一、含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨（论文文献综述）
刘小元[1]（2021）在《3D打印马鹿角粉/SF/PVA支架的体内成骨实验研究》文中进行了进一步梳理目的:探讨骨髓间充质干细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/SF/PVA骨支架修复羊下颌骨缺损的能力及成骨效果。方法:全骨髓法培养羊BMSCs、细胞膜片技术及3D FDM技术构建BMSCs细胞膜片复合3D打印马鹿角粉/SF/PVA组织工程骨支架。选取12只新疆阿勒泰大尾羊,均分为1、2、3月末组、每组4只,于双侧下颌骨区制备20 mm×3 mm×5 mm的实验骨缺损区。每组2只羊一侧植入细胞膜片复合3D打印鹿角粉/SF/PVA支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵对照,每组另外2只羊,一侧植入细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架,另一侧植入细胞膜片复合明胶海绵对照。植入1、2、3月末处死实验动物,下颌骨取材进行大体、CBCT、HE观察及RT-PCR检测成骨相关指标。结果:（1）原代羊BMSCs,可见梭形等形态的细胞散在贴壁,第2代BMSCs表面标志物CD44表达呈阳性,第3代BMSCs成功诱导成膜并构建组织工程骨。（2）CBCT:第1、2月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA植入骨缺损区呈稀薄云雾状,支架吸收较多、细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架吸收相对较少;第3月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA有大量的新骨形成,密度接近周围骨质,但细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架骨缺损区未长满,骨密度较低。对照组3月变化均不明显。（3）HE:第3个月末,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架与其他两组相比,细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架材料吸收较多,可见骨小梁排列规则及成熟板状骨,细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架也有少量新骨形成,细胞膜片复合明胶海绵3个月末变化均不明显;（4）RT-PCR:细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架的OPN、OCN、COL-1的m RNA表达水平均高于细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架及对照组,在第3月末时成骨基因的表达量达到最高,同时,在1、2、3月末,同一时间细胞膜片复合马鹿角粉/SF/PVA支架的OPN、OCN、COL-1的m RNA水平表达量均显着高于细胞膜片复合n-HA/SF/PVA支架及对照组（P<0.05）。结论:3D打印马鹿角粉/SF/PVA骨支架能够引导颌骨极限缺损区形成新骨,可满足羊颌骨实验性骨缺损的修复重建,可能成为一种新的修复骨缺损的异种骨材料。
张潇化[2]（2020）在《煅烧牛骨表面矿化修饰及成骨能力的研究》文中研究指明全世界每年因外伤、先天性发育不良、占位性病变以及骨疾病等因素造成的骨损伤和骨畸形患者,高达几千万之多,且每年患者人数呈上升趋势。故而,急需要合理的修复方式及大量的骨修复支架材料。目前,骨修复支架材料的研究主要是以解决其支架材料的诱导活性与自体骨活性的一致性为中心,从而快速修复骨缺损位点,促进新骨的生成,且恢复正常骨组织的形态与功能。因此,在骨缺损修复过程中,修复方式和复合支架材料科学的应用极其重要。目的:探讨羟基磷灰石（HA）矿化修饰煅烧骨表面后对物理性能、骨髓间充质干细胞（BMSCs）成骨诱导能力以及体内成骨性能的影响,为骨支架材料的探索提供新的观点。方法:1、将新鲜的胎牛松质骨通过马弗炉高温处理,制出煅烧牛骨材料,即β-磷酸三钙（β-TCP）,经过模拟体液（SBF）的浸泡,获得表面沉积HA的矿化煅烧骨材料,即β-TCP/HA材料,通过能谱法（EDX）、万能力学检测仪,检测复合支架材料的孔径、孔隙率、主要组成成分、力学性能,获取复合支架材料的基本特征,为后续实验提供数据支撑;2、采用大鼠淋巴细胞分离液直接从大鼠股骨中分离BMSCs,然后,经形态学以及细胞生长趋势观察,获得高纯度的BMSCs;3、Live-Dead染色和MTT试剂盒验证材料的体外细胞毒性;4、通过计算BMSCs在骨块材料上的黏附率检验矿化煅烧骨的生物相容性;5、采取碱性磷酸酶（ALP）试剂盒与QRT-PCR检测BMSCs向成骨细胞分化的情况,揭示矿化煅烧骨复合材料诱导成骨分化的能力;6、以大鼠头骨构建骨缺损模型,植入材料,进而观察骨缺损部位的修复能力,新生骨的含量以及支架材料的生物降解率,进而探讨矿化修饰煅烧骨复合支架材料与BMSCs复合后的体内成骨效果。结果:1、煅烧骨的主要物质经检测为β-TCP,表面矿化层的主要物质为β-TCP/HA,其孔径的大小约100400μm,孔隙率分别是（71.52±0.18）%和（70.86±0.22）%,两者之间无显着性差异（P>0.05）,但是矿化煅烧骨材料力学性能比煅烧骨材料有显着的提高（P<0.05）;2、分离获取高纯的BMSCs;3、煅烧骨矿化修饰前后均有生物安全性;4、BMSCs与矿化煅烧骨材料具有良好的复合性;5、矿化煅烧骨材料与煅烧骨材料相比ALP的表达量极显着性升高（P<0.01）,且成骨Ⅰ型胶原（COLⅠ）基因mRNA的结果显着性升高（P<0.05）、骨钙素（OPN）基因mRNA的结果无显着性变化,骨桥蛋白（OCN）的结果呈显着性升高（P<0.05）;6、成功构建了大鼠颅骨缺损模型,直接观察发现,随着愈合时间的延迟,BMSCs复合矿化煅烧材料比矿化煅烧骨材料和煅烧骨材料骨缺损愈合更早更好。结论:矿化煅烧骨复合支架材料有良好理化性能,同时具有细胞相容性以及骨诱导活性,可以提高细胞的成骨能力。此外,复合BMSCs的矿化修饰煅烧骨复合支架材料植入骨缺损部位,能够快速促进新骨生成,缩短骨缺损愈合时间。
赵小琦[3]（2019）在《3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究》文中认为目的:构建一种新型支架材料（马鹿角粉/PVA支架）,通过检测其理化、生物性能、体内急性毒性实验及构建异位成骨模型,评价并探讨其作为骨组织工程支架的可行性。方法:利用3D打印技术,制备出马鹿角粉/PVA支架,进行孔隙率、孔径、吸水率、压缩力学性能、细胞毒性的检测、体内急性毒性检测及回植大鼠肾被膜后大体观察、HE染色、RT-PCR。结果:（1）孔隙率及孔径:马鹿角粉/PVA支架与纳米级羟基磷灰石/聚乙烯醇（n-HA/PVA）支架作对比,两组支架孔隙率比较无差别,马鹿角粉/PVA支架孔径大于n-HA/PVA支架（P=0.004）;（2）吸水率:在不同时间点上,n-HA/PVA支架的吸水率大于马鹿角粉/PVA支架,但马鹿角粉/PVA支架持续吸水的时间较长;（3）压缩力学性能:两组支架的抗压缩性能无差别（P=0.243）,马鹿角粉/PVA支架韧性较n-HA/PVA支架好;（4）细胞毒性检测:马鹿角粉/PVA支架细胞相容性比n-HA/PVA支架好;（5）急性全身毒性检测:材料浸提液腹腔注射后,72h观察期间内各组大鼠均存活良好,各组大鼠体质量变化无差别（P>0.05）;（6）回植后相关检测:回植动物时材料分为3组:实验组1-BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组;实验组2-单纯马鹿角粉/PVA支架组。对照组-空支架组。HE染色可见,1月末,细胞膜-支架组及单纯支架组支架周围及孔隙内充满结缔组织和血管,有较多的炎症细胞分布,两组间无明显区别,2月末两实验组炎症细胞减少,细胞膜-支架组中结缔组织周围出现淡蓝色类软骨样物质,对照组两时间段均为大量脂肪组织和少量结缔组织及血管;RT-PCR结果分析得,随着时间的延长RUNX2的表达呈上升趋势,而COL-1,IL-1,RANKL的表达则呈下降趋势,各组基因表达与对照组均存在差别（P<0.01）。结论:马鹿角粉/PVA支架具有良好的机械力学性能、细胞及体内实验均显示具有良好的生物相容性,在体内模拟环境下BMSCs细胞膜复合马鹿角粉/PVA支架组在成骨方面显示较好的优势,可作为异种骨支架材料研究的新方向。
杨川博,何惠宇,崔杰,马文渊,杨楠[4]（2013）在《骨髓基质干细胞复合煅烧骨的皮下成骨》文中研究指明背景:研究证明骨髓基质干细胞与煅烧骨支架材料结合后可形成组织工程化骨,但在动物体内的生物相容性及皮下诱导成骨的能力国内报道较少。目的:观察骨髓基质细胞复合异种煅烧骨植入BALB/c裸鼠背部皮下的成骨性能及煅烧骨材料作为组织工程骨支架材料的可行性。方法:选用经脱脂及脱蛋白处理后高温煅烧形成的骨支架材料与梯度密度离心法分离培养至第3代的羊骨髓基质干细胞构建细胞-煅烧骨复合物植入BALB/c裸鼠背部皮下,选同期对侧背部皮下植入单纯煅烧骨为对照组。结果与结论:煅烧后的松质骨块为白垩色,表面呈蜂窝状多孔结构,保留了天然松质骨的多孔状空间结构。骨小梁结构完整,孔隙相互连通。骨髓基质干细胞接种到煅烧骨后24h可见大量细胞黏附于支架上,7d后细胞分泌大量细胞外基质,细胞与基质分界不清,细胞能在材料上良好地黏附、增殖与生长,细胞活性未受到支架材料的影响。植入4周后,两组均可见煅烧骨边缘出现少量残片,细胞-煅烧骨复合物组煅烧骨孔隙周边可发现骨细胞,对照组煅烧骨表面可见纤维结缔组织包绕。植入后8周,两组均可见到煅烧骨部分降解为片状类骨质,周围有成纤维细胞包绕,排列紧密,形态多样,细胞-煅烧骨复合物组煅烧骨孔隙内可见煅烧骨表面有排列成行的成骨细胞,孔隙间有散在淋巴细胞浸润。对照组标本可见孔隙内有大量结缔组织长入,未见明显成骨迹象。结果说明,经高温煅烧后的松质骨材料,具有良好的生物相容性和生物安全性,可作为骨髓基质干细胞的良好载体,复合后植入体内能够诱导新生骨组织形成,可作为骨缺损组织工程修复的支架材料。
刘洋,姬烨,闫景龙[5]（2013）在《异种煅烧骨材料治疗骨缺损的研究进展》文中提出各种原因造成的骨缺损是临床上常见的问题,骨缺损达到一定长度后不能自然愈合,而且不能完全通过人工内固定的方法解决,这一直是骨科修复领域研究的难题。骨移植是临床治疗骨缺损的常用方法,其中自体骨移植被认为是骨移植的"金标准",并已被成功应用于临床骨缺损的治疗,但其容易受到移植物体积和合适的取骨部位及骨量的限制,而且自体骨的取用可能会造成一些严重的并发症,包括局部感染、慢性疼痛及血管神
李景峰[6]（2012）在《表面修饰煅烧骨的制备及其在体外体内的成骨实验研究》文中进行了进一步梳理第一部分表面矿化修饰煅烧骨的制备及其理化性质和生物相容性的研究目的探讨一种新的仿生骨材料表面修饰煅烧牛松质骨的制备方法,以提高煅烧牛松质骨作为组织工程骨的活性。方法将制备好的大小一致的煅烧牛松质骨随机分成两组,分别浸泡在配制好的单倍模拟体液（SBF）和1.5倍SBF中。每组材料的浸泡时间均为三个时间点分别为7d、14d、21d。浸泡结束后取出煅烧骨材料烘干,然后每组材料每个时间点取样喷金,用扫描电镜（SEM）观察材料表面形态并分析材料表面矿化成分。通过比较选出效果最理想的表面修饰煅烧牛松质骨材料,研究其孔径、孔隙率、抗压和抗折强度等理化性质,并与未经表面修饰的煅烧骨材料进行比较。初步评价其生物相容性。结果EM对两组各个时间点进行表面观察与分析显示,浸泡在1.5倍SBF里面的材料7d后表面可见有散在的类骨磷灰石,14d时表面可见类骨磷灰石层较完整、均一,21d时材料表面类骨磷灰石层凌乱并有裂纹,而浸泡在单倍SBF的煅烧骨材料在浸泡7d、14d、21d后表面形成的类骨磷灰石均较少。在1.5倍SBF中浸泡14d后的煅烧骨材料在理化性质方面与未经表面矿化的煅烧骨未见明显差别,其生物相容性能良好。结论煅烧骨材料在1.5倍模体液中浸泡14d可以获得最佳表面修饰效果,同时保留了原有煅烧骨材料的基本理化特性,具有良好的生物相容性。第二部分表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料对小鼠MC3T3-E1粘附、增殖和向成骨方向分化的研究目的构建表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料,评价表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料对小鼠MC3T3-E1细胞的粘附、增殖和诱导成骨分化的影响。方法对煅烧骨材料进行表面改性以提高煅烧骨支架材料的骨传导活性与骨诱导活性。将制备好的表面矿化修饰煅烧骨直接与本课题组自主设计并研制的BMP-2活性多肽（P24）进行复合,构建表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料。检测P24在表面矿化修饰煅烧骨支架材料中的释放情况。实验分三组：A组为表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽材料,B组为表面矿化修饰煅烧骨材料,C组为单纯的煅烧骨材料。分别将小鼠MC3T3-E1细胞种植在三种材料表面,测定细胞与材料到粘附率。四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法（MTT）和扫描电镜（SEM）检测小鼠MC3T3-E1细胞体外增殖活性,同时通过检测碱性磷酸酶（ALP）活性,ALP染色和钙结节茜素红染色了解小鼠MC3T3-E1细胞成骨分化情况。结果体外缓释试验证实P24在表面矿化修饰煅烧骨表面具有缓慢释放特性。细胞粘附率,MTT试验和SEM检测显示,小鼠MC3T3-E1细胞在表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料表面的粘附性能和增殖能力明显高于表面矿化修饰煅烧骨和单纯的煅烧骨材料,同时表面矿化修饰煅烧骨材料组高于单纯的煅烧骨材料组,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。ALP活性检测显示：P24诱导的A组ALP活性明显高于B组和C组,B组高于C组。ALP染色和钙结节茜素红染色：P24诱导的A组出现阳性表现的时间最早。结论表面矿化修饰煅烧骨能促进小鼠MC3T3-E1细胞在骨基质材料表面的粘附与增殖并能较好地保持细胞的形态。表面矿化修饰煅烧骨是活性多肽P24较理想的一种载体材料,有利于充分发挥P24的成骨活性。第三部分BMP-2活性肽/鼠尾Ⅰ型胶原复合物植入异位成骨的实验研究目的用动物实验的方法验证鼠尾工型胶原支架与自行研制合成的BMP2活性多肽复合后诱导异位成骨的能力与作用。方法自行提取鼠尾Ⅰ型胶原以及与BMP2活性多肽复合冻干后低真空模式下电镜观察胶原结构。实验分2组。对照组：单纯鼠尾Ⅰ型胶原组；实验组：BMP2活性多肽/鼠尾Ⅰ型胶原复合物组。将24只SD大鼠随机分成2组,对照组6只,实验组18只。每只大白鼠右侧大腿作2cm的切口,制备股四头肌肌袋模型,将上述材料分别植入肌袋。术后第3,6周分别作放射学检查（X-ray, CT）,第6周将所有大白鼠处死作组织学（HE和Von Kossa染色）检查。结果鼠尾Ⅰ型胶原冻干后孔径大小合适与BMP2活性多肽复合后无明显改变,是一种较理想的载体。术后第3,6周放射学检查可见实验组有明显的钙化影形成,且第6周成骨范围要明显大于第3周时所见,而对照组无成骨现象。术后第6周组织学观察可见实验组植入区有成骨细胞和大量新骨形成,而对照组仅见炎性细胞改变。结论鼠尾工型胶原是一种较好的载体支架材料,自行研制合成的BMP2活性多肽与其复合后,具有较强的异位诱导成骨能力。目的探讨表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料修复兔桡骨缺损的可行性与疗效。方法取新西兰大白兔36只,雌雄不限,随机分成三组,每组12只,建立桡骨中段10mm的临界大小骨缺损模型。A组,植入表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料；B组,植入表面矿化修饰煅烧骨材料；C组,植入单纯的煅烧骨材料。三组材料植入前分别行电镜扫描观察。术后未行固定。术后4、8、12周行X线观察与评分,12周时行三维CT观察,8、12周行HE染色与评分,12周时行Masson染色观察,比较三组材料修复骨缺损的能力。结果电镜观察显示：三组材料均保留了天然的孔隙结构,孔径大小为200μm～850μm。A组材料可见白色絮状或纤维状活性多肽紧贴在矿化修饰煅烧骨孔壁表面,B组材料煅烧骨表面可见一层较完整、均一的类骨磷灰石层形成。X线片观察显示,4周时,A组植入材料周围骨痂较丰富,与宿主骨间界限较模糊,B组植入材料周围形成骨痂较之为少,C组植入材料与断端界限清楚,未见明显骨痂形成。8周时,A组植入材料与宿主骨间界限模糊,可见大量骨痂形成,骨缺损基本消失,材料有不同程度的吸收,B组植入材料周围骨痂形成较前增多,C组植入材料与断端界限较模糊。12周时,A组植入材料与宿主骨连接自然,骨痂开始塑形,髓腔有再通现象,B组植入材料与宿主骨愈合欠自然,材料部分吸收,C组植入材料未见明显吸收,骨缺损界限不清。X线评分显示术后4、8、12周时,A组与B组和C组相比,具有有统计学意义（P<0.05）。术后12周时三维CT显示,A组骨缺损基本修复,新生骨与宿主骨未见明显界限,B组新生骨与宿主骨之间断端不清,C组骨缺损尚未完全修复。组织学观察,术后8、12周时HE染色评分示A组骨缺损修复情况要明显优于与B组和C组,组间具有显着差异性（P<0.05）。Masson染色结果示,12周时,A组可见植入材料与宿主骨交界处大量新生骨和板层骨形成,同时可见不规则骨髓腔和大量纤维组织形成,B组植入材料被增生纤维组织包裹,新生骨较A组少,C组缺损区被大量纤维组织充填,新生骨明显较少,骨髓腔封闭。结论体外构建的表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料是一种较理想的骨缺损修复支架材料,能在体内启动经典的软骨内化骨过程,促进骨缺损的修复。
崔杰[7]（2011）在《去抗原异种松质骨支架材料的制备及性能研究》文中进行了进一步梳理目的：比较不同处理方法下去抗原异种松质骨的各项理化特性,筛选出适宜的去抗原方法,为后期构建组织工程骨提供实验依据。方法：取成年绵羊新鲜椎骨松质部分,制备成特定形状的圆柱体,其长轴与所取松质骨骨小梁排列方向一致,随机分为A、B、C处理组和对照组D组,A组材料采用甲醇/氯仿（1：1）、30%过氧化氢等化学制剂序列脱脂脱细胞脱蛋白后在煅烧炉内1000℃煅烧3h,B组材料行简单处理后直接在煅烧炉内1000℃煅烧3h,C组材料仅采用A组化学制剂处理,D组仅行简单处理作为对照,通过孔隙率测定、组织学观察、X射线衍射分析、X-射线原子能谱元素分析、总氮量测定及万能力学测试仪检测,比较不同方法处理的各组样品的理化特性。结果：A、B、C、D组三组样品均不同程度皆保持原骨组织的天然网状孔隙结构,扫描电镜测量大孔孔径为50-600μm,微孔孔径为2gm左右,孔隙率55%-70%；X射线（粉末）衍射显示A、B组样品主要成分羟基磷灰石（HAP）和一定量的β-磷酸三钙（β-TCP）,C组样品主要成分羟基磷灰石（HAP）；A、B、C、D组钙磷原子数量比分别为（1.647±0.641）:1、（1.637±0.096）:1、（1.774±0.876）:1、（2.012±0.278）:1,均接近人体钙磷比,各组间差异无统计学意义（P>0.05）；总氮含量分别为0％、0％、4.43％、4.06％:力学性能A、B组高于C、D组（P<0.05）.A.B组间无统计学差异（P>0.05）。结论：经化学或物理方法处理的松质骨立体空间结构并无很大的破坏,均保留了孔径不等、交通性良好、表面开放的孔隙和高度的孔隙间连接；经过物理煅烧步骤可以较彻底的去除异种松质骨的的抗原成分但材料的力学性能有所下降,而单纯使用化学试剂浸泡则无法完全去除材料中的抗原成分但其力学性能下降不大；经过物理煅烧步骤制成的去抗原异种骨支架材料能基本符合组织工程骨支架材料的要求,但其细胞相容性和组织相容性尚需要进一步验证。
穆继宏[8]（2010）在《胶原—透明质酸钠—纤维蛋白胶复合去抗原松质骨支架的实验研究》文中研究说明关节软骨的损伤是目前临床上常见的病变,以受力最大的膝关节和髋关节为多。但是软骨的自身修复能力有限,且关节软骨的损伤往往要伴发软骨下骨的损伤。同时,骨坏死到后期多会导致关节面塌陷而破坏关节软骨,故无论长骨干骺端的病变原发于骨还是软骨,后期均会引起骨软骨的破坏及缺损。目前治疗骨软骨缺损的方法有很多,组织工程方法是研究的热点。本研究设计构建了一种新型骨软骨一体化的支架材料,并对以下内容进行探索研究。研究结果证明该支架材料能够满足细胞的黏附、生长和增殖,对兔关节骨软骨缺损具有良好的修复作用。1.胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架的制备及结构特征目的:探索胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的骨软骨一体化支架的制备方法及其结构特征。方法:酸溶法制备鼠尾胶原;氯仿甲醇脱脂,过氧化氢脱蛋白,稀盐酸部分脱钙制备去抗原牛松质骨;将胶原、透明质酸钠及纤维蛋白胶混匀,利用纤维蛋白胶的粘合性与去抗原牛松质骨复合,冻干后经碳化二亚胺交联24h,成为骨软骨一体化的支架材料。通过大体观察和扫描电镜观察了解材料的孔径和交通情况;结果:支架材料大体呈白色,骨相与软骨相分界明显,结合紧密,吸水性较好;经交联和复合的一体化骨软骨支架材料具有良好的三维多孔结构,骨相孔径约300～500μm,软骨相孔径约80～120μm,孔隙较均匀;结论:胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的一体化材料的大体形态正常,空间结构可以满足细胞黏附生长以及体内修复缺损的结构要求。2.胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架材料的生物相容性研究目的:探索胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的骨软骨一体化支架的生物相容性;方法:分离、增殖仔兔骨髓基质细胞（BMSCs）,取第3代BMSCs接种至支架材料复合培养, 1、3、5、7和10d后,行MTT检测并绘制细胞生长曲线;取第1d和7d标本,行扫描电镜观察。结果:扫描电镜观察可见1d和7d的支架材料的骨相及软骨相均有细胞黏附,复合7d的材料上黏附的细胞量明显多于复合1d,且细胞周围有基质分泌;MTT比色实验,OD值随时间增长,值10d到最大,显示细胞在支架上的生长良好,生长曲线呈对数生长趋势。结论:胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的一体化材料具有良好的生物相容性,可用于骨软骨联合缺损的组织工程支架材料的研究。3.胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架修复兔关节骨软骨缺损的研究目的:应用胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的骨软骨一体化支架修复兔关节骨软骨缺损,观察其体内的修复作用;方法:取12只新西兰兔,于后膝关节股骨髁间窝处制造约5.0mm的缺损,随机选取6只兔的右后膝旷置处理,作为对照组;其余缺损均填充胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架,作为实验组。在12周和24周后取材,大体观察和组织学染色观察缺损修复的情况。结果:大体观察12周和24周后实验组的缺损组织,可见其被支架材料填充,表面光滑,而对照组突出于关节面,结构不规则。组织学观察显示,12周的修复体边界基本与正常组织整合,材料大部分降解,软骨层有透明软骨样组织形成;24周实验组新生的软骨组织更接近于正常软骨,骨小梁结构完整,松质骨支架已基本被降解。结论:胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶多孔支架复合去抗原牛松质骨的一体化材料修复兔关节骨软骨缺损具有较好的修复效果,基本恢复关节软骨的组织结构,有望成为修复骨软骨联合缺损的组织工程支架材料。
郭朝邦,金海波,李广龙,杨筠,杜明奎,毛克亚[9]（2009）在《β-TCP/HAP多孔生物陶瓷的制备》文中研究指明以牛松质骨为原料,采用低温煅烧工艺,通过调整浸泡溶液浓度及煅烧温度等工艺参数,制备出具有良好生物活性,并保持天然骨多孔结构的β-TCP/HAP双相生物陶瓷。并采用XRD,SEM等手段对其成分、微观结构进行表征。结果表明:所制备的β-TCP/HAP多孔生物陶瓷的大孔孔径在300500μm之间,微孔孔径在15μm之间,具有良好的生物活性和生物可降解性。通过控制煅烧温度和浸泡溶液浓度,制备出含较高TCP的β-TCP/HAP多孔生物陶瓷,而煅烧温度或浸泡溶液浓度过高会导致制备的样品中TCP的含量降低,焦磷酸钙的含量增加。
李景峰,郑启新,郭晓东,卢宏伟,邹立学,莫路姣[10]（2009）在《骨形成蛋白2活性多肽/Ⅰ型胶原复合煅烧骨修复兔桡骨缺损》文中认为目的观察自行研制合成的骨形成蛋白2（BMP2）活性多肽与Ⅰ型胶原复合煅烧骨复合材料修复骨缺损的作用。方法实验分3组。A组:单纯煅烧骨组;B组:含Ⅰ型胶原的煅烧骨组;C组:BMP2活性多肽与Ⅰ型胶原复合煅烧骨组。3组材料植入前分别电镜扫描观察。取大白兔36只,随机分成3组,建立桡骨中段10 mm骨缺损模型,分别将材料植入兔桡骨缺损处,术后4、8、12周行X线评分,8、12周行组织形态学观察与评分,比较各组植入材料的成骨作用以及取材后抗折强度。结果 36只大白兔均进入结果分析,（1）复合材料电镜扫描结果:孔隙率高,复合结构紧密;（2）术后不同时间X线评分示C组与A组和B组差异有统计学意义（P<0.05）;（3）组织学观察,8周时评分为:A组4.67±0.52、B组5.33±0.52、C组6.83±0.41。12周评分为:A组评分为6.17±0.41、B组为7.33±0.52、C组为8.67±0.52;（4）各组植入材料抗折强度的测定:术后12周,C组材料抗折强度明显高于A组和B组。结论单纯煅烧骨及复合材料组均有修复骨缺损的能力,但以复合BMP2活性多肽的含Ⅰ型胶原的煅烧骨较为理想。
二、含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨（论文提纲范文）
（1）3D打印马鹿角粉/SF/PVA支架的体内成骨实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 实验仪器与材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2 实验方法及步骤 |
| 2.1 羊骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定 |
| 2.2 细胞膜片的制备 |
| 2.3 3D打印多孔性复合骨支架 |
| 2.4 构建细胞膜片复合3D打印支架组织工程骨 |
| 2.5 实验动物分组 |
| 2.6 植入体外构建的组织工程骨 |
| 2.7 植入前后主要观察及检测相关指标 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计学分析 |
| 5 技术路线 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 综述 3D 打印复合 PVA 骨组织工程支架研究现状 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（2）煅烧牛骨表面矿化修饰及成骨能力的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 表面矿化煅烧骨的制备及其表征 |
| 1.1 材料和方法 |
| 1.1.1 材料和仪器 |
| 1.1.2 实验方法 |
| 1.1.3 数据统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 矿化煅烧骨材料的肉眼直观结果 |
| 1.2.2 煅烧骨材料及HA矿化后的扫描电镜结果 |
| 1.2.3 煅烧骨材料及HA矿化后的能谱分析 |
| 1.2.4 煅烧骨材料及HA矿化的材料孔隙率 |
| 1.2.5 煅烧骨材料及HA矿化后的抗压强度 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 第二章 BMSCs分离培养及煅烧骨的细胞相容性评价 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 材料和仪器 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 统计学方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 BMSCs纯化结果 |
| 2.2.2 BMSCs的生长曲线 |
| 2.2.3 煅烧骨材料及HA矿化对BMSCs活性的影响 |
| 2.2.4 煅烧骨材料及HA矿化对体外BMSCs的毒性检测 |
| 2.2.5 BMSCs在煅烧骨HA矿化前后的粘附结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 HA矿化煅烧骨的体外成骨评价 |
| 3.1 材料和方法 |
| 3.1.1 材料和仪器 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 统计学方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 煅烧骨及矿化煅烧骨材料对ALP表达的影响 |
| 3.2.2 RNA核酸凝胶电泳结果 |
| 3.2.3 煅烧骨及矿化煅烧骨材料对成骨基因表达影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 矿化煅烧骨与BMSCs联合后的体内成骨效应 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 材料和仪器 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 术后成骨情况解剖图 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 主要结论 |
| 5.2 不足之处 |
| 5.3 展望 |
| 参考文献 |
| 在学期间的研究成果 |
| 致谢 |
| 病例报告 |
（3）3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 研究内容与方法 |
| 1 实验仪器与材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验仪器 |
| 1.3 主要实验试剂 |
| 2 实验方法及步骤 |
| 2.1 3D打印组织工程骨支架 |
| 2.2 3D打印组织工程骨性能检测 |
| 2.3 体内急性毒性检测 |
| 2.4 回植动物实验 |
| 2.5 3D打印组织工程骨回植动物的相关检测 |
| 3 质量控制 |
| 4 统计方法 |
| 5 技术路线图 |
| 结果 |
| 1 3D打印组织工程骨的成形 |
| 1.1 3D打印马鹿角粉/PVA支架及n-HA/PVA支架 |
| 1.2 3D打印组织工程骨的性能检测 |
| 2 体内急性毒性检测结果 |
| 3 回植实验动物相关检测结果 |
| 3.1 BMSCS的分离培养与形态学观察 |
| 3.2 BMSCS细胞膜的培养及细胞膜-支架复合物的构建 |
| 3.3 回植动物模型及取样后大体观察 |
| 3.4 HE染色结果 |
| 3.5 实时荧光定量PCR检测结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（4）骨髓基质干细胞复合煅烧骨的皮下成骨（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 实验动物数量分析 |
| 2.2 煅烧骨性能 |
| 2.3 培养的羊骨髓基质干细胞及细胞-支架复合物形态 |
| 2.4 苏木精-伊红染色结果 |
| 3 讨论 |
（5）异种煅烧骨材料治疗骨缺损的研究进展（论文提纲范文）
| 一、TBC的生物学特性 |
| 二、TBC复合材料 |
| (一) TBC和锌离子复合物 |
| (二) TBC和骨髓间充质干细胞 (BMSCs) 复合物 |
| (三) TBC复合生长因子 |
| 1. TBC复合BMP: |
| 2. TBC复合血管内皮生长因子 (VEGF) : |
| (四) TBC复合聚乳酸膜 (PLA) |
| (五) TBC与相关药物 |
| 1. TBC复合万古霉素: |
| 2. TBC复合甲状旁腺激素 (PTH) : |
| 3. TBC复合趋骨雌二醇: |
| 三、结语 |
（6）表面修饰煅烧骨的制备及其在体外体内的成骨实验研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词表（Abbreviations) |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 表面矿化修饰煅烧骨的制备及其理化性质和生物相容性的研究 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第二部分 表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料对小鼠MC3T3-E1粘附、增殖和向成骨方向分化的研究 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第三部分 BMP-2活性肽/鼠尾Ⅰ型胶原复合物植入异位成骨的实验研究 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 第四部分 表面矿化修饰煅烧骨/BMP-2活性多肽仿生骨材料修复兔桡骨缺损的实验研究 |
| 实验材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（7）去抗原异种松质骨支架材料的制备及性能研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 实验材料与方法 |
| 1.研究对象及目的 |
| 2.主要试剂及仪器 |
| 3.去抗原异种松质骨支架材料的制备 |
| 4.材料性能检测 |
| 4.1 孔隙率测定 |
| 4.2 超微形态结构观察 |
| 4.3 组织学观察 |
| 4.4 X线衍射分析 |
| 4.5 X-射线原子能谱元素分析 |
| 4.6 总氮含量测定 |
| 4.7 力学性能检测 |
| 5.质量控制 |
| 6.统计学分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
| 导师评阅表 |
（8）胶原—透明质酸钠—纤维蛋白胶复合去抗原松质骨支架的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 正文 |
| 实验一 胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架的制备及结构特征 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨支架材料的生物相容性研究 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 胶原-透明质酸钠-纤维蛋白胶复合去抗原牛松质骨 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）β-TCP/HAP多孔生物陶瓷的制备（论文提纲范文）
| 1 引 言 |
| 2 实 验 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 煅烧温度对TCP含量的影响 |
| 3.2 浸泡溶液浓度对TCP含量的影响 |
| 3.3 不同磷源对TCP含量的影响 |
| 3.4 微观结构表征 |
| 4 结 论 |
四、含锌煅烧牛松质骨复合骨髓基质细胞构建组织工程骨（论文参考文献）
- [1]3D打印马鹿角粉/SF/PVA支架的体内成骨实验研究[D]. 刘小元. 新疆医科大学, 2021(09)
- [2]煅烧牛骨表面矿化修饰及成骨能力的研究[D]. 张潇化. 兰州大学, 2020(01)
- [3]3D打印马鹿角粉组织工程骨支架的体外及体内实验研究[D]. 赵小琦. 新疆医科大学, 2019(01)
- [4]骨髓基质干细胞复合煅烧骨的皮下成骨[J]. 杨川博,何惠宇,崔杰,马文渊,杨楠. 中国组织工程研究, 2013(16)
- [5]异种煅烧骨材料治疗骨缺损的研究进展[J]. 刘洋,姬烨,闫景龙. 中华临床医师杂志(电子版), 2013(03)
- [6]表面修饰煅烧骨的制备及其在体外体内的成骨实验研究[D]. 李景峰. 华中科技大学, 2012(05)
- [7]去抗原异种松质骨支架材料的制备及性能研究[D]. 崔杰. 新疆医科大学, 2011(01)
- [8]胶原—透明质酸钠—纤维蛋白胶复合去抗原松质骨支架的实验研究[D]. 穆继宏. 第四军医大学, 2010(06)
- [9]β-TCP/HAP多孔生物陶瓷的制备[J]. 郭朝邦,金海波,李广龙,杨筠,杜明奎,毛克亚. 人工晶体学报, 2009(S1)
- [10]骨形成蛋白2活性多肽/Ⅰ型胶原复合煅烧骨修复兔桡骨缺损[J]. 李景峰,郑启新,郭晓东,卢宏伟,邹立学,莫路姣. 中华实验外科杂志, 2009(06)