚发生率及产胚数 |
| 1.2.3 不同赤霉素 (GA3) 浓度对体细胞胚萌发的影响 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同光照处理对花生胚小叶体细胞胚诱导的影响 |
| 2.2 不同基因型对花生胚小叶体细胞胚诱导的影响 |
| 2.3 不同GA3浓度和花生品种对体细胞胚成苗的影响 |
| 2.4 花生小苗在生根培养基中的生根效果 |
| 3 讨论 |
| 4 结论 |
四、不同品种、外植体和光照条件对花生体细胞胚诱导的影响（论文参考文献）
- [1]基于体细胞胚胎发生的苹果遗传转化体系的建立[D]. 邹春好. 山东农业大学, 2021(01)
- [2]‘香玲’核桃体细胞胚胎发生影响因素研究[D]. 张梦妍. 西北农林科技大学, 2021(01)
- [3]细叶百合体细胞胚发生过程中LpABCB21和LpPILS7功能初步解析[D]. 宋胜利. 沈阳农业大学, 2020(04)
- [4]海南白花油茶离体快速繁殖和再生体系的建立及应用[D]. 侯辛辛. 海南大学, 2020(02)
- [5]五种月季品种的快繁和再生体系的优化探究[D]. 王钱钱. 安徽农业大学, 2020(04)
- [6]林木体细胞胚发生研究进展[J]. 习洋,孙宇涵,李云. 保定学院学报, 2020(03)
- [7]花生再生体系的建立及AhRR基因家族分析[D]. 董建军. 河南农业大学, 2019(04)
- [8]花生再生体系的优化及AhSAD基因启动子的转化[D]. 李文静. 郑州大学, 2016(02)
- [9]河南省育成花生品种的幼叶体细胞胚胎诱导[J]. 苗利娟,张新友,黄冰艳,石磊,齐飞艳,高伟,董文召,汤丰收. 江苏农业科学, 2015(09)
- [10]赤霉素、光照及基因型对花生体细胞胚诱导和植株再生的影响[J]. 蒋菁,熊发前,唐秀梅,钟瑞春,贺梁琼,李忠,韩柱强,唐荣华. 南方农业学报, 2013(06)