一、长春地区食品污染蜡样芽胞杆菌监测报告（论文文献综述）
张梦垚[1]（2021）在《基于CRISPR技术的副溶血性弧菌核酸现场检测系统的研究》文中研究表明食品安全关系到每个人的生命健康。其中,食源性致病菌导致的食品污染影响最大、分布最广泛,已成为世界性的公共卫生问题。食品在生产、加工、流通、销售、消费等多个环节都可能存在生物安全风险,因此构建有效的致病菌检疫体系,实现致病菌现场快速检测具有重要意义。聚合酶链式反应（Polymerase chain reaction,PCR）技术是检疫机构最常使用的检测技术。本论文以水产中常见的致病菌副溶血性弧菌（Vibrio parahaemolyticus）为研究对象,以核酸检测技术为基础,结合以规律间隔成簇短回文重复序列（Clustered regularly interspaced short palindromic repeat,CRISPR）及相关蛋白Cas12a酶体系为主的基因编辑技术和真空冷冻干燥技术,建立了操作简单、准确性高、成本低、荧光可视化、便于储存运输的现场快速检测系统。主要研究内容及结果如下:（1）建立了基于热循环仪的副溶血性弧菌荧光PCR检测方法。针对副溶血性弧菌的特异性不耐热溶血素（Thermolabile hemolysin,tlh）基因保守区域,设计3对特异性PCR引物并进行筛选,并优化核酸提取方法和扩增体系。为减少气溶胶污染,将PCR扩增原料里的脱氧胸苷三磷酸（Deoxythymidine triphosphate,d TTP）替换为脱氧尿苷三磷酸（Deoxyuridine triphosphate,d UTP）,采用打开热盖的小型商业热循环仪进行PCR扩增。并将建立的PCR现场检测方法与实验室实时PCR系统检测方法相比较,结果具有一致性。该检测方案可以有效避免核酸检测过程中的气溶胶污染问题,其结果可在便携式观察仪上进行荧光可视化检测。（2）为进一步提高检测的特异性,建立了基于CRISPR/Cas12a的副溶血性弧菌现场荧光可视化检测方法。针对副溶血性弧菌tlh基因的最适特异性PCR引物的扩增片段,筛选含原间隔基序（Protospacer-adjacent motif,PAM）的区域,并设计向导核糖核酸（CRISPR RNA,cr RNA）,构建CRISPR/Cas12a体系。通过对反应试管、反应体系的优化实现了Cas12a蛋白酶最佳反应活性温度与PCR反应高温的平衡。利用商业热循环仪和实验室设计的与之配套的小型荧光观察装置,建立无需开盖即可进行后续荧光检测避免交叉污染的一体化反应。阳性扩增产生肉眼可见的绿色荧光而阴性扩增无荧光信号。该方法检测限为1.02×102 copies/reaction,且低浓度阳性扩增样本也发出明显的绿色荧光,结果判别方便直观。通过利用一次性棉签擦拭携带副溶血性弧菌的病虾进行致病菌取样,快速裂解细胞提取DNA进行后续反应验证了可行性,最终建立以便携式仪器为主的准确度高、可靠性好、操作简单、成本低廉的现场可视化检测方法。（3）为减少核酸检测试剂对低温环境的依赖,建立了应用于现场检测的核酸扩增试剂冷冻干燥方法。利用冷冻干燥技术对PCR检测试剂进行脱水处理,使检测试剂能以固体形态在室温下稳定储存和运输,并能保持其生物活性。研究优化了冻干保护剂的配方并调试了冻干工艺参数,以30%（w/v）海藻糖、10%（w/v）普鲁兰多糖和60%（w/v）甘露醇按2:2:1体积比混合的溶液作为冻干保护剂。将直径为1.8 mm的钢珠加入到PCR混合液中,预冷冻后进行6小时的真空干燥,成功制备了形态良好,具有较高韧性,可在磁力吸附作用下移动的冻干产品。复水活化后冻干试剂维持原反应活性。经验证该冻干试剂在聚丙烯、聚苯乙烯和聚乙烯等不同硬度的材质表面均具有良好的移动性能。该冻干PCR试剂不溶于油相,以15μL无核酶水复溶,数秒内即可得到澄清溶液。冻干试剂在50℃的高温条件下保存一周仍能保持较好的活性。该方法有助于解决核酸现场检测面临的冷链保存运输问题,降低现场检测的限制条件和检测成本,对推动核酸检测技术向资源匮乏地区的应用具有重大意义。
郭娟[2]（2021）在《2019-2020年扬州市食品安全风险监测及风险因子识别》文中提出食品安全风险监测是保障食品安全的重要支撑。我国《食品安全法》的第二章明确规定:“国家建立食品安全风险监测制度,对食源性疾病、食品污染以及食品中的有害因素进行监测。”为了解扬州市食源性疾病的流行病学特征、各类食品中污染物的分布状况,掌握扬州市食品安全的总体状况,本研究于2019—2020年对扬州市食源性疾病、食品中微生物及其致病因子、食品中化学污染物及有害因素进行监测,并对监测结果进行分析,确定高危食品类别及有害因素污染水平,为有关部门实施防控措施提供数据支撑。1 食源性疾病监测目的:了解扬州市食源性疾病发病情况和流行特征。方法:收集2019—2020年扬州市各哨点医院的食源性疾病病例信息,采用描述性流行病学方法进行分析;并采集病例生物标本进行病原学分析;同时对上报的食源性疾病暴发事件进行描述性分析。结果:2019-2020年共监测食源性疾病病例9504例,病例集中于第三季度（36.92%）;≥66岁年龄组的人群发病率最高（20.82%）;病例职业中农民的发病率最高（26.32%）;可疑进食场所以家庭为主,食品加工及包装方式以家庭自制为主;可疑食品类别以肉与肉制品为主。共采集病例生物样本2040份,总阳性率为10.39%;共检出4种病原微生物,分别为诺如病毒（5.00%）、沙门氏菌（3.82%）、副溶血性弧菌（1.51%）和金黄色葡萄球菌（0.05%）;病原体在6～15岁年龄组人群中检出率较高（16.81%）,且以诺如病毒和沙门氏菌为主,副溶血性弧菌在16～25岁年龄组人群中检出率最高;病原体在第一季度检出率最高（18.37%）,且均为诺如病毒;副溶血性弧菌在第三季度检出率最高。有病原体检出病例对应的最可疑食品类别为乳与乳制品（24.06%）。沙门氏菌的主要型别为鼠伤寒沙门氏菌（35.90%）,诺如病毒以Ⅱ型为主（83.33%）。共上报食源性疾病暴发事件13起,累计发病人数175人,病死率0.57%（1/175）。在致病因素明确的9起暴发事件中,33.33%的暴发事件是由亚硝酸盐引起,其次为蜡样芽胞杆菌（22.22%）、变形杆菌（11.11%）、副溶血性弧菌（11.11%）、砷化物（11.11%）;暴发时间集中于第三季度（53.85%）;暴发场所以饭店（酒店）为主（46.15%）;原因食品主要是调味品、肉与肉制品。结论:2019—2020年扬州地区的食源性疾病、病原体及食源性疾病暴发事件具有各自流行特征,相关部门可根据相应特征采取适宜的防控措施,以减少食源性疾病的发生。2 食品中微生物及其致病因子监测目的:了解扬州市食品中微生物及其致病因子的污染状况。方法:依据2019—2020年《扬州市食品安全风险监测方案》,在扬州市6个县市区内进行食品样品的采集,参照《国家食源性致病菌监测工作手册》中的标准操作程序进行相关微生物及其致病因子的检测。结果:2019—2020年共监测5大类398份食品样品,总不合格率为8.04%（32/398）,其中4类11份食品样品检出卫生指示菌指标超标,超标率为4.55%（11/242）,具体表现为肉与肉制品、餐饮食品中大肠埃希氏菌超标,粮食制品中霉菌,乳与乳制品中碱性磷酸酶超标,各自的超标率分别为1.67%（1/60）、4.08%（4/98）、4.17%（2/48）、11.11%（4/36）。3类23份食品样品中检出致病微生物,总检出率为7.06%（23/326）,共检出5种25株致病微生物,其中蜡样芽胞杆菌、克罗诺杆菌属检出率较高,分别为16.05%、10.42%,主要污染的是粮食制品和餐饮食品;粮食制品、肉与肉制品中的致病微生物检出率较高,分别为29.17%和4.86%,粮食制品中主要检出蜡样芽胞杆菌、肉与肉制品中主要检出金黄色葡萄球菌。便利店/零售店、农贸市场、超市的食品致病微生物污染较严重,检出率分别为23.08%、11.11%、5.19%。结论:扬州市粮食制品、肉与肉制品、餐饮食品中的微生物污染较为严重;主要污染食源性致病菌为蜡样芽胞杆菌、克罗诺杆菌属及金黄色葡萄球菌;食源性致病菌的分布较为零散。3 食品中化学污染物及有害因素监测目的:了解扬州市食品中化学污染物及有害因素的污染状况,确定风险因子的可能来源及分布,为食品安全防控工作提供数据依据。方法:依据2019—2020年《扬州市食品安全风险监测方案》,在扬州市辖区内采集食品样品,参照《国家食品污染和有害因素风险监测工作手册》中的标准操作程序,对样品中的相关化学污染物及有害因素进行检测;并采用点评估法对食品中的主要污染物进行膳食暴露风险评估。结果:2019—2020年共检测9大类389份食品样品101个指标,样品合格率为93.32%;其中5大类26份食品样品中共9个指标超标,样品超标率为6.68%。不合格指标为水产动物中的镉元素,鸡蛋中的甲硝唑、强力霉素、氟苯尼考、金刚烷胺和灭蝇胺,鸡肉中的金刚烷胺,辣椒中的氯氟氰菊酯、油条中的含铝添加剂、小麦制品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇。点评估的结果显示蔬菜中的百菌清、苯醚甲环唑、二硫代氨基甲酸酯,谷物和水产动物中的镉,小麦制品中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇带来的膳食暴露风险不可接受。结论:扬州市部分食品中存在化学污染物超标现象,且部分化学污染物的膳食暴露风险较大,应引起相关部门的重视。
赵薇,杨修军,王太君,张思文,刘思洁,李可维,石奔,孙景昱,付尧,黄鑫[3]（2020）在《2011～2019年吉林省餐饮食品中3种食源性致病菌监测分析》文中认为目的了解吉林省餐饮食品中食源性致病菌污染情况。方法对2011～2019年吉林省9个监测地区采集的7451件餐饮食品中3种食源性致病菌进行分离与鉴定。结果 2011～2019年吉林省餐饮食品中3种致病菌的总检出率分别为蜡样芽孢杆菌24.45%、金黄色葡萄球菌2.72%、单核细胞增生李斯特氏菌3.00%; 9个监测地区中蜡样芽孢杆菌污染较严重的重点地区为白山市（35.76%）,其次为延边州（33.33%）。单核细胞增生李斯特氏菌检出率最高的是白山市（6.90%）,其次是松原市（3.68%）。白城市金黄色葡萄球菌检出率最高5.36%,其次为白山市（3.63%）;蜡样芽孢杆菌在百货商场中检出率最高,金黄色葡萄球菌在零食加工店检出率较高（6.25%）,其次为饮品店（6.14%）和快餐店（5.66%）;在监测的9类餐饮食品中,蜡样芽孢杆菌总检出率最高（24.45%）,以沙拉和粥类为主,金黄色葡萄球菌和单增李斯特菌分别在沙拉（9.72%）和中式凉拌菜（6.13%）中的检出率最高。结论吉林省近年来蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌检出率对比往年间明显降低,单核细胞增生李斯特氏菌检出率略有回升现象,其中白山市和白城市食源性致病菌污染情况较吉林省其他地市严重,餐饮服务环节中食源性致病菌检出率高,尤其是沙拉和凉菜等未经深加工的食物。相关部门应针对重点地区和食品类型,加强管控力度。
赵薇,杨修军,张思文,王太君,刘思洁,李可维,石奔,孙景昱,付尧,黄鑫[4]（2020）在《2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染状况分析》文中研究说明目的了解2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染情况,为食品安全监管及食源性疾病防治提供理论依据。方法采集2011—2019年吉林省九个地（市）级的餐饮服务环节和流通环节中的样品3 173份,参照GB 4789.14—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽胞杆菌检验》中的方法,对食品中的蜡样芽胞杆菌进行检测并分析。结果 2011—2019年吉林省3 173份食品样品中,蜡样芽胞杆菌总检出率为23.6%（750/3173）,2015年检出率最高（38.5%,62/161）,2017年检出率最低（11.8%,20/170）;白山市检出率最高（35.8%,139/388）,其次为延边州（31.4%,97/309）,四平市检出率最低（15.3%,76/496）;蛋与蛋制品检出率最高（60.0%,3/5）,其次为乳与乳制品（39.3%,114/290）及婴幼儿食品（31.1%,185/595）;百货商场中蜡样芽胞杆菌检出率最高（32.4%,22/68）,其次为小吃店及饮品店（30.9%,43/139）、快餐店（29.1%,25/86）。平板计数（CFU）法测得蜡样芽胞杆菌检出结果的中位数（四分位数间距）为5.8（2.9,8.7） CFU/g（mL）,稀释培养测数（MPN）法测得结果的中位数（四分位数间距）为6.4（3.2,9.6） MPN/g（mL）。结论吉林省各地市食品中存在不同程度的蜡样芽胞杆菌污染,以白山市最为严重,蛋与蛋制品、乳与乳制品是主要受污染食品,食品监管部门应加强百货商场、小吃店及饮品店等地点的安全监测与管理。
张煜[5]（2020）在《微生物菌肥对烟草品质及土壤细菌多样性影响的研究》文中研究指明为加快实现秸秆和畜禽粪便循环再生利用,提高东北地区烟草产量和品质,本文通过富集培养分离筛选出制备微生物菌肥的优良菌株,提出牛粪微生物菌肥优化制备工艺,并研究了制备菌肥对土壤理化性质、肥力、微生物群落结构以及烟草农艺性状的影响。主要研究结果如下:从林间、烟地及牛粪中分离得到120株菌株中筛选出生长速率快、高效降解纤维素最佳菌株为嗜热球形脲芽胞杆菌（Ureibacillus thermosphaericus）。嗜热球形脲芽胞杆菌扩繁培养基配方:蛋白胨50 g+滤纸50 g+氯化钠50 g+碳酸钙20 g+酵母提取物10 g+蒸馏水10 L。最佳扩繁培养条件:接种量20%,温度30～35℃,pH值为7.0,转速400 r/min,通气量100 ln/h。微生物菌肥制备优化工艺为:1000 kg牛粪+25 kg秸秆+7.5 kg菌液+2.5 kg水比例混合搅拌用塑料布覆盖,堆肥底径为145 cm,高为95 cm。混料初始含水率控制在60±1%,堆肥1～6周在升温和高温阶段每3 d翻堆1次,6～12周降温阶段每7 d翻堆1次。堆肥过程中含水量保持在60±5%。堆肥过程pH范围7.3～7.8之间,总氮含量先降后升,铵态氮含量下降,硝态氮含量上升,水解氮含量亦呈现总体上升趋势。堆体表面向下40 cm有效磷和速效钾含量最高,分别为17.60 g/kg和15.60g/kg。制备菌肥可显着提高烟草种子“龙江911”发芽率（p<0.05）。堆肥过程中,肥堆优势细菌门从厚壁菌门（Firmicutes）向变形菌门（Proteobacteria）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、绿弯菌门（Chloroflexi）及放线菌门（Actinobacteria）演替,形成新微生物菌肥群落结构。嗜热球形脲芽胞杆菌在不同堆肥时期相对丰度均处于前50,但堆肥前期、中期、后期丰度呈现先降后增显着变化。说明了添加菌株对肥堆微生物群落演替的重要作用。而后通过构建生态网络图确定了变形菌门、放线菌门、厚壁菌门、芽单胞菌门（Gemmatimonadetes）及绿弯菌门在微生物群落发展中的重要性。微生物菌肥382.5 kg/hm2+烟草专用肥375 kg/hm2混合施用能够显着改善土壤pH值至烟草生长最适范围,提高土壤水解氮含量、速效钾含量、有机碳含量、有机质含量与蔗糖酶活性,同时对烟草的株高、茎围、叶面积、产量、氮和钾含量具有最佳促进效果。施用微生物菌肥可显着改善土壤理化性质,促进烟草代谢产物积累。单施微生物菌肥1080 kg/hm2处理对土壤总孔隙度（51.2±2.1%）、有效磷含量（25.26 mg/kg）、过氧化氢酶活性、脲酶活性提升效果均为各试验组中最佳。同时单施微生物菌肥1080 kg/hm2处理组烟草总糖、还原糖和蛋白质含量最高,烟草总氮/烟碱比值最优,烟草品吸质量得分最高。单施烟草专用肥会导致土壤细菌多样性降低,而施用微生物菌肥或混合施用微生物菌肥和烟草专用肥有助于改善土壤中的细菌多样性。但单施烟草专用肥与单施微生物菌肥处理组群落组成差异较大。土壤细菌多样性与理化性质的冗余分析表明:有效磷、有机碳、pH、蔗糖酶活性、过氧化氢酶活性均是土壤细菌群落差异的重要驱动力。本研究优化了牛粪-秸秆堆肥技术,配制出了高效微生物菌肥,提出了能够有效提高土壤肥力、改善土壤细菌多样性、提高东北地区烟草品质量和产量的微生物菌肥堆肥及施肥技术。
海岩[6]（2020）在《内蒙古炭疽流行规律与炭疽芽胞杆菌的基因特征研究》文中研究指明炭疽是由炭疽芽胞杆菌引起的一种急性人兽共患传染病。人类与感染动物接触或剥食染疫动物而感染,导致人群发生皮肤性或肠型炭疽,继而可转为肺炭疽,导致严重的公共卫生问题。内蒙古是炭疽疫情的多发地区,特别是畜牧业较为发达的东部地区,畜间炭疽疫情时有发生,已成为当地人群的重要公共卫生问题。为了深入了解内蒙古炭疽疫情的流行病学规律和炭疽杆菌的遗传进化特征。本研究基于1956～2018年间内蒙古地区的炭疽报告病例资料,从人间炭疽的三间分布、患者的性别、年龄特征、疫情变化规律等多角度探究内蒙古地区人间炭疽的流行病学特征。此外,将从患者分离的菌株进行基因分型和比较基因组学分析,调查内蒙古炭疽杆菌的遗传多态性、菌株间的流行病学关联性以及起源进化。这不仅为全面了解内蒙古地区炭疽的流行病学特征提供了科学依据,而且为内蒙古地区人畜间炭疽防控和检测策略的制定提供科学依据。主要研究内容和结果如下:1.经内蒙古炭疽流行病学调查发现,在该地区人间炭疽经历了三个流行阶段和8个流行高峰,而短期集中暴发是我区炭疽流行的独特特征。在炭疽的三个流行时期内,农牧民的所占比例呈现逐渐增加,而其他职业则呈现逐步减少的趋势。职业分布特征呈现出由早期的以多种职业分布变为当前的农牧民为主的特征。发病年龄范围呈现逐步由宽变窄的趋势,而且多发年龄组趋于稳定在30～60岁组。此外,暴发流行次数逐步减少,暴发所涉及的病例数也明显的下降。该结果表明内蒙古炭疽疫情的流行病学趋势已发生了明显的变化,发病率持续稳定在较低水平,以农牧民为主,而且流行时间较为集中。2.对临床样本进行细菌学及血清学检验和病例特征分析,对查明传染源和患者的确诊具有重要的临床意义。在2010年～2018年间共采集可疑患者的各类标本248份,共分离到炭疽杆菌27株,分离率为10.89%。对病灶直接按压制片染色镜检和采集后涂片染色镜检均可以用于炭疽样本的初步镜检。成熟的菌落在低倍显微镜观察可见卷发状花纹,是炭疽杆菌典型的生物学特征,可对疑似菌株做出初步判断,但需用噬菌体裂解实验和青霉素抑菌试验鉴定。此外,荧光定量PCR验证检测有时效性。该试验结果表明,及时准确的实验室检测和病例特征分析可为炭疽疫情的判定提供科学参考。3.对内蒙地区疫情现场分离的炭疽杆菌分离株进行SNP基因分型分析,这对揭示菌株的遗传进化特征具有重要意义。结果发现在内蒙古地区分离株菌中8个SNP位点,如A.Br.006、A.Br.007、A.Br.009、B.Br.001、B.Br.002、B.Br.003、B.Br.004和A/B.Br.001均无 SNP 多态性,但是其余 5 个 SNP 位点,如 A.Br.001、A.Br002、A.Br.003、A.Br.004和A.Br.008在不同菌株间呈现出SNP多态性。基于炭疽芽胞杆菌的SNP聚类分析表明,36株试验菌株可聚为4个类群,依次为A.Br.Ames、A.Br.001/002、A.Br.Aust94和A.Br.008/009亚群,其中18株均属于A.Br.Ames亚群,而16株则属于A.Br.001/002亚群。另外各有1株炭疽杆菌分别属于A.Br.Aust94和A.Br.008/009亚群。本试验初步的阐明了我区分离的炭疽杆菌的SNP多态性特征,确定了主导SNP基因型。4.MLVA-15基因分型方法国内外常应用于炭疽的暴发流行和溯源调查研究领域。本试验采用该方法对内蒙古地区分离的36株炭疽杆菌进行了分析,从而揭示菌株间存在的的流行病学相关性。该试验结果表明,15个VNTR位点中有3个位点vrrB1,CG3和VR12在内蒙古分离株扩增结果全部相同,其余8个位点,如vrrA、vrrB2,vrrC2、VR16、VR17、VR19、VR32和VR35中存在一定的差异性,而剩余4个位点,如pXO1-aat、pXO2-at、vrrC2和VR23中存在明显的差异性。此外,36株炭疽杆菌聚类为12种MLVA基因型,其中5个为共享基因型,提示菌株间可能存在流行病学相关性;另7个为独特基因型,并且每个基因型仅出现于1株炭疽杆菌;除变异度较大的pXO1-aat和pXO2-at位点,所有菌株可被分为5个型,而增加这两个位点使基因型别从5个增加到12个。该试验结果有助于内蒙古菌株与其他地区菌株的鉴定,为疫情的溯源调查提供依据。5.炭疽杆菌的全基因组测序和比较基因组分析是最终全面系统了解炭疽杆菌相关的遗传进化特征研究的最佳方案。本试验对内蒙古地区分离的7株炭疽杆菌进行了全基因组测序分析。结果表明,内蒙古炭疽杆菌分离株的核心基因组较为稳定,但基因组呈现开放的状态,能够以多种方法获得新基因,经预测其中BA130和BA132获得了较多的新基因。基于核心基因系统发育分析发现,7株炭疽杆菌分为2组（A和B）,A和B组的菌株分别来自赤峰和兴安盟。其中B组包括5株菌,4株为分离自患者（BA125,BA 130,BA 132 和 BA168）,1 株分离自病牛（BA77）,并且 BA77,BA125和BA130呈现相同的A.Br.001/002基因型,提示菌株间存在流行病学关联。此外,内蒙古的菌株与日本和南韩的炭疽杆菌有较高的遗传相似性,为了解亚洲炭疽杆菌的遗传进化溯源研究提供新的思考。
姚威威[7]（2020）在《影响斑玉蕈和香菇产业链安全的关键因素的初步研究》文中提出“民以食为天,食以安为先”,食品安全关系到千家万户。随着国民经济的发展、人民生活水平的提高及我国食用菌产业的不断壮大,人们对食用菌产品的口感和品质要求也越来越高,并开始更多的关注其营养和安全问题。对食用菌产品中有害物质含量控制及食用菌栽培过程中杂菌污染等影响食用菌产业链上下游安全的关键因素的研究,对提高食用菌产品品质及食用安全性至关重要。本研究首先以食用菌下游生产企业中涉及食用菌产品品质和安全性的杂菌污染问题为切入点,分别以一家大型斑玉蕈生产企业在3个不同省市产地发生污染的培养基质、菌种和子实体样品为材料,结合菌落形态特征、分子测序及显微染色观察等方法对分离到的病原微生物进行分离鉴定,并通过平板对峙实验分析了病原菌对斑玉蕈菌丝生长的影响。从样品中共分离得到了11株可疑病原微生物,包括10株细菌和1株真菌,分属于为3个科7个属。其中肠杆菌科（Enterobacteriaceae）为优势科,芽胞菌属（Bacillus）为优势属,其中2株细菌可能分别为芽胞杆菌属和肠杆菌属（Enterobacter）新种。平板对峙实验结果显示7株细菌和1株真菌对相应宿主斑玉蕈菌丝的生长有明显的抑制作用,系统发育树分析发现5株分离到的枯草芽胞杆菌及其近缘种组成的分支独立于芽胞杆菌属的其它典型种组成的分支之外。结合生产实际,提出培养料的灭菌和出菇管理环节是斑玉蕈栽培中预防病害的2个关键控制点。同时,以香菇为材料,对影响食用菌产品安全中有害物质含量的上游遗传机制进行分析。跟踪检测香菇生长过程中内源性甲醛的含量变化,应用RT-qPCR对前期工作中得到的5个Csl基因表达量进行检测,并对香菇含硫化合物伴生甲醛途径中的关键酶C-S lyase进行了研究。结果发现香菇子实体发育过程中甲醛含量和Csl基因表达都呈现先上升后下降的变化趋势。除已发现的Csl1最可能在香菇含硫化合物伴生甲醛的生物合成途径中发挥催化功能外,Csl2基因为本研究首次发现可能具有催化活性。除此之外,本研究也首次对得到的5个CSL蛋白进行异源表达,摸索了香菇C-S lyase体外催化反应的HPLC检测条件,并尝试对异源表达的蛋白进行体外催化反应。本论文研究结果将对加强相关食用菌产品的安全生产和上下游产业链管理方面提供理论参考,为斑玉蕈及其他食用菌工厂化生产过程中的污染防控提供借鉴,并为开发分子标记辅助检测食用菌品质相关代谢产物的方法奠定一定的科学基础。
谷清华[8]（2019）在《云南省细菌性食源性疾病现状分析及防控对策研究》文中研究指明“民以食为天,食以安为先”。21世纪以来,随着全球经济一体化,国际间经济贸易活动的增加、人口频繁流动成为常态,自然环境不断恶化、人类饮食结构不断改变,食品安全事件在全世界不断发生,这不仅对人类健康构成了威胁,同时也对各国经济产生严重影响。云南省食源性疾病暴发事件的发生率、发病人数、死亡人数连续几年都排在全国前列,食源性疾病的防控面临更大的风险和挑战。在明确病因的因素中,细菌性食源性疾病占主要部分。因此,研究云南省细菌性食源性疾病的暴发并针对性的提出防控措施,具有重要的现实意义和经济价值。本文以云南省食源性疾病监测系统2011～2015年监测的细菌性食源性疾病暴发事件为研究对象,采用描述性流行病学方法和统计学方法,对云南省近5年来细菌性食源性疾病暴发事件的时间、场所、致病因子、食品种类和发病地区等相关因素进行统计分析,探讨有效减少细菌性食源性疾病暴发事件发生的防控策略。2011～2015年间,细菌性食源性疾病发病人数占云南省食源性疾病人数43.3%;细菌性食源疾病暴发的时间主要是第2和第3季度;学生食堂是细菌性食源疾病暴发的主要场所,其次为农村宴席;沙门氏菌是细菌性食源疾病的主要致病因素;椰毒假单胞菌是致死的主要病因。通过总结分析,就食源性疾病的管理包括预防、监测、调查、治疗及其控制的全部内容,我们分别从健全法律制度、完善食品安全标准体系、强化食品安全知识宣传教育、加强科学研究和人才队伍建设、建立高效政府监管机构、疾病监测体系、加强行业自律等方面提出了一些具体的对策和建议。这些对策,将会在一定程度上提高细菌性食源性疾病暴发和食品安全隐患的早期识别、预警与防控能力,有效降低食源性疾病的威胁。
张云波[9]（2018）在《健康中国战略下丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设研究》文中提出习近平总书记在党的十九大所作的报告中指出,“人民健康是民族昌盛和国家富强的重要标志”,提出要“实施健康中国战略”。云南省、丽江市全面贯彻落实党中央部署,积极推进健康云南、健康丽江建设。让全民健康起来,让想健康的人到云南来、到丽江来,食品安全作为健康的首要前提,在健康丽江建设中的作用将更加重要。因此,必须贯彻预防为主、风险防控的原则,做好食品安全风险监测评估交流工作,建设符合丽江实际的食品安全风险监测评估交流体系,减少食品安全事件的发生,打造一个安全、健康、协调、可持续发展的良好环境,为实现健康丽江建设战略目标打下坚实基础。笔者通过学习和调研,围绕健康中国战略下丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设作了深入思考,充分了解了相关的政策背景、国内外的研究进展,明确了研究的背景、意义、目的、方法等,分析了当前丽江市食品安全和食品安全风险监测工作现状,剖析了存在的问题和原因,提出了健康中国战略下丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设目标和措施建议。通过分析,笔者认为,当前丽江市食品安全风险监测评估交流工作与社会经济发展和人民群众不断增长的健康保障需求还有一定差距,仍然存在一些亟待解决的问题,主要原因是职责理解不够深、队伍素质不够高、经费保障不充足、检测能力不强,需要进一步提高思想认识、成立领导小组、明确组织机构和人员、争取经费保障、提升检验检测能力、加大监测力度、强化风险评估、加强风险交流和标准宣贯、强化食品营养工作、提升信息化支撑水平、加强综合保障,充分发挥食品安全风险监测工作在“预防为主、风险管理、全程控制、社会共治”的食品安全治理体系中的重要基础性作用。在本论文的研究撰写过程中,笔者查阅了大量政策文件,阅读了许多相关论文着作,全面了解了丽江市食品安全和食品安全风险监测评估交流工作现状,接触到了许多新的知识观点,感到受益匪浅,为进一步开展好丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设工作获得了良好的摸索和实践。
郭莹莹[10]（2018）在《云南省普洱市食源性疾病监管现状与对策的研究》文中提出食源性疾病中的食物中毒泛指所有因为进食了受污染食物、致病细菌、病毒,又或被寄生虫、化学品或天然毒素感染了的食物。普洱市位于中国云南省西南部,少数民族众多,饮食习惯各不相同,动植物资源丰富,由于特殊的民族饮食习惯和丰富的动植物资源,每年都会发生一些因误食有毒动植物中毒和食用因加工工艺不科学产生的有毒副产物的食物或是自行发酵中产生的有毒霉菌毒素的食物而导致的食源性疾病的发生。目前我国已经开始启用了三套食源性疾病网络监测上报系统,分别是食源性疾病事件监测系统、食源性疾病监测报告系统和突发公共卫生事件报告管理系统。由于食源性疾病（食物中毒）监测报告网络的哨点医院覆盖不全面,到2018年为止,整个普洱市9县1区、32个镇、71个乡、1035个行政村只扩大到了49家哨点医院。普洱市在2004-2015年十年间,发生的食源性疾病起数只有67起,这个数据远远低于实际发生的起数。所以,建立以乡、村级卫生院为哨点的食源性疾病（食物中毒）管理体系,扩大乡、村级卫生院和卫生室的哨点医院,对于普洱市的食源性疾病（食物中毒）报告系统的建设有重要的意义。本文通过文献分析法、对比分析法、实证研究法及归纳分析法等四种方法,叙述了当前国内外食源性疾病（食物中毒）监管体系的优缺点,比较了发达国家食源性疾病（食物中毒）方面的监管模式和政策措施与我国的差异,通过比较,找出适合我国国情的食源性疾病（食物中毒）监测网络体系。本文通过大量的实证,分析了2004-2015年普洱市暴发的食源性疾病（食物中毒）报告的统计数据及2004-2015年普洱市突发公共卫生事件（食物中毒）报告的统计数据,论证了当前普洱市食源性疾病（食物中毒）上报系统的现状及可以完善的部分。最后通过归纳总结,在以扩大乡、村级哨点医院对策的食源性疾病监测体系的基础上提出建立乡、村级卫生院为哨点医院的食源性疾病（食物中毒）监管体系建设的可行性。
二、长春地区食品污染蜡样芽胞杆菌监测报告（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、长春地区食品污染蜡样芽胞杆菌监测报告（论文提纲范文）
（1）基于CRISPR技术的副溶血性弧菌核酸现场检测系统的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号清单 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 课题背景 |
| 1.1.1 食品安全概况 |
| 1.1.2 食源性致病菌的危害 |
| 1.1.3 食源性致病菌现场检测的重要性 |
| 1.2 副溶血性弧菌的研究进展 |
| 1.2.1 副溶血性弧菌的生物特性及危害 |
| 1.2.2 副溶血性弧菌的检测方法 |
| 1.2.2.1 传统生物学诊断 |
| 1.2.2.2 分子生物学检测 |
| 1.3 核酸扩增检测方法基本流程及其存在的问题 |
| 1.4 冷冻干燥技术原理概述 |
| 1.5 基于CRISPR技术的核酸检测方法研究进展 |
| 1.6 研究目的、内容和技术路线 |
| 1.6.1 研究目的和内容 |
| 1.6.2 技术路线 |
| 1.7 本章小结 |
| 第二章 基于热循环仪的荧光PCR检测方法的建立 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 材料和试剂 |
| 2.2.1.1 实验材料 |
| 2.2.1.2 常用试剂 |
| 2.2.2 仪器设备 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.2.3.1 实验细菌培养及核酸提取 |
| 2.2.3.2 实时荧光PCR引物设计与体系建立 |
| 2.2.3.3 基于打开热盖的热循环仪的荧光PCR可视化检测 |
| 2.2.3.4 特异性与灵敏度评估 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 实时荧光PCR引物设计及体系建立 |
| 2.3.2 基于热循环仪的PCR扩增可行性评估 |
| 2.4 本章小结 |
| 第三章 基于CRISPR/Cas12a的现场可视化检测方法的建立 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 材料和试剂 |
| 3.2.1.1 实验材料 |
| 3.2.1.2 常用试剂 |
| 3.2.2 仪器设备 |
| 3.2.3 实验方法 |
| 3.2.3.1 副溶血性弧菌核酸快速提取 |
| 3.2.3.2 基于CRISPR/Cas12a的可视化检测体系建立 |
| 3.2.3.3 CRISPR-PCR一体化检测 |
| 3.2.3.4 特异性与灵敏度评估 |
| 3.2.3.5 实际样本的检测分析 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 CRISPR/Cas12a体系的设计 |
| 3.3.2 CRISPR/Cas12a体系用于PCR扩增的兼容性评估 |
| 3.3.3 CRISPR-PCR的特异性和灵敏度评估 |
| 3.3.4 CRISPR-PCR在实际样本中的检测应用 |
| 3.4 本章小结 |
| 第四章 应用于现场检测的核酸扩增试剂冷冻干燥方法的建立 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 材料和试剂 |
| 4.2.1.1 实验材料 |
| 4.2.1.2 常用试剂 |
| 4.2.2 仪器设备 |
| 4.2.3 实验方法 |
| 4.2.3.1 副溶血性弧菌核酸提取及PCR扩增 |
| 4.2.3.2 冻干PCR试剂的制备 |
| 4.2.3.3 冻干工艺的优化 |
| 4.2.3.4 冻干PCR试剂的性能测试 |
| 4.2.3.5 包裹钢珠的冻干PCR试剂的制备及性能测试 |
| 4.2.3.6 冻干PCR试剂的保存稳定性评估 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 冻干工艺的优化 |
| 4.3.1.1 冻干保护剂的优化与筛选 |
| 4.3.1.2 冻干参数的优化 |
| 4.3.2 包裹钢珠的冻干PCR试剂的制备 |
| 4.3.3 包裹钢珠的冻干PCR试剂的性能测试 |
| 4.3.4 冻干PCR试剂的保存稳定性评估 |
| 4.4 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 主要研究结论 |
| 5.2 主要特色及创新点 |
| 5.3 进一步研究展望 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）2019-2020年扬州市食品安全风险监测及风险因子识别（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 立题依据 |
| 1.1.1 食品安全问题的严重性 |
| 1.1.2 食品安全风险监测的意义 |
| 1.1.3 食品安全风险监测的研究现状 |
| 1.1.4 课题意义 |
| 1.2 研究方案 |
| 1.2.1 研究目标 |
| 1.2.2 研究内容 |
| 1.3 本项目的难点和创新点 |
| 参考文献 |
| 第2章 食源性疾病监测 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 材料 |
| 2.1.2 方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 食源性疾病病例监测结果 |
| 2.2.2 食源性疾病主动监测结果 |
| 2.2.3 食源性疾病暴发监测 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 食源性疾病病例监测结果分析 |
| 2.3.2 食源性疾病主动监测结果分析 |
| 2.3.3 食源性疾病暴发监测结果分析 |
| 2.3.4 食源性疾病的控制对策及建议 |
| 2.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第3章 食品中微生物及其致病因子监测 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 材料 |
| 3.1.2 方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 样品构成情况 |
| 3.2.2 微生物检出情况 |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 卫生指示菌监测情况分析 |
| 3.3.2 食源性致病菌监测情况分析 |
| 3.3.3 寄生虫监测情况分析 |
| 3.3.4 食品中微生物污染的控制对策及建议 |
| 3.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 第4章 食品中化学污染物及有害因素监测 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 食品中化学污染物及其有害因素监测总况 |
| 4.2.2 食品中不同污染物类别的检出及超标情况 |
| 4.2.3 食品中主要污染物的膳食暴露风险评估 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 食品中化学污染物及有害因素污染总况分析 |
| 4.3.2 食品中不同污染物类别的检出及超标情况分析 |
| 4.3.3 食品中主要污染物的膳食暴露风险评估结果分析 |
| 4.3.4 食品中化学物污染的控制对策及建议 |
| 4.4 本章小结 |
| 参考文献 |
| 附录一：2019年扬州市微生物及其致病因子监测种类及其项目 |
| 附录二：2019年扬州市化学污染物及其有害因素监测种类及其项目 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 |
| 致谢 |
（4）2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染状况分析（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 样品来源 |
| 1.1.2 主要仪器与试剂 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 检测方法 |
| 1.2.2 质量控制 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 蜡样芽胞杆菌检出情况 |
| 2.2 各类型食品中蜡样芽胞杆菌检出情况 |
| 2.3 各包装类型食品中蜡样芽胞杆菌检出情况 |
| 2.4 各采样地点食品中蜡样芽胞杆菌检出情况 |
| 2.5 蜡样芽胞杆菌计数结果分析 |
| 3 讨论 |
（5）微生物菌肥对烟草品质及土壤细菌多样性影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 肥料研究国内外概述 |
| 1.1.1 无机肥料 |
| 1.1.2 有机肥料 |
| 1.1.3 微生物菌肥 |
| 1.1.4 微生物菌株筛选 |
| 1.1.5 微生物菌肥作用机理 |
| 1.2 微生物菌肥对土壤微生物的影响 |
| 1.2.1 种植区土壤研究概述 |
| 1.2.2 高通量测序在土壤微生物研究中的应用 |
| 1.2.3 土壤微生物群落多样性变化 |
| 1.2.4 土壤酶活性对土壤的影响 |
| 1.3 烟草研究概述 |
| 1.3.1 烟草的种类与分布 |
| 1.3.2 烟草的生理生态学特性 |
| 1.3.3 烟草的经济价值 |
| 1.4 微生物菌肥在植物栽培中的应用 |
| 1.4.1 微生物菌肥在农业中的应用 |
| 1.4.2 微生物菌肥在林业中的应用 |
| 1.4.3 微生物菌肥在烟草种植中的应用 |
| 1.4.4 微生物菌肥存在的问题 |
| 1.5 研究目的和意义 |
| 1.6 技术路线 |
| 2 微生物菌肥菌株的筛选与扩繁 |
| 2.1 实验仪器和试剂 |
| 2.1.1 实验仪器 |
| 2.1.2 实验试剂 |
| 2.1.3 培养基 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 微生物菌肥菌株的分离 |
| 2.2.2 微生物菌肥菌株的筛选 |
| 2.2.3 微生物菌肥菌株的鉴定 |
| 2.2.4 微生物菌肥菌株的扩繁 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 微生物菌肥菌株的种类 |
| 2.3.2 微生物菌肥菌株的制备 |
| 2.3.3 微生物菌肥菌株的扩繁工艺优化 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 微生物菌肥的制备及营养成分分析 |
| 3.1 实验试剂和材料 |
| 3.1.1 实验试剂 |
| 3.1.2 试验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 微生物菌肥的制备 |
| 3.2.2 温度、pH和含水量的测定 |
| 3.2.3 有机碳的测定 |
| 3.2.4 氮的测定 |
| 3.2.5 有效磷的测定 |
| 3.2.6 速效钾的测定 |
| 3.2.7 微生物菌肥品质检测 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 微生物菌肥的堆积条件 |
| 3.3.2 微生物菌肥养分分析 |
| 3.3.3 微生物菌肥品质分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 微生物菌肥堆积过程中细菌多样性变化 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 实验试剂 |
| 4.1.2 实验仪器 |
| 4.1.3 样品采集及处理方法 |
| 4.2 研究方法 |
| 4.2.1 试验流程 |
| 4.2.2 微生物基因组总DNA提取 |
| 4.2.3 基因扩增序列及高通量测序 |
| 4.2.4 生物信息学分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 微生物菌肥制肥过程中群落的OTU差异 |
| 4.3.2 物种分类分析 |
| 4.3.3 Beta多样性分析及组间差异的统计学分析 |
| 4.3.4 微生物菌肥的群落网络分析 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 微生物菌肥对烟草产量与品质的影响 |
| 5.1 材料与设备 |
| 5.1.1 实验材料 |
| 5.1.2 主要仪器设备 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 烟草农艺性状的测定 |
| 5.2.2 烟草品质的测定 |
| 5.2.3 烟草品吸质量的评价标准 |
| 5.3 结果与分析 |
| 5.3.1 微生物菌肥对烟草农艺性状的影响 |
| 5.3.2 微生物菌肥对烟草品质的影响 |
| 5.3.3 烟草品吸质量的评价 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 微生物菌肥对土壤肥力及土壤细菌多样性的影响 |
| 6.1 材料与试剂 |
| 6.1.1 实验材料 |
| 6.1.2 实验试剂 |
| 6.1.3 实验仪器 |
| 6.2 实验方法 |
| 6.2.1 微生物菌肥处理后土壤物理性质的测定 |
| 6.2.2 微生物菌肥处理后土壤化学性质的测定 |
| 6.2.3 微生物菌肥处理后土壤酶活性的测定 |
| 6.2.4 微生物菌肥对土壤细菌群落的高通量测序 |
| 6.2.5 结果与分析 |
| 6.2.6 微生物菌肥对土壤物理性质的影响 |
| 6.2.7 微生物菌肥对土壤化学性质的影响 |
| 6.2.8 微生物菌肥对土壤酶活性的影响 |
| 6.2.9 微生物菌肥对土壤细菌群落变化的影响 |
| 6.3 本章小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 博士学位论文修改情况确认表 |
（6）内蒙古炭疽流行规律与炭疽芽胞杆菌的基因特征研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 炭疽概述 |
| 1.2 炭疽的病原学 |
| 1.3 炭疽的流行病学 |
| 1.3.1 传染源 |
| 1.3.2 传播途径 |
| 1.3.3 易感性 |
| 1.4 炭疽的致病性及临床特征 |
| 1.4.1 炭疽的致病性 |
| 1.4.2 炭疽的临床特征 |
| 1.5 炭疽流行概况 |
| 1.5.1 世界炭疽流行特点 |
| 1.5.2 中国炭疽流行现状 |
| 1.6 炭疽杆菌的分子分型概述 |
| 1.6.1 脉冲场凝胶电泳 |
| 1.6.2 限制性片段长度多态性 |
| 1.6.3 多位点序列分型技术 |
| 1.6.4 多位点可变数目串联重复序列分型 |
| 1.6.5 单核苷酸多态性分型 |
| 1.7 炭疽杆菌基因组概述 |
| 1.8 炭疽芽胞杆菌质粒的相关特征 |
| 1.9 炭疽疫苗研究进展 |
| 1.9.1 Sterne减毒苗 |
| 1.9.2 无荚膜减毒株 |
| 1.9.3 灭活的无细胞炭疽疫苗 |
| 1.9.4 高温致弱毒株(cap~+ tox~-) |
| 1.9.5 保护性抗原(PA)成分疫苗 |
| 1.9.6 新型炭疽疫苗 |
| 1.10 研究的目的和意义 |
| 2 内蒙古自治区1956～2018年炭疽流行病学特征研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 流行病学调查方法 |
| 2.1.2 数据资料来源 |
| 2.1.3 统计分析方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 疫情概况 |
| 2.2.2 内蒙古炭疽流行病学特征 |
| 2.2.3 炭疽暴发疫情病例类型及传播途径 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 3 内蒙古自治区2010～2018年炭疽病原的分离鉴定及病例诊断 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 主要仪器 |
| 3.1.3 主要试剂 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 标本采集 |
| 3.2.2 涂片制备与染色 |
| 3.2.3 菌株的分离鉴定结果 |
| 3.2.4 菌种保存 |
| 3.2.5 实时荧光PCR检测结果 |
| 3.2.6 ELISA检测IgG抗体结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 4 炭疽芽胞杆菌SNP分析 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 主要仪器 |
| 4.1.3 主要试剂 |
| 4.1.4 方法 |
| 4.1.5 数据分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 5 炭疽芽胞杆菌MLVA15分型 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 主要仪器 |
| 5.1.2 菌株来源 |
| 5.1.3 主要试剂 |
| 5.1.4 方法 |
| 5.1.5 PCR产物的检测 |
| 5.1.6 指标串联重复数的确定(等位基因重复数确定) |
| 5.1.7 等位基因(重复数)确定的方法 |
| 5.1.8 聚类分析 |
| 5.2 结果 |
| 5.2.1 VNTR位点的PCR扩增结果 |
| 5.2.2 聚类分析 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 6 内蒙古炭疽芽胞杆菌全基因组特征分析 |
| 6.1 材料与方法 |
| 6.1.1 生物安全及主要仪器 |
| 6.1.2 主要试剂 |
| 6.1.3 方法 |
| 6.2 结果 |
| 6.2.1 基因组组成特征 |
| 6.2.2 炭疽杆菌的RNA组成特征 |
| 6.2.3 炭疽杆菌的核心基因组特征 |
| 6.2.4 炭疽杆菌的KEGG分析结果 |
| 6.2.5 炭疽杆菌的COG分析结果 |
| 6.2.6 炭疽杆菌的泛基因组分析结果 |
| 6.2.7 核心基因组聚类分析结果 |
| 6.2.8 全国炭疽杆菌的核心基因组聚类分析结果 |
| 6.3 讨论 |
| 6.4 小结 |
| 7 讨论 |
| 8 结论 |
| 9 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（7）影响斑玉蕈和香菇产业链安全的关键因素的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 序言 |
| 1.2 食用菌产品安全概述 |
| 1.2.1 影响食用菌安全的因素 |
| 1.2.2 食用菌栽培过程中的微生物污染问题 |
| 1.2.3 甲醛含量对食用菌产品安全性的影响 |
| 1.3 斑玉蕈栽培过程中的微生物污染溯源研究进展 |
| 1.3.1 斑玉蕈的生物学特性 |
| 1.3.2 斑玉蕈的产业现状和工厂化栽培过程 |
| 1.3.3 斑玉蕈栽培过程中的病原微生物 |
| 1.4 香菇含硫化合物伴生甲醛代谢过程的研究进展 |
| 1.4.1 香菇的生物学特性 |
| 1.4.2 香菇中主要挥发性物质的结构与种类 |
| 1.4.3 香菇中含硫化合物伴生内源性甲醛的合成途径 |
| 1.4.4 半胱氨酸亚砜裂解酶(C-S lyase)对香菇内源性甲醛形成的影响 |
| 1.4.5 C-S lyase的结构与功能 |
| 1.5 本论文研究目的和意义 |
| 第2章 实验材料和方法 |
| 2.1 实验材料、试剂及主要仪器 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 主要试剂和培养基 |
| 2.1.3 引物及其序列 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 斑玉蕈病原微生物的分离鉴定 |
| 2.2.1.1 斑玉蕈病原微生物的分离纯化 |
| 2.2.1.2 分离菌的分子生物学鉴定 |
| 2.2.1.3 分离菌的菌落形态观察与染色鉴定 |
| 2.2.1.4 分离细菌的系统发育树构建 |
| 2.2.1.5 分离菌对斑玉蕈菌丝生长抑制作用的测定 |
| 2.2.2 香菇含硫化合物生物合成途径中C-S lyase的功能研究 |
| 2.2.2.1 香菇样品的采集与处理 |
| 2.2.2.2 香菇甲醛提取方法摸索及甲醛含量测定 |
| 2.2.2.3 香菇总RNA提取及反转录 |
| 2.2.2.4 香菇Csl基因的RT-qPCR检测 |
| 2.2.2.5 C-S lyase在大肠杆菌中的异源表达 |
| 2.2.2.6 C-S lyase体外催化反应底物和产物的HPLC检测 |
| 第3章 结果与分析 |
| 3.1 斑玉蕈工厂化栽培中致病污染菌的分离鉴定 |
| 3.1.1 斑玉蕈中病原微生物的分离纯化 |
| 3.1.2 分离菌的分子生物学鉴定 |
| 3.1.3 分离菌的染色鉴定和显微观察 |
| 3.1.4 枯草芽胞杆菌的系统发育分析 |
| 3.1.5 分离菌对斑玉蕈菌丝生长的影响 |
| 3.2 香菇含硫化合物生物合成途径中L-半胱氨酸亚砜裂解酶的功能研究 |
| 3.2.1 甲醛含量检测方法的建立 |
| 3.2.2 不同生长时期香菇菌盖及菌柄中甲醛含量变化 |
| 3.2.3 不同生长时期香菇菌盖及菌柄中Csl基因表达量的变化 |
| 3.2.3.1 不同生长时期香菇菌盖及菌柄总RNA提取 |
| 3.2.3.2 香菇RT-qPCR内参基因及引物筛选 |
| 3.2.3.3 香菇菌盖、菌柄中Csl基因的RT-qPCR检测 |
| 3.2.4 C-S lyase蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 |
| 3.2.5 C-S lyase体外催化反应底物、辅因子和产物的检测条件建立 |
| 3.2.6 C-S lyase的体外催化活性分析 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 斑玉蕈工厂化栽培过程中病原微生物污染溯源及防控措施的探讨 |
| 4.2 不同生长时期香菇内源性甲醛含量与C-S lyase催化功能的探究 |
| 4.3 食用菌产业链上下游关键因素研究对食用菌产业发展的重要意义 |
| 第5章 总结与展望 |
| 5.1 本研究工作总结 |
| 5.2 本研究的进一步工作展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 |
| 附表 |
（8）云南省细菌性食源性疾病现状分析及防控对策研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究目的与意义 |
| 1.3 国外细菌性食源性疾病现状 |
| 1.3.1 国外细菌性食源性疾病的发生情况 |
| 1.3.2 国外细菌性食源性疾病的防控体系 |
| 1.4 国内细菌性食源性疾病现状 |
| 1.4.1 国内细菌性食源性疾病的发生情况 |
| 1.4.2 我国细菌性食源性疾病的防控情况 |
| 1.5 云南省细菌性食源性疾病防控现状 |
| 1.6 选题研究方法 |
| 1.6.1 研究思路与研究路线 |
| 1.6.2 研究内容 |
| 1.6.3 研究方法 |
| 1.6.4 数据收集方法 |
| 1.6.5 数据整理及数据分析方法 |
| 第二章 相关理论和概念 |
| 2.1 食源性疾病 |
| 2.2 细菌性食源性疾病 |
| 2.3 食源性疾病暴发事件的定义 |
| 2.4 项目管理的概念 |
| 2.5 项目过程管理 |
| 2.6 云南省细菌性食源性疾病防控的项目过程管理 |
| 第三章 云南省细菌性食源性疾病流行病学特征分析 |
| 3.1 爆发情况 |
| 3.2 时间分布 |
| 3.3 场所分布 |
| 3.4 病因分析 |
| 3.5 地区分布情况 |
| 3.6 可疑暴露食品 |
| 第四章 云南省细菌性食源性疾病防控对策分析 |
| 4.1 预防方面 |
| 4.1.1 食源性疾病暴发监测与控制的法律准备 |
| 4.1.2 加大食品安全健康教育知识宣传力度 |
| 4.1.3 增加资金投入,加强食源性疾病的科学研究和人才队伍建设 |
| 4.2 监测调查方面 |
| 4.2.1 完善食源性疾病监测体系 |
| 4.2.2 加强食品安全监测体系建设 |
| 4.2.3 提高食源性疾病暴发事件的现场流行病学调查处置能力 |
| 4.3 治疗方面 |
| 4.4 控制方面 |
| 4.4.1 食源性疾病暴发当前的控制措施 |
| 4.4.2 预防食源性疾病发生的制度控制 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（9）健康中国战略下丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景、目的和意义 |
| 1.1.1 研究背景 |
| 1.1.2 研究目的 |
| 1.1.3 研究意义 |
| 1.2 食品安全标准和风险监测评估交流工作有关定义和作用 |
| 1.2.1 有关定义 |
| 1.2.2 作用 |
| 1.3 国内外研究综述 |
| 1.3.1 国外食品安全监测评估交流现状 |
| 1.3.2 国内研究综述 |
| 1.4 主要研究内容和方法 |
| 1.4.1 研究内容 |
| 1.4.2 研究方法 |
| 第二章 丽江市食品安全标准和风险监测评估交流工作现状与形势 |
| 2.1 丽江市食品安全现状与形势 |
| 2.1.1 丽江市食品安全现状 |
| 2.1.2 丽江市食品安全形势 |
| 2.2 丽江市食品安全标准和风险监测评估交流工作现状与形势 |
| 2.2.1 丽江市食品安全标准和风险监测评估交流工作现状 |
| 2.2.2 丽江市食品安全标准和风险监测评估交流工作形势 |
| 第三章 丽江市食品安全风险监测评估交流工作存在的问题及原因分析 |
| 3.1 职责理解不够深 |
| 3.2 人员素质不够高 |
| 3.3 经费保障不充足 |
| 3.4 检测能力不够强 |
| 第四章 丽江市食品安全标准和风险监测评估交流体系建设措施建议 |
| 4.1 完善体制机制 |
| 4.1.1 提高思想认识 |
| 4.1.2 加强组织领导 |
| 4.1.3 明确机构职责 |
| 4.2 提升业务能力 |
| 4.2.1 提升检验检测能力 |
| 4.2.2 加大监测力度 |
| 4.2.3 强化风险评估 |
| 4.2.4 加强风险交流 |
| 4.2.5 加强标准宣贯 |
| 4.2.6 加强食品营养工作 |
| 4.3 强化综合保障 |
| 4.3.1 加大经费保障 |
| 4.3.2 提升信息化支撑水平 |
| 4.3.3 改善工作条件 |
| 第五章 结论与展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
（10）云南省普洱市食源性疾病监管现状与对策的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 国内外食源性疾病的监测现状 |
| 1.2.1 国外食源性疾病监测的技术发展 |
| 1.2.2 发达国家食源性疾病监测系统网络特点 |
| 1.2.3 国内食源性疾病监管发展与现状 |
| 1.3 研究内容 |
| 1.4 研究方法 |
| 1.5 研究意义 |
| 第二章 普洱市食源性疾病发生和分布情况分析 |
| 2.1 概述 |
| 2.2 普洱市辖区内的民俗饮食习惯 |
| 2.2.1 佤族的饮食习惯 |
| 2.2.2 拉祜族的饮食习惯 |
| 2.2.3 哈尼族的饮食习惯 |
| 2.2.4 彝族的饮食习惯 |
| 2.2.5 傣族的饮食习惯 |
| 2.3 普洱市食物中毒上报的哨点医院情况 |
| 2.4 普洱市2005~2014年食源性疾病报告事件的分析 |
| 2.4.1 普洱市2005~2014年食源性疾病事件的概况 |
| 2.4.2 普洱市2005-2014年食源性暴发事件年份分析 |
| 2.4.3 普洱市2005-2014年食源性暴发事件发生的季度比例分析 |
| 2.4.4 普洱市2005-2014年食源性暴发事件暴发的起数与发生时间分析 |
| 2.4.5 普洱市2005-2014年食源性暴发事件的场所分析 |
| 2.4.6 普洱市2005-2014年食源性暴发事件的原因食品的统计分析 |
| 2.4.7 普洱市2005-2014年食源性暴发事件的致病因素统计分析 |
| 2.4.8 普洱市2005~2014年食源性疾病暴发事件的报告情况分析 |
| 第三章 普洱市食源性疾病的监管问题及原因分析 |
| 3.1 食源性疾病的特征引起的问题 |
| 3.2 食源性疾病技术和工作实际引起的问题 |
| 3.3 食源性疾病监管引起的问题 |
| 3.4 食源性疾病在农村监管问题 |
| 3.4.1 农村人口居住点分散 |
| 3.4.2 医务人员的理论知识 |
| 3.4.3 农药管理不严 |
| 3.4.4 粮食存储方式 |
| 3.4.5 就医理念不强 |
| 3.4.6 传统饮食习惯不改变 |
| 3.4.7 集中就餐场所卫生条件差,从业人员带菌作业 |
| 第四章 普洱市食源性疾病的监管的对策研究 |
| 4.1 加大食源性疾病的宣传力度 |
| 4.2 健全和完善食品安全法规、条例和标准 |
| 4.3 开展食源性疾病的专项监管工作 |
| 4.3.1 加强对食源性疾病重点人群的监管 |
| 4.3.2 加强对食品生产经营单位、集体食堂的卫生监督 |
| 4.3.3 加强对食品加工部门的食品安全体系管理 |
| 4.3.4 强化食源性疾病参与人员的业务提升 |
| 4.4 推行食源性疾病主动监测,加强哨点医院的作用 |
| 4.4.1 采取食源性疾病的主动监测 |
| 4.4.2 构建联动机制,实施好哨点监测工作 |
| 4.5 食源性疾病哨点监测点发展到乡村级卫生院 |
| 4.5.1 普洱市哨点医院的分布 |
| 4.5.2 哨点监测点发展到乡村级卫生院的分析 |
| 第五章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
四、长春地区食品污染蜡样芽胞杆菌监测报告（论文参考文献）
- [1]基于CRISPR技术的副溶血性弧菌核酸现场检测系统的研究[D]. 张梦垚. 浙江大学, 2021(01)
- [2]2019-2020年扬州市食品安全风险监测及风险因子识别[D]. 郭娟. 扬州大学, 2021(08)
- [3]2011～2019年吉林省餐饮食品中3种食源性致病菌监测分析[J]. 赵薇,杨修军,王太君,张思文,刘思洁,李可维,石奔,孙景昱,付尧,黄鑫. 食品安全质量检测学报, 2020(23)
- [4]2011—2019年吉林省食品中蜡样芽胞杆菌污染状况分析[J]. 赵薇,杨修军,张思文,王太君,刘思洁,李可维,石奔,孙景昱,付尧,黄鑫. 中国食品卫生杂志, 2020(06)
- [5]微生物菌肥对烟草品质及土壤细菌多样性影响的研究[D]. 张煜. 东北林业大学, 2020(09)
- [6]内蒙古炭疽流行规律与炭疽芽胞杆菌的基因特征研究[D]. 海岩. 内蒙古农业大学, 2020(01)
- [7]影响斑玉蕈和香菇产业链安全的关键因素的初步研究[D]. 姚威威. 长春工业大学, 2020(01)
- [8]云南省细菌性食源性疾病现状分析及防控对策研究[D]. 谷清华. 昆明理工大学, 2019(05)
- [9]健康中国战略下丽江市食品安全风险监测评估交流体系建设研究[D]. 张云波. 昆明理工大学, 2018(04)
- [10]云南省普洱市食源性疾病监管现状与对策的研究[D]. 郭莹莹. 昆明理工大学, 2018(04)