一、干细胞:未来疾病治疗的新希望（论文文献综述）
龙彦儒[1]（2021）在《在困境中寻找希望，守住心脏“最后的战场”——访苏州大学附属第一医院心脏大血管外科主任沈振亚教授》文中进行了进一步梳理心脏如同汽车的发动机,通过舒张和收缩,为全身的血液循环提供源源不断的动力。只要生命不息,它就跳动不止。但因为各种因素的影响,这台发动机也会出现各种各样的"故障",比如冠心病、心肌炎、心脏结构异常等。心脏的"故障"有大有小,但即使是再小的"故障",也有可能限制心脏的正常跳动、扰乱心律,最终导致心力衰竭。
李胜[2]（2021）在《基于间充质干细胞外泌体探讨丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注后单核细胞浸润和血管新生的作用机制研究》文中研究说明研究背景:冠心病是冠状动脉发生粥样硬化,使血管腔狭窄或闭塞,导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病,是世界范围内死亡的主要原因且死亡率呈逐年上升趋势。近年来随着心脏外科和介入技术水平的提高,尤其是经皮冠状动脉介入治疗的普及,绝大多数冠心病患者可通过血运重建治疗来挽救濒临死亡的心肌,使得死亡率明显降低,但是经过再灌注治疗后会造成进一步的心肌细胞损伤,临床上称为心肌缺血再灌注损伤,这已经成为冠心病患者从缺血后复流获益的严重障碍。因此,如何有效减轻心脏缺血再灌注后的心肌损伤,已成为心血管领域亟待解决的重要课题。心肌缺血后受损的心肌细胞释放损伤相关分子模式,诱导血管内皮细胞、免疫细胞和成纤维细胞释放趋化因子,招募骨髓和脾脏中的单核细胞浸润至缺血心肌。在缺血后的1～3天内,促炎性的Ly6Chigh单核细胞在浸润数量上占绝对优势,缺血再灌注后过度的Ly6Chigh型单核细胞浸润阻碍心肌修复,加速心脏恶化。然而梗塞边缘区存活心肌的血管新生即通过刺激心肌缺血区小血管生长和侧支循环的形成对心肌损伤后组织修复过程至关重要。故如何在缺血再灌注后抑制单核细胞浸润以及促进血管新生受到越来越多的关注。近年来,干细胞再生医学的发展为心血管疾病的治疗带来了新的希望。越来越多的研究表明,干细胞是通过旁分泌外泌体、细胞因子等方式促进受损心肌组织修复。外泌体作为一种直径30～100 nm,稳定存在于细胞外的分泌型微囊泡,其脂质膜及外泌体内含有大量细胞特异质的miRNA。外泌体的生物学效应取决于miRNA的功能,外泌体通过传递特定miRNA,调节受体细胞功能,干预机体病生理过程。此外,当母体细胞受到环境刺激时,由于其表观遗传染色质发生重塑,其分泌的外泌体内容物（miRNA、mRNA、蛋白等）会发生变化,并影响其生物学效应。研究表明丹参酮ⅡA具有抗炎、抗氧化、舒张血管等作用,是临床用以治疗心血管疾病的常用药物,具有良好的应用基础及深入开发的前景。故本研究拟探讨丹参酮ⅡA预处理的间充质干细胞分泌外泌体能否抑制单核细胞浸润促进血管新生从而改善心肌缺血再灌注损伤,并对可能的分子机制进行初步探讨。研究方法:（1）采用超速离心法从间充质干细胞及丹参酮ⅡA预处理的间充质干细胞中分离外泌体,并利用透射电子显微镜、蛋白免疫印迹分析、纳米颗粒粒径分析对外泌体进行鉴定。（2）构建大鼠心肌缺血再灌注模型,再灌注后经心肌原位注射外泌体,利用超声心动图、免疫荧光、流式细胞术、蛋白免疫印迹等方法观察外泌体对心肌缺血再灌注后心功能、梗死面积、胶原沉积、单核细胞浸润和血管新生的影响以及丹参酮ⅡA预处理间充质干细胞分泌外泌体的作用是否更强。（3）通过对间充质干细胞及丹参酮ⅡA预处理的间充质干细胞分泌的外泌体进行miRNA测序并结合文献,筛选出差异表达的miR-223-5p,并通过对间充质干细胞中miR-223-5p进行干扰来验证miR-223-5p的功能。（4）结合生物信息学以及本实验研究结果确定外泌体miR-223-5p下游靶蛋白CCR2,并将大鼠体内CCR2过表达再构建心肌缺血再灌注模型验证丹参酮ⅡA预处理的间充质干细胞分泌的外泌体是否通过转运miR-223-5p靶向CCR2来发挥作用。研究结果:（1）利用超速离心法可成功分离出直径在30～100 nm,具有脂质双层膜结构,表达外泌体表面标记蛋白,在体外及体内被心肌细胞吸收摄取的外泌体。（2）心肌原位注射间充质干细胞外泌体(MSCexo)能够改善大鼠心肌缺血再灌注后的心功能,减小梗死面积,减少胶原沉积,抑制单核细胞浸润,促进血管新生,且丹参酮ⅡA预处理间充质干细胞外泌体(TSA-MSCexo)效果较为显着。（3）对MSCexo和TSA-MSCexo进行测序,筛选出差异表达的miR-223-5p,对MSC进行Si-miR-223-5p慢病毒的干扰,再用TSA进行干预,分离出的外泌体中miR-223-5p表达显着减少,结果显示当TSA-MSCexo中的miR-223-5p表达降低时,TSA-MSCexo改善大鼠心肌缺血再灌注后心功能,减少梗死面积,抑制单核细胞浸润以及促进血管新生的能力被削弱。（4）CCR2过表达加剧了大鼠心肌缺血再灌注后的心肌损伤,并大大削弱了TSA-MSCexo抑制单核细胞浸润和促进血管新生的作用,证实了TSA-MSCexo可能通过转运miR-223-5p抑制CCR2的活化抑制单核细胞浸润以及促进血管新生。结论:TSA-MSCexo通过转运miR-223-5p抑制CCR2活化来减少单核细胞浸润和促进血管新生从而改善大鼠心肌缺血再灌注损伤。
刘畅[3]（2021）在《趋化因子CCL1和细胞周期抑制蛋白p21在肺纤维化发生发展中的作用机制研究》文中进行了进一步梳理肺纤维化（Pulmonary fibrosis,PF）既包括特发性肺纤维化（idiopathic PF,IPF）,也是多种纤维增生性肺病的病理基础。该疾病的特征是肺泡上皮遭受持续性损伤后结构被破坏,过度增殖活化的成纤维细胞分泌过多细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）,导致肺间隔增厚,肺间质重构,患者肺功能受损,最终呼吸衰竭。复杂的发病机制与有限的治疗手段使得肺纤维化病人预后不良,诊断后生存期约为3至5年。早期的标准三联疗法（强的松,硫唑嘌呤,N-乙酰半胱氨酸）非但不能减轻纤维化样病变,甚至会增加患者的入院及死亡风险。FDA在2014年批准了两种药物,吡非尼酮（pirfenidone）和尼达尼布（nintedanib）,这两种药物和肺移植是目前临床上仅有的有效疗法。对于肺移植而言,供体有限,手术操作复杂和伴随的终生免疫抑制治疗都限制了这一疗法的应用。吡非尼酮及尼达尼布虽然能够减少IPF患者最大肺活量的下降程度,减缓疾病进程,但其是否可以延长生存期尚不可知。因此,深入探究肺纤维化的发病机制有助于我们鉴定新的药物靶点,攻克慢性肺病。纤维化作为慢性炎症疾病的终末期病理改变,与肺泡上皮的反复损伤,异常的炎症反应和胶原的过度沉积紧密相关。本文第一部分研究了趋化因子CCL1和肺纤维化效应器细胞成纤维细胞之间的关系。慢性肺损伤导致肺泡巨噬细胞和T细胞中CCL1 的表达上调,CCL1 通过结合 AMFR（autocrine motility factor receptor）受体诱导成纤维细胞活化为肌成纤维细胞。CCL1-AMFR相互作用引起AMFR磷酸化,获得E3连接酶活性,使内源性ERK抑制剂Spry1发生泛素化并移位至胞膜:在细胞膜上,Spry 1结合RasGAP后解除自身对Ras-ERK-p70S6K信号活性的抑制作用,促进促纤维化蛋白合成。在基因水平及药理水平抑制CCL1信号通路可以缓解肺纤维化的病理改变。本研究结果揭示了 CCL1-AMFR-ERK信号轴在纤维化进程中的重要作用,并指出了治疗纤维增生性肺病的潜在靶点。在肺损伤后的修复过程中,肺泡干细胞即肺泡Ⅱ型上皮细胞（alveolarepithelial type 2 cell,AT2）可自我更新或分化为肺泡Ⅰ型上皮细胞（alveolar epithelial type 1 cell,AT1）以维持呼吸稳态。除了异常的炎症环境和持续堆积的肌成纤维细胞,AT2干性受损和肺泡上皮的再生失败同样密切参与肺纤维化的进程。本文第二部分探究了细胞周期抑制子p21和肺纤维化中肺泡再生失败的关系。在多次博来霉素诱导的肺纤维化模型中,AT2的反复损伤导致其端粒缩短,并时间依赖性地上调p21的表达。p21的堆积不仅诱导AT2细胞周期阻滞,阻碍AT2的自我更新,还会打断p300和β-catenin的相互作用以抑制AT2的分化,即p21上调后老化的AT2不再具有自我更新和分化为AT1的能力。同时,老化的AT2分泌促纤维化的细胞因子以诱导肌成纤维细胞的活化。敲低p21后可以重建肺纤维化模型中由AT2主导的肺泡再生进程。本文的研究结果有助于深入理解肺损伤和肺纤维化的发病机制,也为开发抗纤维化药物提供了新的理论依据。
李芳[4]（2021）在《ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad/PLOD2信号通路修复脊髓损伤的机制研究》文中研究说明研究背景脊髓损伤（Spinal Cord Injury,SCI）是指由于外界直接或间接因素导致的中枢神经系统疾病,受累神经细胞的结构和功能受损,最终导致损伤部位以下运动功能和感觉的缺失,严重影响患者生活质量,降低患者生命预期,给家庭和社会带来沉重的负担。由于神经细胞的再生能力较低,损伤后微环境改变等不良因素,脊髓损伤治疗预后较差,使脊髓损伤的治疗成为了世界性的医学难题。传统的脊髓损伤治疗方法手术减压、药物对症治疗及术后康复治疗,不能促进神经细胞和轴突的再生,没有从根本上恢复神经功能,因此需要联用新的有效治疗方法共同作用。随着近几年分子生物学和细胞生物学研究的巨大进步,细胞移植作为脊髓损伤的一种新型治疗手段受到了广泛关注和研究,间充质干细胞（mesenchymal stromal cells,MSCs）由于其低免疫原性,体外容易培养,能分泌大量生物活性分子,成为研究的热点。体内外实验表明,脂肪来源的间充质干细胞（adipose tissue-derived stromal cells,ADSCs）移植在治疗脊髓损伤中具有良好的应用前景。在脊髓损伤动物模型中,与骨髓间充质干细胞相比,脂肪来源的间充质干细胞体内移植到脊髓损伤部位时具有更高的存活率。也有研究表明,ADSCs可以通过分泌细胞因子和生长因子,促进轴突再生,减少炎症细胞的浸润和空洞形成,从而促进脊髓损伤的恢复。尽管已有研究证明ADSCs在治疗脊髓损伤中的作用,但ADSCs促进脊髓损伤修复的具体机制尚不完全清楚。Torres-Espin等研究发现,大鼠脊髓损伤后MSCs体内移植可促进前胶原赖氨酸-2-酮戊二酸 5-双加氧酶 2（procollagen-lysine,2-oxoglutarate 5-dioxygenase 2,PLOD2）表达,PLOD2可能通过促进胶原纤维的交联和细胞外基质重塑起到组织修复的作用。越来越多的研究表明,在肿瘤的侵袭和迁移过程中,HIF-1α、TGF-β1 和 microRNA-26a/b 等分子通过 PI3K-AKT、TGF-β/Smad 信号通路,调控PLOD2的表达。但是PLOD2在治疗脊髓损伤中发挥的作用,目前还未见文献报道。ADSCs可以通过分泌多种细胞因子促进脊髓损伤的修复,TGF-β1作为ADSCs分泌的重要因子,具有抗炎、修复和神经保护功能。ADSCs能否通过分泌TGF-β1,上调PLOD2的表达,进而促进脊髓损伤的恢复,成为本研究的重点。本研究分为三个部分,第一部分:ADSCs体外共培养对损伤神经细胞的修复作用,第二部分:ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进损伤神经细胞的修复,第三部分:ADSCs通过激活神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进脊髓损伤大鼠功能恢复。第一部分ADSCs体外共培养对损伤神经细胞的修复作用研究目的1.从人脂肪组织中分离培养间充质干细胞,通过成脂成骨分化能力和细胞表面标志的表达对其进行鉴定。2.培养PC12细胞和大鼠皮质神经元原代细胞,体外建立神经细胞机械损伤模型。3.体外建立ADSCs和损伤神经细胞共培养体系,通过相关检测,明确ADSCs对损伤神经细胞的修复作用,以及PLOD2在ADSCs治疗神经损伤中的表达变化。研究方法1.ADSCs的分离培养及鉴定间充质干细胞从健康志愿者脂肪组织培养获得。P3-P5代的细胞用于后续实验。ADSCs经成脂成骨诱导分化后,Oil Red O染色,观察成脂诱导分化情况,Alizarin Red S和Von Kossa染色,观察成骨诱导分化情况。流式细胞仪检测细胞表面抗原的表达情况。2.神经细胞机械损伤模型制备（mechanical injury,MI）150ng/mLNGF诱导PC12细胞向神经细胞分化,MAP2染色鉴定。取Wistar新生鼠大脑皮质,分离培养原代神经细胞,NeuN染色鉴定。使用10ul枪尖于6孔板内“井”字划割,造成神经元机械性损伤。3.ADSCs共培养对损伤神经细胞的影响ADSCs接种Transwell上室,每孔接种3×105细胞,接种24h后与机械损伤的PC12细胞或大鼠皮质神经元共培养3天,EdU实验检测ADSCs对神经细胞的促增殖情况。微板试剂盒检测细胞培养上清中LDH表达变化,qRT-PCR和western blot检测PLOD2和神经相关分子MAP2、NSE、GAP43和GFAP的表达。研究结果1.ADSCs的分离培养及鉴定镜下观察从脂肪组织中分离出的细胞,呈典型的成纤维样梭形细胞;经成脂和成骨诱导培养基诱导分化后,Oil Red O染色成阳性,表明ADSCs具有成脂分化的能力,Alizarin Red S和Von Kossa染色成阳性,表明ADSCs具有成骨分化的能力;流式细胞仪检测其表面抗原的表达,结果显示ADSCs高表达CD13、CD44、CD73、CD90 和 CD105,低表达 HLA-DR、CD34 和 CD45。2.神经细胞的培养及鉴定PC12细胞经150ng/mL NGF诱导分化5-7天后,有神经突起长出,细胞形态类似于神经细胞,MAP2染色结果阳性。大鼠皮质神经元体外培养6-8天,细胞体较小,从胞体延伸出轴突和树突,轴突细长,NeuN染色结果阳性。3.ADSCs共培养促进损伤神经细胞的修复ADSCs与损伤神经细胞共培养三天,结果显示神经细胞伤口愈合率显着升高;EdU结果显示,ADSCs共培养能促进大鼠皮质神经元的增殖;LDH检测结果显示,ADSCs共培养可以抑制神经细胞LDH的释放;qRT-PCR和western blot结果显示,ADSCs共培养可以促进PLOD2和神经细胞相关分子MAP2、NSE和GAP43的表达,降低GFAP表达。研究结论1.我们成功地从脂肪组织中分离出间充质干细胞。2.ADSCs共培养可以提高损伤神经细胞伤口愈合率,促进大鼠皮质神经元的增殖。ADSCs共培养可以促进损伤神经细胞神经相关分子MAP2、NSE和GAP43的表达,降低GFAP表达。提示ADSCs可能通过提高神经元的存活率,促进神经细胞生长和轴突再生,减少胶质瘢痕的形成而促进损伤神经细胞的恢复。3.神经细胞机械损伤以后,PLOD2表达降低,ADSCs共培养可以促进损伤神经细胞PLOD2的表达。第二部分ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进损伤神经细胞的修复研究目的1.通过米诺地尔抑制神经细胞PLOD2的表达,检测抑制PLOD2表达对ADSCs神经修复作用的影响。2.ELISA检测共培养体系中TGF-β1的表达情况,同时使用外源性TGF-β1作用于损伤的神经细胞,明确TGF-β1的神经修复作用。3.SB431542 抑制 TGF-β1/Smad 信号通路,LY294002 抑制 PI3K/AKT 信号通路,明确PLOD2具体的信号调控通路。研究方法1.米诺地尔抑制神经细胞PLOD2的表达,检测PLOD2下调对ADSCs神经修复作用的影响不同浓度米诺地尔（0.25mM,0.5mM,1.0mM）作用于PC12细胞,筛选米诺地尔抑制PLOD2表达的最佳作用浓度。在ADSCs与神经细胞共培养体系中加入米诺地尔,免疫细胞化学技术、EdU实验和LDH释放实验检测抑制PLOD2基因表达对ADSCs神经保护作用的影响,qRT-PCR和western blot检测PLOD2以及神经相关分子MAP2、NSE、GAP43和GFAP的表达变化。2.TGF-β1对受损神经细胞的修复作用ELISA检测损伤神经细胞及ADSCs共培养上清中TGF-β1的表达。外源性TGF-β1（浓度分别为 0.31,0.62,1.25,2.5,5.0,10,20 ng/mL）作用于划痕损伤的 PC12 细胞,qRT-PCR 和 western blot 检测 PLOD2、P-AKT、AKT、P-Smad3和Smad2/3的表达变化。3.抑制TGF-β1/Smad、PI3K/AKT信号通路,对PLOD2表达的调控ADSCs与损伤神经细胞共培养体系中加入SB431542,抑制TGF-β1/Smad信号通路。PC12细胞经NGF诱导分化后,加入LY294002抑制PI3K/AKT信号通路。ELISA检测上清中TGF-β1的表达变化,qRT-PCR和western blot检测PLOD2、TGF-β1、P-Smad3、Smad2/3、P-AKT、AKT 和神经相关分子 MAP2、NSE、GAP43、GFAP的表达变化。研究结果1.抑制PLOD2的基因表达,体外实验结果显示ADSCs的神经细胞修复作用减弱根据qRT-PCR及western blot结果,我们最终确定米诺地尔实验浓度为0.5mM。在共培养体系中,MAP2的免疫荧光染色结果显示,抑制PLOD2表达,ADSCs的神经修复作用减弱。EdU结果显示,米诺地尔可以降低ADSCs对大鼠皮质神经元增殖的刺激作用。LDH释放实验表明,米诺地尔可增加共培养体系中LDH含量。qRT-PCR和western blot实验进一步证实,米诺地尔可以抑制神经细胞PLOD2、MAP2、NSE和GAP43的表达,促进GFAP表达。2.TGF-β1在修复神经细胞损伤中的作用ELISA检测结果显示,ADSCs共培养可以提高损伤神经细胞培养上清中TGF-β1含量。qRT-PCR和western blot检测结果显示,外源性TGF-β1作用于划痕损伤的PC12细胞,低浓度TGF-β1（0.31-2.5 ng/mL）促进PLOD2的表达,当TGF-β1浓度达到5 ng/mL时这一作用减弱,当TGF-β1浓度为10和20 ng/mL时则抑制PLOD2表达。Western blot检测结果显示,低浓度TGF-β1抑制P-AKT的表达,促进P-Smad3的表达,而高浓度TGF-β1则相反。3.TGF-β1/Smad信号通路在ADSCs促进损伤神经细胞修复中的作用共培养体系中加入SB431542可以降低共培养上清中TGF-β1的含量,抑制神经细胞TGF-β1、P-Smad3和PLOD2的表达,降低神经相关分子MAP2、NSE、GAP43的表达,提高GFAP表达水平。加入LY294002抑制P-AKT表达后,PLOD2表达下降。上述结果进一步证实了 AKT信号通路可以调控PLOD2的表达,但是当低浓度TGF-β1存在时,PLOD2主要受TGF-β1/Smad信号通路调控。研究结论1.米诺地尔抑制神经细胞PLOD2基因表达后,ADSCs的神经细胞修复作用减弱,提示PLOD2在ADSCs修复神经细胞损伤中发挥重要作用。2.ADSCs共培养可以增加细胞培养上清中TGF-β1的含量,低浓度TGF-β1抑制P-AKT的表达,促进P-Smad3和PLOD2的表达,而高浓度TGF-β1则相反。3.体外实验显示SB431542抑制TGF-β1/Smad信号通路后,降低ADSCs神经修复作用及PLOD2表达。ADSCs通过分泌低剂量TGF-β1,激活Smad3信号通路促进PLOD2表达,发挥神经修复作用。第三部分ADSCs通过激活神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进脊髓损伤大鼠功能恢复研究目的1.建立脊髓损伤动物模型,体内实验验证ADSCs输注对脊髓损伤动物模型的治疗作用。2.大鼠体内输注SB431542,验证ADSCs通过激活神经细胞TGF-β1/Smad/PLOD2信号通路促进脊髓损伤功能恢复的作用。研究方法1.大鼠脊髓损伤模型制备大鼠腹腔麻醉后,以大鼠T8-T10棘突为中心取后正中切口切开,剥离并咬除棘突、椎板暴露脊髓,血管夹夹击脊髓30s,建立脊髓损伤模型。2.实验分组脊髓损伤模型制备成功3天后,大鼠分别给予PBS、ADSCs和SB431542原位注射。实验具体分为5组:假手术组,PBS对照组,ADSCs治疗组,ADSCs治疗+SB431542 组,SB431542 组。3.ADSCs输注对脊髓损伤的治疗作用在治疗后 3、7、14、21、28 天根据 BBB（Basso,Beattie,and Bresnahan）量化评分标准对所有动物运动功能进行评定。大鼠心脏取血,离心收集血清,ELISA检测血清中TGF-β1的含量。移植后3天随机取各组动物,取出脊髓组织,4%多聚甲醛固定,制作石蜡和冰冻切片,进行HE染色,尼氏染色,免疫组织化学染色检测脊髓组织中MAP2的表达。取出治疗3天后的脊髓组织,提取总RNA和总蛋白。qRT-PCR和western blot检测神经细胞相关分子（MAP2、NSE、GAP43和 GFAP）和 PLOD2、TGF-β1、P-Smad3 和 Smad2/3 的表达变化。研究结果1.ADSCs移植可以促进脊髓损伤大鼠功能恢复ADSCs移植可以促进大鼠运动功能的恢复,减少脊髓病变体积及空泡的形成,增加尼氏小体数量,促进脊髓神经细胞神经相关分子MAP2、NSE和GAP43表达,抑制GFAP表达。2.ADSCs通过激活神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进脊髓损伤大鼠功能恢复ADSCs移植可以显着提高大鼠血清中TGF-β1的含量,促进脊髓神经细胞PLOD2、TGF-β1、P-Smad3的基因和蛋白表达。抑制剂SB431542输注明显抑制ADSCs对大鼠运动功能的恢复作用,脊髓组织结构损伤加重,神经细胞PLOD2、TGF-β1、P-Smad3 和神经相关分子（MAP2、NSE、GAP43）表达降低,GFAP表达增加,ADSCs的神经修复作用减弱。研究结论1.脊髓损伤动物实验研究结果显示,ADSCs移植可以促进脊髓损伤大鼠运动功能的恢复,同时也能促进神经元的存活,促进损伤结构的恢复。2.体内实验表明,ADSCs的治疗作用会被SB431542抑制。体内实验进一步证实ADSCs通过激活TGF-β1/Smad3信号通路促进神经细胞PLOD2表达,从而促进脊髓损伤的修复。
高逸君[5]（2021）在《华夏（中国）公司发展战略研究》文中进行了进一步梳理随着近几年我国经济发展飞快、老龄化愈发严重以及医疗水平的高标准发展,干细胞产品逐渐进入普通人民生活中,目前许多国家都已经把干细胞研究及应用列入了国家重点发展项目,我国也不例外,干细胞行业的发展潜力巨大。华夏（中国）公司作为一名干细胞行业的新兵,在新药研发方面具备一定优势,但由于起步较晚,暂时与一些已经在国内发展多年的企业相比综合竞争力还有所不足。但随着这几年国家政策开放,干细胞行业的发展迎来了极大的机遇,尤其干细胞临床医疗市场开放后,出现了空白市场。在这样的背景下,如何让华夏（中国）公司抓住机遇发展壮大,成为了华夏（中国）公司不得不认真思考的一个问题。本文运用PEST分析法、CPM矩阵、波特五力模型等工具对华夏（中国）公司所处的外部环境进行分析;通过对公司企业资源、企业能力、企业经营现状等进行分析确认公司目前的内部环境;最终在上面分析的基础上,确认了华夏（中国）公司在发展中将要面临的机会、威胁、优势与劣势。本文运用EFE矩阵对华夏（中国）公司的外部关键因素进行分析,将公司所面临的的外部机会与威胁进行量化处理;运用IFE矩阵对华夏（中国）公司的内部关键因素进行分析,将公司现存内部优势与劣势进行量化处理;运用SWOT对华夏（中国）公司在发展中所面临的机会与威胁、优势与劣势进行分析,从而为华夏（中国）公司制定出备选战略;最后运用QSPM矩阵对SWOT分析所得出的备选战略进行分析与选择,确定了华夏（中国）公司想要抓住机遇发展壮大可以采用“多元化增长战略”。为确保公司战略的顺利落地,本文提出了产品种类多元化方案、技术开发多元化方案、市场营销多元化方案、融资多元化方案、寻求合作联盟方案等5个实施方案;提出了动态风险控制措施、平衡积分卡等2个战略实施控制办法;提出了品牌文化保障、人力资源保障、组织制度保障、财务资金保障等4个战略实施保障措施。通过以上措施的落地,将有助于华夏（中国）公司抓住发展的机遇。
杨鑫宇,王大勇,高旭[6]（2020）在《基因编辑技术和细胞疗法在体外基因治疗中的应用》文中指出基因治疗作为一种新的疾病治疗手段,为传统医药无法治愈的疾病的治疗带来了新的希望。它主要通过使用载体等其他递送系统将外源基因导入体细胞内,或使用基因编辑技术直接实现基因的碱基替换、敲入或敲除,或将某一组织器官的细胞在体外经基因编辑技术修饰或改造后重新回输至体内,以修复受损基因,纠正基因功能,最终达到治疗疾病的目的。目前,基因编辑技术与细胞治疗相结合的基因治疗方法已在多种疾病中实现了临床实验,例如血友病、镰刀细胞贫血、免疫系统缺陷疾病等,且随着基因编辑技术以及干细胞技术的出现,基因治疗有了新的革新和突破,但两者相结合潜在的弊端也同样制约着基因治疗的发展,比如脱靶效率、载体的导入效率、PAM（protospacer adjacent motif）序列的制约和对P53基因的影响等。随着技术的进一步革新和发展,基因治疗的方法、技术以及理论逐渐完善,未来基因治疗将有可能为更多遗传性疾病甚至复杂性疾病的治疗提供新思路。本文就基因治疗的方法和发展前景进行了概述,以期为基因治疗未来研究工作的开展提供参考。
冯世庆[7]（2020）在《脊柱脊髓疾病的基础研究现状和展望》文中提出脊柱脊髓疾病包括创伤性疾病、退变性疾病、代谢性疾病、结核与肿瘤等,严重危害患者生命健康,为患者及社会带来沉重的负担。随着现代分子生物技术、生物信息学及基因编辑技术的发展,脊柱脊髓疾病的基础研究取得突破性成果。脊柱脊髓损伤微环境失衡理论为细胞移植、组织工程、外泌体及神经调控等修复策略提供了理论依据。在传统延缓退变及替代治疗的基础上,基因修饰技术为逆转椎间盘退变带来了希望。多种病理因素的发现完善了脊柱侧凸的病理机制。骨重塑生化标志物及免疫调控的研究为脊柱骨质疏松的诊断及治疗提供了新靶点;多组学和遗传学的应用深入揭示了脊柱结核的病理机制。脊柱肿瘤微环境的研究为调控破骨过程及炎性小体治疗骨肿瘤奠定了基础。
朱迪[8]（2020）在《FPR1基因表达与富勒烯衍生物对脂肪干细胞与骨髓巨噬细胞分化的影响》文中进行了进一步梳理目的探讨formyl peptide receptor 1（FPR1）基因表达及富勒烯衍生物富勒烯聚乙氧基乙醇（F2）对小鼠和人类脂肪干细胞（adipose derived stem cells,ADSCs）和小鼠骨髓巨噬细胞（bone marrow macrophages,BMMs）分化的影响。方法1.提取C57BL/6野生基因型及FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞、骨髓巨噬细胞以及培养传代人脂肪干细胞。2.细胞处理:第一部分:FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对ADSCs成脂及成骨分化的影响以细胞培养基（DMEM）+10%胎牛血清（FBS）+100μg/ml混合抗生素（青霉素/链霉素,P/S）作为空白对照组,成脂分化诱导液（AM）或成骨分化诱导液（OM）作为阳性对照组,在阳性对照组基础上添加0.2μg/mL富勒烯衍生物F2作为处理组。第二部分:FPR1基因表达及富勒烯衍生物F2对BMMs分化的影响以RPMI 1640细胞培养基+10%胎牛血清（FBS）+100μg/ml混合抗生素（青霉素/链霉素,P/S）+20ng/ml MCSF作为空白对照组,在空白对照组基础上添加100ng/ml LPS或150ng/ml Rankl作为阳性对照组,在阳性对照组基础上添加0.2 μg/ml F2作为处理组,其中在加入LPS或Rankl前0.5小时加入F2。3.检测评估:第一部分:在细胞培养的不同时期,运用茜素红染色或油红O染色评估细胞矿化或脂滴形成情况,应用RT-PCR测定相应成骨或成脂基因的表达水平,使用WST-1试剂盒及结晶紫染色评估细胞数从而评估富勒烯衍生物F2的细胞毒性。第二部分:细胞接受刺激后,使用WST-1试剂盒评估细胞数从而评估富勒烯衍生物F2的细胞毒性,应用RT-PCR测定相关炎症基因或破骨基因的表达水平,应用亚硝酸盐试剂盒评估细胞产生的亚硝酸盐的量。结果1.FPR1基因敲除小鼠脂肪干细胞成脂分化能力高于C57BL/6野生基因型小鼠,成骨分化能力弱于C57BL/6野生基因型小鼠。2.与C57BL/6野生基因型小鼠相比,FPR1基因敲除小鼠骨髓原代巨噬细胞在LPS诱导后炎性表型增加,在破骨诱导后破骨基因表达也增加。3.富勒烯衍生物F2可以抑制脂肪干细胞的成脂过程中脂滴形成及成骨分化过程中细胞矿化。4.C57BL/6野生基因型小鼠骨髓原代巨噬细胞中富勒烯衍生物F2可以显着降低LPS诱导的促炎因子表达及NO产生,可以促进Rankl和MCSF诱导的破骨分化。结论1.FPR1基因表达可以促进小鼠脂肪干细胞成骨分化,抑制成脂分化,具体表现为抑制脂滴形成、促进矿化,成骨诱导后FPR1基因表达增加。2.富勒烯衍生物F2可以抑制脂肪干细胞成脂及成骨分化,具体表现为抑制脂滴形成及矿化。3.富勒烯衍生物F2可以抑制炎症反应,具体表现为减少ROS的产生及下调炎症因子的表达。还可以促进骨髓原代巨噬细胞的破骨分化,表现为破骨基因表达增加。4.FPR1基因表达可以抑制炎症发生并抑制骨髓巨噬细胞破骨分化,具体表现为FPR1基因缺失细胞在促炎诱导后炎性表型表达增加,在破骨诱导后破骨基因表达增加。
邢彦彦[9]（2020）在《猪膀胱脱细胞基质膜在大鼠卵巢自体移植中的应用与研究》文中研究指明由于恶性肿瘤发病率逐年增加,发病年龄逐渐降低以及推迟生育年龄等原因,对生育力保存的需求急剧增加。相较于卵子和胚胎冻存,卵巢组织冻存后移植能够恢复卵巢内分泌功能和生育能力,并允许多个周期受孕,是目前最有希望的女性生育力保存方法,卵巢组织冷冻保存和移植获得的婴儿诞生,是人类生殖医学的里程碑,之后,各地相继有卵巢组织移植后婴儿出生的报道,并在近两年呈指数增加,迄今为止,全世界共有约130余例婴儿由卵巢组织冷冻移植后诞生。许多学者认为卵巢组织移植可作为一种行之有效的技术应用。卵巢组织冷冻有程序化冷冻和玻璃化冷冻两种方法。程序化冷冻已在临床上用于卵子和胚胎冷冻30余年。玻璃化冷冻在卵巢组织冷冻中是否优于程序化冷冻目前尚无定论,然而其用于卵子和胚胎冷冻的优越性已经被证明。由于玻璃化冷冻具有不需要昂贵仪器、冷冻过程中无冰晶形成等优点,有光明的应用前景。在过去的十年中,许多实验研究了不同的动物模型如狗、山羊、大鼠、小鼠等卵巢组织冷冻移植情况,然而,研究结果具有较大差异,基于这些实验结果,很难估计玻璃化冷冻过程造成的卵巢组织损伤程度。除物种差异外,移植物的大小、冷冻保护剂的选择等均会对移植效果产生影响。现有的关于冷冻及移植过程中卵泡丢失率的报道结果相差悬殊,缺乏详细分析。文献报道,相较于卵巢组织冷冻复苏,卵巢组织移植过程中可能丢失的卵泡更多,其原因主要为移植物在血供重新建立前缺血缺氧,然而在卵巢移植过程中卵泡丢失的具体程度仍缺乏详尽分析。卵巢组织移植较其他生育力保存方法有不可替代的优越性,因此,有良好的临床应用前景。然而,卵巢移植过程中的大量卵泡丢失,严重制约卵巢移植技术的发展。因此,如何促进新生血管形成,及早恢复移植物血供,是移植成功的关键。猪膀胱脱细胞基质膜（Urinary Bladder Matrix,UBM）是细胞外基质膜（Extracelluar Matrix,ECM）的一种,具有完整的活体组织细胞外基质的三维超微结构,以及生长因子、糖胺聚糖、粘连蛋白等生物活性成分,其中确认与组织粘附、促结合、抗凋亡、促增殖的成分有42种,目前已在临床上用于皮肤、脂肪、肌肉等组织的修复。干细胞在缺血及损伤性疾病的治疗中应用广泛。研究表明,干细胞能够促进血管形成和组织修复。脂肪间充质干细胞来源方便、增殖力强,不具有成瘤性,使用安全。近年来,有数篇关于干细胞用于卵巢移植的研究。这些研究证实,脂肪间充质干细胞在改善卵巢移植效果方面有良好的应用前景。然而,移植后的干细胞存活率较低,这阻碍了干细胞治疗技术的推广和应用。有文献研究表明,应用合适的生物支架可以提高干细胞存活率。而UBM能促进干细胞增殖和分化,我们尝试将干细胞接种在UBM上后用于大鼠卵巢自体移植,验证应用UBM是否会增加脂肪间充质干细胞的作用,进一步改善卵巢移植效果。第一部分大鼠卵巢玻璃化冷冻及自体移植对卵巢组织的影响目的:观察大鼠卵巢玻璃化冷冻复苏及自体移植过程对卵巢组织的影响,探讨冷冻和移植操作对卵巢产生影响的作用机制。方法:SD雌性大鼠随机分为正常对照组、冷冻组、移植组,移植组大鼠将两侧卵巢组织取出,一分为二分别移植于同侧肾背膜下,冷冻组将大鼠卵巢组织玻璃化冷冻复苏,将各组卵巢组织石蜡切片并HE染色,观察卵泡形态并卵泡计数;采用Tunel荧光染色技术,观察细胞凋亡情况;免疫组化方法观察各组VEGF阳性面积比。结果:正常对照组、冷冻组及移植组分别计数卵泡1231、1077、575个,移植组减少明显,移植组形态异常卵泡数较正常对照组增加明显（P<0.05）。凋亡检测中,冷冻组和移植组凋亡率较正常对照组显着增加（P<0.05）。VEGF在3组卵巢组织中均有表达,但冷冻组及移植组表达较正常对照组减少,差异有统计学意义。结论:卵巢组织冷冻或自体移植过程中均伴有卵泡丢失、VEGF表达下降。提高移植卵巢组织的VEGF表达,可能对促进移植物血管形成、提高卵巢移植效率有积极作用。第二部分UBM在大鼠卵巢自体移植中的作用目的:验证UBM能促进移植卵巢新生血管形成,减少移植组织卵泡数量的丢失,改善移植效果,探讨其促进血管生成的作用机制。方法:1.8周龄SD大鼠行卵巢自体移植,根据术中处理方法不同分为5组:正常对照组、自体移植组、自体移植+UBM（UBM组）、自体移植+VEGF组（VEGF组）、去势组,其中,正常对照组用于卵泡计数比较,去势组仅用于血清激素水平比较。在自体移植后28天,行卵巢组织HE染色,观察细胞形态、卵泡计数;术后28天,ELISA测定血清FSH、AMH水平;分别于移植后7天和28天CD31染色,观察血管生成情况;自体移植后7天,Tunel及Masson染色观察凋亡和纤维化情况。2.将第3代人脐静脉内皮细胞分为对照组和UBM组,分别接种在六孔板上,UBM组预先将UBM铺在六孔板底,观察细胞增殖情况,并于接种后第1、3、5天行CCK8实验,检测细胞增殖情况;同时进行Western-blot和RT-PCR检测,探讨UBM体外促进血管生成的作用机制。3.8周龄SD大鼠行卵巢自体移植术,依据术中处理方法不同分为自体移植组和自体移植+UBM组（UBM组）,卵巢自体移植后7天,微血管CT成像比较两组移植卵巢血管生成情况,取出卵巢组织,行Western-blot和RT-PCR检测,探讨UBM在体内促进血管生成的作用机制。结果:1.自体移植组、UBM组、VEGF组卵泡均较正常对照组减少,（P<0.05）;UBM组原始卵泡及生长卵泡数量较单纯移植组均增加;UBM组FSH显着低于自体移植组及VEGF组（P<0.05）,AMH激素水平测定结果同FSH基本一致;同单纯移植组及VEGF组相比,UBM组CD31阳性表达率显着增加（P<0.05）;Tunel染色显示,与单纯移植组相比,UBM组、VEGF组凋亡细胞均减少（P<0.05）,且UBM组凋亡率最低,差异有统计学意义（P<0.05）;Masson染色结果:与单纯移植组相比,UBM组、VEGF组相对纤维化明显减少,且UBM组纤维化面积最小,差异有统计学意义（P<0.05）。2.CCK8实验:人脐静脉内皮细胞在UBM上增殖与对照组相比无统计学差异（P>0.05）;Western-blot和RT-PCR结果提示,UBM组人脐静脉内皮细胞KDR、Notch1、Ang2表达增加;术后7天,Western-blot和RT-PCR结果提示,UBM组KDR、Notch1、Ang2表达增加。体内和体外实验均表明,UBM上调KDR、Notch1、Ang2表达,促进血管形成。结论:UBM通过上调KDR、Notch1、Ang2表达,激活血管生成信号通路,通过促进血管形成改善卵巢移植效果,值得进一步研究和推广。第三部分脂肪间充质干细胞联合UBM在大鼠卵巢自体移植中的作用目的:验证脂肪间充质干细胞能促进移植卵巢新生血管形成,改善移植效果;证明应用脂肪间充质干细胞联合UBM能进一步改善卵巢移植效果。方法:1.分离并制备大鼠脂肪间充质干细胞,经成脂、成骨实验鉴定其有多向分化的能力,通过流式细胞技术对其表面抗原进行测定。2.SD大鼠行卵巢自体移植,根据术中处理方法不同分为5组:正常对照组、自体移植组、自体移植+ADMSCs组（ADMSCs组）、自体移植+ADMSCs组+UBM组（联合组）、去势组,其中,正常对照组用于卵泡计数比较,去势组仅用于血清激素水平比较。在自体移植后28天,行卵巢组织HE染色,观察细胞形态、卵泡计数;术后28天,ELISA测定血清FSH、AMH水平;分别于移植后7天和28天CD31染色,观察血管生成情况;自体移植后7天,Masson染色观察纤维化情况。结果:1.成功制备大鼠脂肪间充质干细胞。2.同单纯移植组相比,ADMSCs组原始卵泡及生长卵泡数量均增加显着（P<0.05）,联合组原始卵泡数及生长卵泡个数较ADMSCs组均增加,差异有统计学意义（P<0.05）;同自体移植组相比,ADMSCs组及联合组FSH水平显着均降低（P<0.05）,AMH激素水平测定结果同FSH基本一致;CD31结果提示:ADMSCs组、联合组新生血管数量均较单纯移植组增加;Masson染色结果:联合组纤维化面积较单纯移植组减少明显,差异有统计学意义。结论:应用脂肪间充质干细胞可改善卵巢移植效果,UBM可促进脂肪间充质干细胞在移植部位的附着、定植,ADMSCs联合UBM可显着增加移植卵巢组织血供。
吴林[10]（2020）在《冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗中重度宫腔粘连的研究》文中指出目的:宫腔粘连（Intrauterine adshesions,IUA）是指各种原因引起的子宫内膜基底层损伤,导致宫腔部分或者全部粘连的一种妇科疾病。目前以宫腔镜下粘连分解术（Transcervical resection of adhesion,TCRA）为主要治疗方式,术后辅以雌激素、宫内节育器治疗为主要手段。但中重度宫腔粘连患者术后复发率高,生育功能经常规方法治疗后难以恢复。故提出将冻干羊膜（Frozen amniotic membrane,FZAM）联合干细胞移植这一新兴方法治疗中重度宫腔粘连,旨在为传统方法治疗无效的患者提供新的希望。方法:第一部分,人脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）、冻干羊膜的制备以及羊膜负载人脐带间充质干细胞的制备;第二部分,冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗宫腔粘连的临床观察,纳入中、重度宫腔粘连30例,随机分为实验组1（7例）、实验组2（13例）和对照组（10例）;所有患者均于月经干净第3-7天在我院行TCRA,实验组1使用冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞与透明质酸钠凝胶治疗,实验组2使用冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗,对照组仅予透明质酸钠凝胶治疗;所有患者均于术后第一次月经干净3-7天至门诊复查妇科彩超及宫腔镜检查,记录患者术后子宫内膜厚度、美国生育协会（AFS）评分及妊娠情况。结果:（1）hUC-MSCs在冻干羊膜上能够正常生长、增殖。（2）冻干羊膜联合hUC-MSCs与冻干羊膜联合hUC-MSCs、HA宫腔内移植均能降低TCRA术后AFS评分、促进子宫内膜增长。结论:本实验结果表明冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞能够有效治疗宫腔粘连,促进内膜的再生修复,说明冻干羊膜联合hUC-MSCs治疗IUA是可行的。且通过两种治疗方法的比较证明羊膜+hUC-MSCs这种方法更好。
二、干细胞:未来疾病治疗的新希望（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、干细胞:未来疾病治疗的新希望（论文提纲范文）
（1）在困境中寻找希望，守住心脏“最后的战场”——访苏州大学附属第一医院心脏大血管外科主任沈振亚教授（论文提纲范文）
| ●“换心”真的是“最后的希望”吗 |
| ●干细胞：“绝处逢生”的新希望 |
| ●在曲折中前进 |
| ●摆脱医疗，打破局限多学科诊疗模式应是必然趋势 |
（2）基于间充质干细胞外泌体探讨丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注后单核细胞浸润和血管新生的作用机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 研究内容一 丹参酮ⅡA介导间充质干细胞外泌体改善大鼠心肌缺血再灌注损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 外泌体的鉴定与摄取 |
| 2.2 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后心功能的影响 |
| 2.3 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后梗死面积的影响 |
| 2.4 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后炎症细胞浸润,细胞凋亡及胶原沉积的影响 |
| 2.5 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后CCR2的影响 |
| 2.6 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后的单核细胞浸润的影响 |
| 2.7 TSA-MSC_(exo)对大鼠心肌缺血再灌注后血管新生的影响 |
| 3 小结 |
| 研究内容二 TSA-MSC_(exo)通过miR-223-5p改善大鼠心肌缺血再灌注损伤 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 TSA-MSC_(exo)通过miR-223-5p改善大鼠心肌缺血再灌注损伤 |
| 2.2 TSA-MSC_(exo)通过miR-223-5p抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤后的单核浸润 |
| 2.3 TSA-MSC_(exo)通过miR-223-5p促进大鼠心肌缺血再灌注损伤后的血管新生 |
| 3 小结 |
| 研究内容三 TSA-MSC_(exo)通过miR-223-5p靶向CCR2抑制单核细胞浸润并促进血管新生 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 1.4 实验方法 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 miR-223-5p抑制大鼠心肌缺血再灌注后的CCR2活化 |
| 2.2 CCR2过表达对TSA-MSC_(exo)改善心肌缺血再灌注后心功能的影响 |
| 2.3 CCR2过表达对TSA-MSC_(exo)减少心肌缺血再灌注后炎症细胞浸润和胶原沉积的影响 |
| 2.4 CCR2过表达对TSA-MSC_(exo)抑制单核细胞浸润和促进血管新生的影响 |
| 3 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 外泌体改善心肌缺血再灌注损伤的机制 |
| 1 心肌缺血再灌注损伤机制 |
| 2 外泌体的功能 |
| 2.1 抗氧化应激 |
| 2.2 抗心肌细胞凋亡 |
| 2.3 抑制炎症反应 |
| 2.4 促血管新生 |
| 2.5 修复心肌损伤 |
| 3 临床研究 |
| 4 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）趋化因子CCL1和细胞周期抑制蛋白p21在肺纤维化发生发展中的作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 综述一 CC家族趋化因子在特发性肺纤维化疾病中的作用及研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 肺再生参与肺纤维化发生发展的机制 |
| 参考文献 |
| 第一章 CCL1-AMFR相互作用通过活化成纤维细胞促进肺纤维化发病 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 结果 |
| 第一部分 趋化因子CCL1促进肺纤维化发生发展 |
| 1.CCL1在肺纤维化病理状态下表达上调 |
| 2.CCL1促进肺纤维化进展 |
| 3.CCL1主要由肺泡巨噬细胞分泌 |
| 第二部分 CCL1募集和活化成纤维细胞 |
| 4.CCL1主要结合成纤维细胞 |
| 5.CCL1促进成纤维细胞迁移与活化 |
| 第三部分 CCL1-CCR8募集成纤维细胞 |
| 6.成纤维细胞表达CCR8受体 |
| 7.CCL1-CCR8相互作用募集成纤维细胞 |
| 8.CCL1对成纤维细胞的活化作用不依赖于CCR8 |
| 第四部分 CCL1-AMFR活化成纤维细胞 |
| 9.成纤维细胞膜上表达AMFR |
| 10.CCL1结合成纤维细胞膜上的AMFR |
| 11.CCL1-AMFR相互作用位点的确定 |
| 12.CCL1通过AMFR活化成纤维细胞 |
| 13.CCL1通过PKCα磷酸化AMFR |
| 14.PKCα介导的AMFR磷酸化参与活化成纤维细胞 |
| 第五部分 CCL1激活ERK-p70S6K通路以促进促纤维化蛋白合成 |
| 15.CCL1不改变促纤维化基因的RNA水平 |
| 16.CCL1通过激活ERK通路活化成纤维细胞 |
| 17.CCL1通过ERK-p70S6K通路活化成纤维细胞 |
| 第六部分 CCL1-AMFR解除Spry1对ERK通路的抑制作用 |
| 18.CCL1-AMFR通过Spry1激活ERK通路 |
| 19.CCL1-AMFR通过膜转位Spry1活化Ras-ERK级联信号 |
| 第七部分 AMFR诱导Spry1泛素化以解除其对ERK的抑制 |
| 20.CCL1激活ERK通路依赖于AMFR的E3连接酶活性 |
| 21.AMFR作为E3泛素连接酶泛素化Spry1 |
| 22.AMFR催化Spry1的K27位多聚泛素化 |
| 23.PKCα介导的磷酸化使AMFR获得E3酶活性 |
| 24.膜AMFR泛素化Spry1以活化ERK通路 |
| 第八部分 CCL1中和抗体改善肺纤维化进展 |
| 25.CCL1中和抗体抑制成纤维细胞活化 |
| 26.CCL1中和抗体改善肺纤维化进展 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 细胞周期抑制子p21通过抑制肺泡再生促进肺纤维化发生发展 |
| 前言 |
| 实验材料和方法 |
| 结果 |
| 第一部分 反复BLM损伤导致不可逆的肺纤维化病变 |
| 1.反复的BLM损伤导致不可逆的病理改变 |
| 第二部分 BLM所致的端粒缩短和ROS堆积导致AT2中p21上调 |
| 2.反复的BLM损伤诱导依赖于p21的AT2老化 |
| 3.反复的BLM损伤诱导AT2的端粒缩短 |
| 4.持续的ROS堆积诱导AT2中的p21上调 |
| 第三部分 p21堆积抑制AT2的自我更新和分化 |
| 5.mBLM损伤抑制AT2的再生 |
| 6.p21抑制AT2的自我更新 |
| 7.p21抑制AT2-AT1的分化 |
| 第四部分 p21诱导细胞周期阻滞并阻断p300-β-catenin结合抑制再生 |
| 8.p21诱导细胞周期阻滞以抑制AT2的自我更新 |
| 9.p21打断p300-β-catenin相互作用以抑制AT2-AT1分化 |
| 第五部分 敲低p21改善肺纤维化进展 |
| 10.敲低p21改善mBLM诱导的肺纤维化 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 总结 |
| 缩略词表(Abbreviation) |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad/PLOD2信号通路修复脊髓损伤的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一部分 ADSCs体外共培养对损伤神经细胞的修复作用 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第二部分 ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进损伤神经细胞的修复 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 第三部分 ADSCs通过激活神经细胞TGF-β1/Smad3/PLOD2信号通路促进脊髓损伤大鼠功能恢复 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 五、总论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 文献综述 间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 外文论文一 |
| 外文论文二 |
（5）华夏（中国）公司发展战略研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.1.1 研究背景 |
| 1.1.2 研究意义 |
| 1.2 华夏(中国)公司简介 |
| 1.3 研究工具与方法 |
| 1.3.1 研究工具 |
| 1.3.2 研究方法 |
| 1.4 研究内容与研究思路 |
| 1.4.1 研究内容 |
| 1.4.2 研究思路 |
| 1.4.3 技术路线图 |
| 第二章 相关理论概述 |
| 2.1 战略管理相关理论 |
| 2.1.1 企业战略与企业战略管理的定义 |
| 2.1.2 企业战略管理的内涵 |
| 2.1.3 企业战略管理的框架 |
| 2.2 发展战略相关理论 |
| 2.2.1 发展战略的定义 |
| 2.2.2 五力模型 |
| 2.3 干细胞行业相关理论 |
| 2.3.1 干细胞 |
| 2.3.2 干细胞应用治疗分类 |
| 2.4 相关文献综述 |
| 第三章 华夏(中国)公司外部环境分析 |
| 3.1 宏观环境分析(PEST分析) |
| 3.1.1 政治环境分析(P) |
| 3.1.2 经济环境分析(E) |
| 3.1.3 社会文化环境分析(S) |
| 3.1.4 技术环境分析(T) |
| 3.2 行业与市场环境分析 |
| 3.2.1 干细胞行业总体分析 |
| 3.2.2 干细胞行业竞争结构分析(五力分析) |
| 3.2.3 干细胞行业市场供求分析 |
| 第四章 华夏(中国)公司内部环境分析 |
| 4.1 企业资源分析 |
| 4.1.1 有形资产分析 |
| 4.1.2 无形资产分析 |
| 4.1.3 人力资源分析 |
| 4.2 企业能力分析 |
| 4.2.1 营销服务能力分析 |
| 4.2.2 研发能力分析 |
| 4.2.3 组织管理能力分析 |
| 4.2.4 核心竞争力分析 |
| 4.3 企业经营现状分析 |
| 4.3.1 财务状况分析 |
| 4.3.2 组织结构状况分析 |
| 4.3.3 经营状况分析 |
| 4.4 企业文化分析 |
| 第五章 华夏(中国)公司战略制定与选择 |
| 5.1 华夏(中国)公司战略目标体系 |
| 5.1.1 公司使命 |
| 5.1.2 公司愿景 |
| 5.1.3 公司目标 |
| 5.2 华夏(中国)公司发展战略的制定 |
| 5.2.1 外部因素评价矩阵(EFE矩阵) |
| 5.2.2 内部因素评价矩阵(IFE矩阵) |
| 5.2.3 华夏(中国)公司发展战略SWOT分析 |
| 5.3 华夏(中国)公司发展战略的决策 |
| 5.3.1 华夏(中国)公司发展战略QSPM矩阵分析 |
| 5.3.2 华夏(中国)公司的战略选择 |
| 第六章 华夏(中国)公司战略实施与控制 |
| 6.1 战略实施模式的选择 |
| 6.1.1 华夏(中国)公司战略计划 |
| 6.1.2 战略实施模式 |
| 6.2 战略实施行动方案 |
| 6.2.1 落实产品种类多元化方案 |
| 6.2.2 制定市场营销多元化方案 |
| 6.2.3 实施技术开发多元化方案 |
| 6.2.4 融资多元化方案 |
| 6.2.5 寻求合作联盟方案 |
| 6.3 战略实施控制 |
| 6.3.1 制定公司战略应变计划 |
| 6.3.2 平衡计分卡 |
| 6.4 战略实施保障 |
| 6.4.1 品牌文化保障 |
| 6.4.2 人力资源保障 |
| 6.4.3 组织制度保障 |
| 6.4.4 财务资金保障 |
| 第七章 结论与展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录A CPM矩阵专家问卷调查过程说明 |
| 附录B EFE矩阵分析过程说明 |
| 附录C IFE矩阵分析过程说明 |
| 附录D QSPM战略定量战略计划分析过程说明 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（6）基因编辑技术和细胞疗法在体外基因治疗中的应用（论文提纲范文）
| 1 基因治疗的载体 |
| 1.1 病毒载体 |
| 1.1.1 腺相关病毒载体 |
| 1.1.2 慢病毒载体 |
| 1.2 非病毒载体 |
| 1.2.1 纳米基因载体 |
| 1.2.2 脂质纳米颗粒载体 |
| 2 基因治疗的方法及进展 |
| 2.1 基因治疗 |
| 2.2 基因编辑 |
| 2.2.1 神经退行性疾病 |
| 2.2.2 HutchinsonGilford早衰综合征 |
| 2.3 细胞治疗 |
| 2.3.1 CAR-T疗法 |
| 2.3.2 干细胞疗法 |
| 2.4 基因编辑与细胞治疗相结合 |
| 2.4.1 血液系统疾病 |
| 2.4.2 遗传性视网膜病变 |
| 2.4.3 杜氏肌营养不良 |
| 2.4.4 肿瘤 |
| 2.4.5 HIV |
| 3 基因治疗的临床进展 |
| 4 基因治疗的发展与挑战 |
（8）FPR1基因表达与富勒烯衍生物对脂肪干细胞与骨髓巨噬细胞分化的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词对照 |
| 引言 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 甲酰肽受体对细胞分化的影响及在多种疾病发展中的作用 |
| 参考文献 |
| 个人简历及在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
（9）猪膀胱脱细胞基质膜在大鼠卵巢自体移植中的应用与研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 大鼠卵巢组织玻璃化冷冻及自体移植对卵巢组织的影响 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 UBM在大鼠卵巢自体移植中的作用 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 脂肪间充质干细胞联合UBM在大鼠卵巢自体移植中的作用 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、实验结果 |
| 三、讨论 |
| 四、结论 |
| 参考文献 |
| 综述 女性生育力保存研究进展 |
| 参考文献 |
| 论文发表与获奖情况 |
| 致谢 |
（10）冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗中重度宫腔粘连的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要中英文缩略词索引 |
| 实验设计流程如下 |
| 第1章 绪论 |
| 第2章 人脐带间充质干细胞及冻干羊膜的制备 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 试剂 |
| 2.1.2 器材及设备 |
| 2.2 人脐带间充质干细胞的分离、培养及冻存 |
| 2.2.1 标本来源 |
| 2.2.2 分离 |
| 2.2.3 培养 |
| 2.2.4 传代 |
| 2.2.5 冻存 |
| 2.3 冻干羊膜的制备 |
| 2.3.1 标本来源 |
| 2.3.2 冻干羊膜的制备 |
| 2.3.3 人脐带间充质干细胞在冻干去细胞羊膜上的培养 |
| 2.4 结果 |
| 2.5 讨论 |
| 2.6 小结 |
| 第3章 冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗中重度宫腔粘连的临床观察 |
| 3.1 资料与方法 |
| 3.1.1 一般资料 |
| 3.1.2 羊膜负载人脐带间充质干细胞移植前处理 |
| 3.1.3 研究分组及治疗方法 |
| 3.1.4 观察指标 |
| 3.2 统计分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 术前一般情况: |
| 3.3.2 三组患者术前术后AFS评分比较 |
| 3.3.3 三组患者手术后子宫内膜厚度增值比较 |
| 3.3.4 三组患者术前术后子宫内膜厚度比较 |
| 3.3.5 三组患者妊娠结局比较 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、干细胞:未来疾病治疗的新希望（论文参考文献）
- [1]在困境中寻找希望，守住心脏“最后的战场”——访苏州大学附属第一医院心脏大血管外科主任沈振亚教授[J]. 龙彦儒. 祝您健康, 2021(12)
- [2]基于间充质干细胞外泌体探讨丹参酮ⅡA对心肌缺血再灌注后单核细胞浸润和血管新生的作用机制研究[D]. 李胜. 天津中医药大学, 2021(01)
- [3]趋化因子CCL1和细胞周期抑制蛋白p21在肺纤维化发生发展中的作用机制研究[D]. 刘畅. 北京协和医学院, 2021(02)
- [4]ADSCs通过调控神经细胞TGF-β1/Smad/PLOD2信号通路修复脊髓损伤的机制研究[D]. 李芳. 山东大学, 2021(11)
- [5]华夏（中国）公司发展战略研究[D]. 高逸君. 兰州大学, 2021(02)
- [6]基因编辑技术和细胞疗法在体外基因治疗中的应用[J]. 杨鑫宇,王大勇,高旭. 中国生物化学与分子生物学报, 2020(11)
- [7]脊柱脊髓疾病的基础研究现状和展望[J]. 冯世庆. 中华实验外科杂志, 2020(06)
- [8]FPR1基因表达与富勒烯衍生物对脂肪干细胞与骨髓巨噬细胞分化的影响[D]. 朱迪. 郑州大学, 2020(02)
- [9]猪膀胱脱细胞基质膜在大鼠卵巢自体移植中的应用与研究[D]. 邢彦彦. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(02)
- [10]冻干羊膜联合人脐带间充质干细胞治疗中重度宫腔粘连的研究[D]. 吴林. 南华大学, 2020(01)