一、CIH病毒的免疫及解毒（论文文献综述）
徐英莉[1]（2021）在《人类冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠肺炎模型的建立及应用》文中指出近年来,新发冠状病毒性疾病的不断出现（如SARS、MERS、COVID-19等）,迫使人类寻找有效地应对策略,从多方面建立控制突发疫情的手段及方法迫在眉睫。适宜的动物模型是疫苗及药物筛选的基础,建立能在P2实验室中应用且成本较低的冠状病毒小鼠肺炎模型,对于控制疫情、药物筛选及病毒免疫学研究具有重要意义。中医药治疗疫病有几千年的实践积累,自西汉至清末,有记载的大型瘟疫超过300余次,在此过程中形成了大量经典名方以及现代中药。中医药治疗疫病的理论及相关中药的应用是我国历次应对突发疫病的重要依据及手段[1][2]。近年来,在SARS、COVID-19治疗中积累了大量有价值的临床应用数据,其经验已向世界范围内推广。因此提供适宜动物模型的现代科学数据支持,是推动中医药走向世界不可或缺的条件。本文共分为两大部分:第一部分中建立了人类冠状病毒229E（HCoV-229E）小鼠肺炎模型:首先根据体外易感性、细胞病变程度、病毒载量等条件筛选建立体外模型。继而考察不同病毒体系、小鼠品系、感染量、感染次数等不同感染条件,建立人类冠状病毒229E（HCoV-229E）体内小鼠肺炎模型。最后以连花清瘟胶囊为阳性药建立了 HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型的指标评价体系,使其达到客观化、科学化、标准化、规范化。第二部分为人类冠状病毒229E（HCoV-229E）小鼠肺炎模型的应用:在人类冠状病毒229E（HCoV-229E）小鼠肺炎模型基础上进一步应用该模型,对《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》[3]中推荐试用药物:干扰素、磷酸氯喹、金花清感颗粒、疏风解毒胶囊及相关方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2对HCoV-229E小鼠肺炎模型的治疗作用进行研究。解决国家疫情期间药物筛选的亟需,也证明了该模型的可行性、稳定性和重复性。实验目的:本实验采用人类冠状病毒229E（HCoV-229E）建立了小鼠肺炎模型,以期构建适宜病毒复制,模拟冠状病毒临床症状,且能应用于冠状病毒药物筛选的新动物模型。为紧急疫情时期应急筛选有效的药物提供可行的动物模型,也为相关冠状病毒感染基础研究及新药研发奠定基础。实验方法:1 HCoV-229E体外感染体内外模型的建立体外实验中,采用HCoV-229E病毒感染人胚肺细胞、人肺癌细胞、巨噬细胞、犬肾细胞,通过考察各个细胞对HCoV-229E的易感性、细胞病变程度、病变出现的时间、细胞上清液中病毒载量,建立体外细胞模型。HCoV-229E动物感染模型中,共筛选了 3个小鼠品系:BALB/c小鼠、BALB/c-nude小鼠及ICR小鼠。病毒滴鼻感染后,通过肺指数及肺组织病毒载量检测筛选了不同病毒体系、小鼠品系、感染量、感染次数等造模条件。2 HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型评价指标的建立体内实验中,并采用连花清瘟胶囊作为阳性药进行小鼠肺炎模型评价指标的建立。BALB/c小鼠分别于第1天、第3天用异氟烷轻度麻醉后,以100 TCID50稀释度的HCov-229E病毒液经滴鼻感染,50μL/只。第5天进行肺部CT检测、淋巴细胞分型比例检测、肺指数及抑制率计算。HE染色进行肺组织及全身主要器官的组织病理学检查及肺组织病毒载量检测,并采用ELISA法进行肺组织中炎性细胞因子含量测定。3 HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型的应用应用HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺炎模型,进行西药（磷酸氯喹、干扰素α2b）,中药复方（方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2）,上市中成药（金花清感颗粒、疏风解毒胶囊）药效学作用进行评价。造模方法同实验方法2,第5天进行淋巴细胞分型比例检测,进行肺指数及抑制率测定。采用RT-PCR进行肺组织病毒载量检测,采用ELISA法进行肺组织中炎性细胞因子含量测定。实验结果:1 HCoV-229E体外感染体内外模型的建立对HCoV-229E对MDCK、A549、MRC-5以及人类巨噬细胞4种细胞的易感性进行了评价,从病变程度、出现时间、稳定性、保存等方面最终选取了 A549细胞、MDCK细胞作为病毒增殖载体,HCoV-229E病毒对MDCK、A549的TCID50均为10-2。HCoV-229E动物感染模型中,本实验共筛选了 3个小鼠品系、2种病毒体系、2个病毒稀释度。其中采用A549培养病毒液在100 TCID50浓度经滴鼻感染1次,感染HCoV-229E 3天后,BALB/c小鼠及BALB/c-nude小鼠模型组肺指数均显着升高,肺指数均值大于0.9（P<0.01）,肺组织中病毒核酸显着增高（P<0.01）,达到模型建立标准。但感染4天后,小鼠肺指数及肺组织中病毒核酸表达明显降低,模型呈恢复趋势。在此基础上并进一步进行了感染次数考察,采用A549传代病毒液以100 TCID50稀释度,2次滴鼻感染BALB/c小鼠。第5天,模型对照组小鼠肺指数明显增高（肺指数>0.9,P<0.01）,肺组织中病毒核酸显着增高（P<0.01）,小鼠肺组织呈现弥漫性灶状肺泡坏死,并有部分肺泡支架塌陷,以上指标表明,该建模方法达到模型建立标准。2 HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型评价指标的建立采用连花清瘟胶囊作为阳性药进行小鼠肺炎模型评价指标的建立,经滴鼻感染100 TCID50 HCoV-229E病毒2次,感染后5 d,HCoV-229E模型对照组小鼠体重下降>1g,肺指数较正常对照组显着升高（P<0.1）,肺组织中HCoV-229E核酸表达较正常组显着升高（P<0.1）。模型对照组小鼠肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α蛋白表达显着增高（P<0.1）。小鼠外周血中免疫细胞CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及B细胞的百分比均明显降低（P<0.1）。模型对照组肺部CT可见纹理增粗斑点状阴影。肺组织弥漫性肺泡坏死,肺泡支架塌陷,周围肺间隔增宽。全身主要脏器均出现与临床表现较为一致的病理学改变。治疗给予连花清瘟胶囊4天后,连花清瘟胶囊在其治疗范围内,肺指数及肺组织病毒载量、病毒核酸表达均有较为明显的改善作用。以上结果表明,小鼠体重、病毒载量、肺部炎症、炎症因子表达、淋巴细胞分型、CT及病理学改变可以做为HCoV-229E BALB/c小鼠轻症肺炎模型的评价指标。3 HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型的应用磷酸氯喹及干扰素α2b经治疗性给药均有一定的治疗作用。磷酸氯喹可以明显降低炎症因子TNF-α的含量及升高CD8+T细胞百分比。磷酸氯喹可能通过抑制小鼠炎症及改善免疫发挥作用。干扰素α2b可以明显降低肺指数,抑制炎症因子TNF-α的表达,可能通过抑制炎症发挥作用。治疗性给药4天后,与模型组比较,方剂1-2、2-2在治疗范围内,可明显降低HCoV-229E感染的BALB/c小鼠肺指数、肺组织中HCoV-229E病毒载量、小鼠肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α含量,其中1-2小剂量、2-2大剂量组还能显着提高B细胞百分比。方剂4-2在治疗范围内,与模型组比较,均可显着降低肺指数,肺组织病毒载量、小鼠肺组织炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α含量,其中小剂量组还能显着升高CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞及B细胞的百分比。金花清感胶囊、疏风解毒胶囊在治疗范围内均可降低肺指数、肺组织HCoV-229E病毒载量及肺组织匀浆中炎症因子IL-6、IL-10及TNF-α的蛋白表达水平,其中金花清感胶囊小剂量组还能显着升高CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的百分比。疏风解毒胶囊小剂量能够显着升高CD3+T细胞和CD4+T细胞的百分比。实验结论:1成功建立了人类冠状病毒229E体内外感染模型。2构建了 HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型评价指标评价体系。3应用HCoV-229E感染的小鼠肺炎模型,明确了金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2的药效学作用,也证明了该模型的可行性、稳定性和重复性。创新点:1本实验首次建立了 HCoV-229E感染BALB/c小鼠肺炎模型,并形成规范的评价标准,国内外尚未见报道。2本研究为《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第八版）》[4]中推荐试用药物金花清感颗粒、疏风解毒胶囊、方剂1-2、方剂2-2、方剂4-2治疗HCoV-229E感染BALB/c小鼠肺炎模型的有效性提供了实验室基础。
陈理达[2]（2021）在《阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肝损伤的相关性及机制研究》文中进行了进一步梳理目的:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apnea hypopnea syndrome,OSAHS）是一类较为常见的睡眠呼吸障碍,其可引起全身多个系统、多个器官损害。有一些研究报道肝脏也是其系统性损害的靶器官之一。然而OSAHS往往合并肥胖,而肥胖也是肝损伤的重要危险因素,因此有些研究结果提示在校正肥胖等混杂因素后,两者之间并没有相关性。总的来说,大部分与此相关的临床研究样本量较小,研究的结论也并不一致。动物研究表明慢性间歇低氧（chronic intermittent hypoxia,CIH）可导致肝损伤、肝脏氧化应激指标升高,提示氧化应激可能参与OSAHS相关肝损伤,但其内在确切的机制尚不明确。铁死亡是一种由铁积累的伴有脂质过氧化的调节性细胞死亡方式。铁死亡参与肝脏、心脏、肾脏缺血/再灌注损伤的病理生理过程。OSAHS中出现反复的缺氧/复氧,这与缺血/再灌注的病理生理过程相似。因此我们推测OSAHS相关肝损伤中可能存在铁死亡这一调节性死亡程序,并且可能存在相关机制的失调从而诱导铁死亡。因此本课题主要是研究OSAHS与肝损伤的相关性以及相关机制。主要通过收集分析大样本量的临床资料,分析OSAHS与肝损伤的相关性;其次在动物以及细胞水平探讨铁死亡在CIH诱导的肝损伤中的作用及潜在分子机制。方法:1.搜集2015年11月至2019年11月期间因睡眠时打鼾伴或不伴有呼吸暂停、白天嗜睡等症状到我们睡眠中心就诊的患者1085例,将其分为对照组、轻中度OSAHS组和重度OSAHS组。以血清肝功能评估肝损伤。利用Spearman相关分析睡眠参数与肝损伤相关性,多因素Logistic回归分析肝损伤的独立危险因素。对这些临床资料根据是否肥胖、性别、年龄进一步分层分析,探讨不同亚组中OSAHS与肝损伤的相关性。2.将14只SD雄性大鼠随机分成常氧对照（normoxia control,NC）组和CIH组,CIH组大鼠暴露于间歇性低氧（intermittent hypoxia,IH）8周。检测两组大鼠血清谷丙转氨酶（alamine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）水平,肝脏以及血清丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平,肝组织行苏木精-伊红染色并显微镜下观察,蛋白质印迹法检测肝脏中缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α）,核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2）,酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（Acyl-Co A synthetase long-chain family member 4,ACSL4）和谷胱甘肽过氧化酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）的蛋白表达水平。3.构建IH BRL-3A肝细胞模型,观察不同IH暴露时间细胞活力情况。选择合适的IH暴露时间用于进一步的细胞实验。铁死亡利用CCK8检测细胞活力,检测脂质活性氧（reactive oxygen species,ROS）、总Fe含量,蛋白质印迹法检测GPX4和铁蛋白重链多肽1（ferritin heavy chain 1,FTH1）来评估。肝细胞给予铁死亡抑制剂Ferrostatin-1处理,在IH暴露后,评估铁死亡情况。构建Nrf2沉默稳转株,在IH暴露后,评估铁死亡情况。4.将24只C57雄性小鼠随机分成NC组、CIH组、CIH+N-乙酰半胱氨酸组（N-acetylcysteine,NAC）。CIH组暴露IH时间为12周。检测两组大鼠血清ALT、AST水平,肝脏以及血清MDA、谷胱甘肽（glutathione,GSH）水平,肝组织总Fe含量,肝组织行苏木精-伊红染色并显微镜下观察,蛋白质印迹法检测肝脏中Nrf2、FTH1、GPX4的蛋白表达水平。结果:1.肝功能指标包括ALT、AST、ALT/AST、γ-谷氨酰转肽酶值随着AHI严重程度增加呈显着性升高（p<0.05）,而总胆红素、碱性磷酸酶在各组中比较没有明显差异（p>0.05）。Spearman相关分析显示氧减饱和度指数（oxygen desaturation index,ODI）、呼吸暂停低通气指数（apnea hyponea index,AHI）、血氧饱和度<90%睡眠时间比（the percentage of sleep time with Sp O2<90%,T90%）、最低血氧饱和度（lowest oxyhemoglobin saturation,La SO2）、平均血氧饱和度（average oxyhemoglobin saturation,average Sp O2）均与ALT、AST呈显着性相关。多因素Logistic回归结果显示较高的身体质量指数（body mass index,BMI）、甘油三酯、空腹血糖以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素。在对相关混杂因素校正后,轻中度OSAHS肝损伤发生风险较对照组增加0.705倍（OR=1.705,95%CI=1.105-2.631,p=0.016）,重度OSAHS肝损伤发生风险较对照组增加1.394倍（OR=2.394,95%CI=1.490-3.848,p<0.001）。2.以性别进行分层分析,多因素Logistic回归结果提示:在男性组中,较高的腰围、甘油三酯、Epworth嗜睡量表（Epworth sleepiness scale,ESS）评分以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）。在女性组中,较高的BMI、空腹血糖是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）,而OSAHS并非是肝损伤的独立危险因素（p>0.05）。以BMI进行分层分析,多因素Logistic回归结果提示:在肥胖组中,较高的空腹血糖以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）。在非肥胖组中,较高的BMI、甘油三酯以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）。以年龄进行分层分析,多因素Logistic回归结果提示:在老年组中,抗高血压以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）。在非老年组中,较高的BMI、空腹血糖、ESS评分以及OSAHS是肝损伤的独立危险因素（p<0.05）。3.与NC组相比,CIH组的血清ALT和AST均显着性升高。肝脏组织苏木精-伊红染色显示NC组肝小叶结构完整、清晰,肝细胞形态结构正常,汇管区无炎症细胞聚集。CIH组可观察到明显的肝组织病理学上的损伤,表现为肝细胞肿胀、坏死;炎症细胞尤其是淋巴细胞浸润。CIH组大鼠血清以及肝脏MDA水平显着高于NC组。CIH暴露显着降低了大鼠肝脏GPX4蛋白表达,同时增加了ACSL4蛋白表达。另外,CIH组大鼠肝脏Nrf2的蛋白表达水平显着性低于NC组。与NC组相比,CIH组大鼠肝脏HIF-1α蛋白表达水平显着升高。4.随着IH时间暴露时间增加,BRL-3A肝细胞活力逐渐降低。48h IH导致BRL-3A肝细胞活力显着性下降,脂质ROS水平、总Fe含量显着性升高,GPX4以及FTH1蛋白表达水平均显着性降低,Nrf2蛋白表达显着性增加。给予铁死亡抑制剂Ferrostatin-1处理显着性逆转IH导致细胞活力的下降,逆转IH导致的脂质ROS水平、总Fe含量的升高,逆转IH导致的GPX4以及FTH1蛋白表达水平的降低。沉默Nrf2明显加剧IH导致细胞活力的降低,加剧IH导致的脂质ROS水平、总Fe含量的升高,加剧IH导致的GPX4以及FTH1蛋白表达水平的降低。5.NAC干预显着性逆转CIH导致的小鼠血清ALT、AST增加以及缓解CIH导致的小鼠肝脏组织病理学损伤。与NC组相比,CIH组小鼠血清MDA以及肝脏MDA、Fe含量显着升高,血清以及肝脏GSH明显降低,而CIH+NAC组小鼠血清MDA以及肝脏MDA、Fe含量较CIH组降低,血清以及肝脏GSH则较CIH组显着增加。此外,NAC干预明显减轻了CIH导致的小鼠肝脏Nrf2、GPX4、FTH1蛋白表达水平的降低。结论:1.OSAHS是肝损伤的独立危险因素;校正混杂因素后,轻中度OSAHS肝损伤发生风险较对照组增加0.705倍,重度OSAHS肝损伤发生风险较对照组增加1.394倍。2.在男性人群中,OSAHS是肝损伤的独立危险因素;在女性人群中,OSAHS并非是肝损伤的独立危险因素。在肥胖人群、非肥胖人群、老年人群、非老年人群中,OSAHS均是肝损伤的独立危险因素。3.CIH动物模型显示CIH导致大鼠肝损伤、肝脏及全身氧化应激增加、肝脏出现铁死亡、肝Nrf2蛋白表达下降。4.IH细胞模型显示IH导致肝细胞铁死亡,铁死亡抑制剂能够逆转IH诱发的肝细胞铁死亡。IH导致大鼠肝细胞Nrf2表达升高,而沉默Nrf2则加剧IH诱发的肝细胞铁死亡。5.NAC可能通过提高GSH以及增加Nrf2表达缓解CIH导致的小鼠肝脏铁死亡以及肝损伤。
邹秉辰[3]（2020）在《SIRA型计算机病毒模型的修正与分析》文中提出随着互联网的飞速发展,涉及网络和数据的服务与应用呈现爆发式增长,与此同时越来越多的网络安全风险和问题不断暴露出来。计算机病毒自我复制和传播能力强、破坏力大,从而引起人们的忌惮,被公认为网络安全的头号敌人。鉴于计算机病毒与生物病毒在传播机制上的相似性,人们常常借助传染病动力学建模思想来研究它,以探索其传播行为,从而在宏观上加深对它的认识。人们早期提出的数学模型主要有SIS模型,SIR模型,SEIR模型,SIRA模型等。后来的研究者对上述模型进一步精细化,例如考虑到用户意识、病毒分层免疫和时滞等对计算机病毒传播的影响,从而对其加以修正。本文研究用户意识和分级免疫机制对SIRA模型的影响,对所得模型进行理论分析和数值仿真。首先,考虑到计算机用户自身对病毒主观上有防御意识,其效果可以类比于传染病防治中的疫苗接种。基于这方面的认识,我们在SIRA模型中引进线性用户意识强度函数,获得带有用户意识的SIRA模型。从理论上论证了带有用户意识的SIRA模型解的非负性,以及无毒平衡点和有毒平衡点的稳定性,并对理论结果进行了数值仿真。研究结果表明随着用户意识的提高系统的稳定性相应得到提高。其次,考虑到在杀毒软件等防御措施下,未感染病毒计算机和已感染病毒计算机都可在一定程度上获得免疫力,但往往后者比前者获得免疫性强。基于这种认识,我们在SIRA模型中引进分层免疫效应,获得带有分级免疫率的SIRA模型。从理论上论证了带有分级免疫率的SIRA模型解的非负性,以及无毒平衡点和有毒平衡点的稳定性,并对理论结果进行了数值仿真。研究结果表明系统在分层免疫效应下会更加稳定。
关鹏[4]（2020）在《慢性间歇性低氧引起大鼠心脏损伤的机制及白藜芦醇的干预研究》文中提出阻塞性睡眠呼吸暂停（obstructive sleep apnea,OSA）是一种常见的睡眠呼吸紊乱性疾病,产生原因是睡眠状态下上气道部分塌陷导致的呼吸暂停与通气不足,是多种心血管疾病的独立危险因素。OSA的主要病理生理特征是慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia,CIH）。CIH可以导致机体产生系统性氧化应激,过度产生活性氧（Reactive oxygen species,ROS）,从而引起脂质、蛋白质和核酸的氧化损伤。ROS还可作为信号分子调控某些基因的表达等途径促进心肌肥厚、纤维化和凋亡,导致心室重构,继而出现心功能不全甚至心力衰竭。过多的ROS还可以激活白细胞粘附和炎症反应。氧化应激是心肌损伤的重要机制之一,深入研究CIH引起氧化应激损伤及心脏功能障碍的调控机制,并寻找有效的心肌保护的药物靶点,对于OSA疾病的治疗具有重要意义。本研究探索了CIH对心血管系统的损伤及抗氧化干预的效果,证实氢气能够通过降低交感神经活性,提高肠系膜动脉舒张能力抑制CIH诱导的血压升高。在此基础上,继续研究白藜芦醇通过抗氧化发挥对CIH诱导心脏损伤的保护作用,探讨白藜芦醇抑制CIH引起心肌细胞焦亡的分子机制,实验的完成为临床防治OSA提供了新的思路。第一部分慢性间歇性低氧对大鼠血压的影响及抗氧化干预目的:探讨慢性间歇性低氧对大鼠血压的影响,探讨大鼠交感神经活性、肠系膜动脉舒张能力与血压的关系,并研究抗氧化干预对大鼠血压的干预作用。方法:雄性SD大鼠分为四组:对照组、CIH组、CIH+H2组、H2组。CIH组给予每天8h的间歇性低氧,共35天。氢气组每天上舱结束后吸氢2h。比较各组大鼠血压、交感神经活性和肠系膜动脉舒张能力的区别。结果:间歇性低氧引起大鼠收缩压和舒张压均显着升高。吸氢能够明显抑制CIH诱导的血压异常升高。此外,间歇性低氧引起大鼠肾交感神经兴奋及血浆去甲肾上腺素水平增高。并且,间歇性低氧使大鼠肠系膜动脉舒张功能降低。吸氢显着降低了交感神经活性并增加了肠系膜动脉的舒张能力。抗氧化参数检测发现,氢气降低了血清中的8-Ohd G水平,提高了SOD活性。结论:CIH通过增加交感神经兴奋和抑制末级动脉的舒张能力,从而引起大鼠血压升高,使用氢气进行抗氧化干预能够抑制CIH诱导的血压升高。第二部分白藜芦醇通过抗氧化缓解慢性间歇性低氧诱导的大鼠心脏损伤目的:通过复制慢性间歇性大鼠模型,探讨白藜芦醇通过抗氧化对大鼠心脏损伤的保护作用。方法:大鼠分为对照组、CIH组、CIH+Res组和Res组。超声检测大鼠左心室功能,测定血清心肌酶和乳酸脱氢酶的水平,分析内质网应激和抗氧化能力。结果:超声检测各组大鼠左心室功能时,麻醉大鼠的心率保持在350次/min左右,CIH组大鼠左心室射血分数、缩短分数和心输出量均显着降低,收缩末期体积明显增大。白藜芦醇处理后大鼠左心室射血分数、缩短分数和心输出量升高,收缩末期体积降低。各组相比,左心室舒张末期体积无明显差异。检测大鼠血清心肌酶和乳酸脱氢酶水平发现,CIH组大鼠血清中检测到的心肌酶和乳酸脱氢酶明显增多。白藜芦醇明显地抑制了血清中的心肌酶和乳酸脱氢酶。Western blot检测大鼠心脏内质网应激水平发现,白藜芦醇显着抑制了CIH处理大鼠的p-PERK/PERK、p-IRE/IRE比值增加,以及GRP78表达水平的增高。相比CIH组,白藜芦醇干预的CIH大鼠血清SOD活性和GSH含量明显升高,而MDA含量显着降低,表明白藜芦醇可以提高CIH大鼠的抗氧化水平。白藜芦醇抑制氧化应激水平可能与抑制NOX2和NOX4表达水平有关,因为白藜芦醇明显地抑制了CIH引起的NOX2和NOX4表达水平升高。结论:白藜芦醇通过提升抗氧化能力抑制了大鼠心脏氧化应激水平,从而抑制了CIH诱导的大鼠心脏损伤。第三部分白藜芦醇调节mTOR/TTP通路抑制间歇性低氧诱导的大鼠心肌细胞焦亡机制的研究目的:研究白藜芦醇对CIH大鼠心脏细胞焦亡的调控机制。方法:雄性SD大鼠分为四组:对照组、CIH组、CIH+Res组、Res组。CIH组给予每天8h的间歇性低氧,共35天。30 mg/kg体重的白藜芦醇于每日上舱前灌胃。H&E和TUNEL染色观察组织形态学改变。Western blotting检测AMPK/mTOR/TTP/NLRP3和Keap1/Nrf2信号通路的变化。免疫组织化学方法检测IL-1β的表达。免疫荧光法检测Nrf2蛋白的表达。实时荧光定量PCR检测NLRP3 mRNA水平。结果:我们证实,CIH损伤心脏结构,增加氧化应激和心脏NOD样受体（NLRP3）炎症小体的诱导,白藜芦醇可减轻这种损伤。白藜芦醇对NLRP3炎症体的阻断可能是通过激活AMP激活的蛋白激酶（AMPK）来介导的,AMPK可以抑制mTOR/TTP/NLRP3 mRNA信号转导。此外,白藜芦醇通过Nrf2上调抗氧化分子的表达,从而减轻CIH诱导的氧化应激。结论:白藜芦醇通过抑制mTOR/TTP/NLRP3信号通路,激活Nrf2/HO-1信号通路,抑制CIH诱导的心肌细胞焦亡。
李杏[5]（2019）在《网络中的计算机病毒建模与分析》文中研究表明互联网在传播资讯提供便利的同时也给计算机病毒的传播提供了温床。计算机病毒自我复制和传播的能力非常强大,给人们的信息安全造成极大的威胁,是互联网的头号天敌。由于计算机病毒与生物病毒在传播机制上有很多相似性,很多专家、学者借助传染病动力学建模思想来研究它,以期探索其内在的机理。本文在带预警机制计算机病毒模型（SEIR-KS）的基础上,进一步研究用户意识和双线性传播机制对它的影响。首先,考虑到用户对病毒攻击的自我防范意识,在带有预警机制的SEIR模型中引入用户意识强度函数,得到带预警机制和用户意识的SEIR模型（U-SEIR-KS）。我们研究了U-SEIR-KS解的非负性,继而研究了它的平衡点的稳定性。从理论上证明了U-SEIR-KS存在稳定的无毒平衡点（7）pb?,0,0,0（8）和有毒平衡点（7）0.2752,0.0648,0.0377,0.5805（8）。其次,考虑到病毒在SEIR-KS中传播的可能对象除了E之外还有I,因此更为合理的传播机制应该允许病毒分别以不同的传染率分别向E和I传播。基于这种观点我们获得了带预警机制和双线性传染率的SEIR模型（BL-SEIR-KS）。我们研究了BL-SEIR-KS解的非负性,继而研究了它的平衡点的稳定性。从理论上证明了BL-SEIR-KS存在稳定的无毒平衡点（7）0.2667,0,0,0（8）和有毒平衡点（0.4518,0.01963,0.01963,0.1516）。在理论分析的基础上我们对上述两个模型进行了数值仿真,包括平衡点稳定性仿真,以及SEIR,SEIR-KS与两个新模型的对比仿真,验证了新模型的有效性。
刘路宽[6]（2019）在《基于人工抗体的循环肿瘤细胞和外泌体富集新方法》文中进行了进一步梳理循环肿瘤细胞（CTCs）和外泌体是液体活检的重要标志物,其自身携带丰富的核酸和蛋白质等信息,实现对其高效捕获与检测对研究疾病发生和发展、药物评价、肿瘤早期与预后监测等具有十分重要的意义。本论文针对目前CTCs和外泌体捕获过程中,捕获效率和选择性不高,与后续蛋白质组学分析不兼容以及方法通用性低等问题,基于人工抗体技术,发展了一系列CTCs和外泌体富集新方法,并将其应用于复杂样品中CTCs和外泌体的捕获。针对目前抗体种类有限,适配体方法与后续CTCs分析不兼容的问题,采用原子转移自由基聚合和生物素-亲和素体系,将适配体引入毛细管柱中,制备得到对SMMC-7721细胞具有特异性识别和捕获能力的适配体功能化开管柱,实现了靶细胞的捕获、释放与蛋白质组学分析。为了提高CTCs的捕获效率,利用细胞印迹技术和适配体后修饰技术,制备了一种聚二甲基硅氧烷基细胞印迹材料,实现了 SMMC-7721细胞的捕获和释放,捕获效率可达到97.49%±11.24%。为了解决CTCs捕获选择性低的问题,将适配体引入细胞印迹位点内,形成多价效应,即使在1000倍干扰细胞存在下,对靶细胞的捕获效率仍能达到75%以上,实现了血液中肿瘤细胞的捕获。针对目前抗体和适配体亲和技术的通用性低的问题,通过引入对肿瘤细胞表面过表达的唾液酸具有特异性结合能力的苯硼酸单体,制备得到对SMMC-7721细胞具有特异性识别和捕获能力的细胞印迹材料。在构象匹配和化学亲和协同作用下,实现了对SMMC-7721细胞的捕获和无损释放。在1000倍干扰下,对SMMC-7721细胞的富集因子达13.45 ±3.20,细胞无损释放效率高达99%,实现了血液中肿瘤细胞的捕获。针对目前外泌体富集方法纯度低的问题,基于外泌体的表面带电性和特殊的尺寸,通过替代模板分子印迹技术,发展了一种新型的外泌体富集材料EXO-MIP。利用静电相互作用和空间效应,实现了尿液和细胞培养液中外泌体的捕获和蛋白质组分析。对于尿液样品,EXO-MIP比商品化试剂盒富集到的Top 100外泌体尿液标志蛋白质丰度高21.35%。对于Hela细胞培养液,EXO-MIP比商品化试剂盒富集到的Top 100外泌体常见蛋白质数目高10%,并且具有较强的抗干扰能力。
周珊珊[7]（2015）在《Nrf2与MT的协同作用在保护慢性间歇性低氧所致心脏损伤中的作用》文中进行了进一步梳理阻塞性睡眠呼吸暂停（obstructive sleep apnea, OSA）低通气综合征，是一种最常见的严重危害人类健康的睡眠疾病之一。慢性间歇性低氧（chronic intermittent hypoxia, CIH）是OSA的主要病理特征，目前众多学者应用CIH的动物模型研究OSA所致的心脏损伤，发现CIH是引发包括心室重构在内的心脏损伤的主要原因。目前认为，氧化应激是OSA所致心血管疾病的主要发病机制之一。我们在前期研究中发现CIH早期（3天）心肌组织未见明显氧化应激损伤同时伴随金属硫蛋白（metallothionein, MT）表达升高，然而在CIH晚期（4周和8周）MT表达下降、心肌氧化应激水平升高并出现心肌损伤及心功能下降；并且MT心脏特异性过表达转基因（cardiac-specific overexpressing MT gene, MT-TG）小鼠证实MT对CIH所致的心肌氧化应激损伤、心肌纤维化、炎症及心功能不全有明确的保护作用；与此同时MT基因敲除（MT-knockout, MT-KO）小鼠导致CIH诱导的心脏损伤提前出现并且程度加重。NF-E2相关因子2（NF-E2-related factor2,Nrf2）是一种含有亮氨酸拉链基本结构的转录因子，属于Cap-n-colla（rCNC）调节蛋白家族，是机体抵抗内外界氧化和化学等刺激的重要的防御性转导通路，促进细胞内氧化还原环境的调节。目的：明确Nrf2在CIH所致心脏损伤中的作用及其与MT的关系，并探讨Nrf2激动剂莱菔硫烷（Sulforaphane, SFN）保护CIH诱导的心脏损伤的机制。方法：CIH处理方案为20.9%O2/8%O2FIO2交替进行，30次/小时，12小时/天，最低氧饱和度变化维持在60%-70%，用以模拟发生在中重度OSA患者的氧饱和度状态；正常对照组给予同样周期的间歇性正常气流处理。本实验主要分为三部分：第一部分实验中将Nrf2-TG小鼠和野生型FVB小鼠暴露于CIH4周，Nrf2-KO小鼠和野生型C57BL/6J小鼠暴露于CIH3天和4周，每组小鼠为6只。第二部分中将MT-TG小鼠和野生型FVB小鼠暴露于CIH4周，MT-KO小鼠和野生型129S1小鼠暴露于CIH3天和4周，每组小鼠为6只。为进一步探讨PI3K/Akt/GSK-3β/Fyn通路在调节Nrf2的表达中的作用，将FVB小鼠暴露于CIH3天，同时给予或不给予PI3K抑制剂LY294002，每组小鼠为6只。第三部分实验为研究SFN在CIH诱导的心脏损伤中的保护作用及机制，将MT-KO和Nrf2-KO小鼠及各自的野生型小鼠暴露于CIH4周，同时给予或不给予SFN皮下注射，每组小鼠为6只。结果：CIH早期（3天）小鼠心肌组织中Nrf2表达水平升高、晚期（4周及8周）下降，与MT的表达趋势相同。Nrf2基因心脏过表达小鼠可保护CIH所致的心脏损伤、而Nrf2基因敲除小鼠心脏损伤进一步加重。Nrf2通过与MT的启动子区结合进而促进MT的表达，MT可通过激活PI3K/Akt/GSK-3β/Fyn途径调节Nrf2的功能。SFN可保护MT-KO小鼠中CIH所致的心脏氧化应激损伤和心功能不全，而在Nrf2-KO小鼠中则失去保护作用。结论：在CIH所致的心脏损伤中Nrf2和MT之间存在协同作用关系，二者皆对CIH所致的心脏损伤有保护作用。SFN的保护作用依赖于Nrf2的存在，而不是MT。
王宏伟[8]（2004）在《浅谈清除计算机病毒的几种方法》文中研究说明 现在计算机在人们生活中已占有愈来愈重要的地位,但近年来频频爆发的计算机病毒却使得很多用户叫苦不迭,究其原因,除防范意识薄弱外,中毒后束手无策以致无法及时挽救损失的电脑用户仍大有人在。因此,应先了解一下反病毒知识。首先不要惊慌,在解毒之前,要先备份重要的数据文件和硬盘的主引导信息,一旦解毒失败了还有机会恢复计算机的原貌,再用反病毒软件修复。其次就是启动反病毒软件,对硬盘的所有分区进行查毒,并要注意对计算机"内存"、"压缩文件"和"邮件"进行检查,当发现病毒时可以用一些反病毒软件进行杀毒,但并不是所有病毒都能解除,一些
李冰[9]（2002）在《主动防御计算机网络病毒》文中研究表明
李冰[10]（2001）在《关于主动防治计算机病毒的几点探讨》文中研究指明本文概述了目前计算机病毒查检和防毒杀毒的主要方法 ,提出研究免疫软件、主动防治病毒的观点 ,并且归纳出防御—化解—消除病毒软件应具备的基本功能 .
二、CIH病毒的免疫及解毒（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、CIH病毒的免疫及解毒（论文提纲范文）
（1）人类冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠肺炎模型的建立及应用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 文献综述 人冠状病毒动物模型研究进展 |
| 引言 |
| 第一部分: 人类冠状病毒229E体内外模型的建立 |
| 第一章: 人类冠状病毒229E(HCoV-229E)体外感染细胞模型的建立 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 第二章 人类冠状病毒229E (HCoV-229E)感染小鼠肺炎模型建立 |
| 前言 |
| 实验一: 人类冠状病毒229E (HCoV-229E)感染小鼠肺炎模型感染体系、接种量及小鼠品系的筛选 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 实验二: 人类冠状病毒229E小鼠肺炎模型感染次数筛选 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三章: 人类冠状病毒229E (HCoV-229E)感染小鼠肺炎模型评价指标的建立 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分: HCoV-229E BALB/c小鼠肺炎模型的应用 |
| 前言 |
| 第一章: 磷酸氯喹及干扰素α2b对小鼠HCoV-229E肺炎模型的应用 |
| 材料和方法 |
| 实验结果 |
| 小结 |
| 第二章: 中药复方对小鼠HCoV-229E肺炎模型的应用 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 第三章: 中药成药对小鼠HCoV-229E肺炎模型的作用 |
| 材料及方法 |
| 结果 |
| 小结 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肝损伤的相关性及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 第一章 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肝损伤相关性的大样本临床研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 铁死亡在慢性间歇低氧诱导大鼠肝损伤中的作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 间歇低氧诱导BRL-3A肝细胞铁死亡及相关机制的研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 N-乙酰半胱氨酸对慢性间歇低氧小鼠肝脏铁死亡以及肝损伤的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文总结 |
| 研究的不足及展望 |
| 参考文献 |
| 综述 阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肝损伤相关性研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（3）SIRA型计算机病毒模型的修正与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究意义 |
| 1.3 研究方法 |
| 1.4 研究现状 |
| 1.5 研究内容 |
| 1.5.1 相关模型 |
| 1.5.2 本文模型 |
| 1.5.3 本文工作 |
| 第二章 预备知识 |
| 2.1 动力系统 |
| 2.2 稳定性理论 |
| 第三章 带有用户意识的SIRA计算机病毒模型 |
| 3.1 带有用户意识的SIRA模型 |
| 3.1.1 模型介绍 |
| 3.1.2 条件假设 |
| 3.1.3 模型建立 |
| 3.2 解的非负性 |
| 3.3 稳定性分析 |
| 3.4 数值仿真 |
| 3.4.1 稳定性仿真 |
| 3.4.2 对比分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 带有分级免疫率的SIRA计算机病毒模型 |
| 4.1 带有分级免疫率的SIRA模型 |
| 4.1.1 模型介绍 |
| 4.1.2 条件假设 |
| 4.1.3 模型建立 |
| 4.2 解的非负性 |
| 4.3 稳定性分析 |
| 4.4 数值仿真 |
| 4.4.1 稳定性仿真 |
| 4.4.2 对比分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 结语 |
| 5.2 展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
（4）慢性间歇性低氧引起大鼠心脏损伤的机制及白藜芦醇的干预研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 慢性间歇性低氧对大鼠血压的影响及抗氧化干预 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 白藜芦醇通过抗氧化缓解慢性间歇性低氧诱导的大鼠心脏损伤 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 白藜芦醇调节mTOR/TTP通路抑制间歇性低氧诱导的大鼠心肌细胞焦亡机制的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述一 OSA与心血管疾病相关性的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 细胞焦亡及其在心血管疾病中的作用 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）网络中的计算机病毒建模与分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.2 研究意义 |
| 1.3 研究方法 |
| 1.3.1 计算机病毒与生物病毒的比较 |
| 1.3.2 生物病毒动力学模型 |
| 1.3.3 计算机病毒动力学模型 |
| 1.4 研究现状 |
| 1.5 研究内容 |
| 1.5.1 相关模型回顾 |
| 1.5.2 本文研究的模型 |
| 1.5.3 本文研究的问题 |
| 第二章 预备知识 |
| 2.1 微分动力系统 |
| 2.2 稳定性分析 |
| 第三章 带预警机制和用户意识的SEIR模型 |
| 3.1 U-SEIR-KS模型 |
| 3.1.1 模型介绍 |
| 3.1.2 条件假设 |
| 3.1.3 模型建立 |
| 3.2 解的非负性 |
| 3.3 稳定性分析 |
| 3.4 数值仿真 |
| 3.4.1 稳定性仿真 |
| 3.4.2 对比分析 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 带预警机制和双线性传染率的SEIR模型 |
| 4.1 BL-SEIR-KS模型 |
| 4.1.1 模型介绍 |
| 4.1.2 条件假设 |
| 4.1.3 模型建立 |
| 4.2 解的非负性 |
| 4.3 稳定性分析 |
| 4.4 数值仿真 |
| 4.4.1 稳定性仿真 |
| 4.4.2 对比分析 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 对策与建议 |
| 第六章 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 |
（6）基于人工抗体的循环肿瘤细胞和外泌体富集新方法（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 主要符号表 |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.2 循环肿瘤细胞的捕获技术 |
| 1.2.1 基于生物物理原理的循环肿瘤细胞捕获技术 |
| 1.2.2 基于生物亲和原理的循环肿瘤细胞捕获技术 |
| 1.3 外泌体的捕获技术 |
| 1.3.1 基于生物物理原理的外泌体捕获技术 |
| 1.3.2 基于生物亲和原理的外泌体捕获技术 |
| 1.4 人工抗体技术在循环肿瘤细胞及外泌体富集中的应用 |
| 1.4.1 适配体在循环肿瘤细胞和外泌体富集中的应用 |
| 1.4.2 哺乳动物细胞印迹技术及其在肿瘤细胞捕获中的应用 |
| 1.5 本文主要研究思路 |
| 2 基于适配体的功能化开管柱制备及其在循环肿瘤细胞分析中的应用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 试剂和仪器 |
| 2.2.2 毛细管的活化与修饰 |
| 2.2.3 毛细管内接枝甲基丙烯酸缩水甘油酯 |
| 2.2.4 金纳米粒子在毛细管内的修饰 |
| 2.2.5 毛细管内修饰链霉亲和素 |
| 2.2.6 适配体功能化开管柱的制备 |
| 2.2.7 适配体功能化开管柱用于捕获和释放SMMC-7721细胞 |
| 2.2.8 适配体功能化开管柱用于选择性捕获SMMC-7721细胞 |
| 2.2.9 被适配体功能化开管柱捕获细胞的质谱鉴定与分析 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 适配体功能化开管柱的制备与表征 |
| 2.3.2 适配体功能化开管柱对SMMC-7721细胞的捕获 |
| 2.3.3 适配体功能化开管柱对SMMC-7721细胞的捕获选择性 |
| 2.3.4 适配体功能化的开管柱在肿瘤细胞分析中的应用 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 基于细胞印迹与适配体协同效应的人工抗体的制备及其在循环肿瘤细胞捕获与释放中的应用 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 试剂和仪器 |
| 3.2.2 三功能交联剂的制备 |
| 3.2.3 细胞培养与细胞染色 |
| 3.2.4 适配体非定向修饰的细胞印迹材料(APT-CIS)的制备 |
| 3.2.5 适配体定向修饰的细胞印迹凝胶(APT-CIH)的制备 |
| 3.2.6 APT-CIS和APT-CIH用于识别与捕获SMMC-7721细胞 |
| 3.2.7 APT-CIS和APT-CIH用于SMMC-7721细胞的释放与增殖 |
| 3.2.8 APT-CIS和APT-CIH用于选择性捕获SMMC-7721细胞 |
| 3.2.9 APT-CIH在血液中对肿瘤细胞的捕获 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 APT-CIS的制备 |
| 3.3.2 APT-CIS用于捕获和释放SMMC-7721细胞 |
| 3.3.3 APT-CIS对SMMC-7721细胞的捕获选择性 |
| 3.3.4 APT-CIH的表征分析 |
| 3.3.5 APT-CIH对SMMC-7721细胞的捕获 |
| 3.3.6 APT-CIH对SMMC-7721细胞的捕获选择性 |
| 3.3.7 APT-CIH对SMMC-7721细胞的释放及被释放细胞的增殖 |
| 3.3.8 APT-CIH在血液中对SMMC-7721细胞的捕获行为 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 基于细胞印迹与苯硼酸协同效应的人工抗体制备及其在循环肿瘤细胞捕获与释放中的应用 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 试剂和仪器 |
| 4.2.2 细胞培养与细胞染色 |
| 4.2.3 苯硼酸辅助细胞印迹凝胶(PBA-CIH)的制备 |
| 4.2.4 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的识别与捕获 |
| 4.2.5 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的释放与增殖 |
| 4.2.6 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的选择性捕获 |
| 4.2.7 PBA-CIH在血液中对SMMC-7721细胞的捕获 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 PBA-CIH的制备与表征分析 |
| 4.3.2 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的捕获效率 |
| 4.3.3 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的捕获选择性 |
| 4.3.4 PBA-CIH对SMMC-7721细胞的释放及被释放细胞的增殖 |
| 4.3.5 PBA-CIH用于血液中SMMC-7721细胞的捕获 |
| 4.4 本章小结 |
| 5 基于静电原理与空间效应的外泌体富集材料用于尿液和细胞培养液中外泌体的捕获与蛋白质组分析 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 实验部分 |
| 5.2.1 试剂与仪器 |
| 5.2.2 纳米二氧化硅颗粒的制备 |
| 5.2.3 替代模板法制备外泌体富集材料(EXO-MIP) |
| 5.2.4 Hela细胞培养和培养液预处理 |
| 5.2.5 EXO-MIP对尿液和细胞培养液外泌体的捕获 |
| 5.2.6 EXO-MIP富集到外泌体的质谱鉴定与蛋白质组分析 |
| 5.3 结果与讨论 |
| 5.3.1 EXO-MIP的制备与结构表征 |
| 5.3.2 EXO-MIP对尿液外泌体的富集与蛋白质组分析 |
| 5.3.3 EXO-MIP对Hela细胞培养液外泌体的富集与蛋白质组分析 |
| 5.4 本章小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.2 创新点 |
| 6.3 展望 |
| 参考文献 |
| 附录A 三功能交联剂合成过程中的~1H-NMR表征结果 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）Nrf2与MT的协同作用在保护慢性间歇性低氧所致心脏损伤中的作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩写词表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 文献回顾 |
| 1.2.1 OSA 与心血管系统疾病 |
| 1.2.2 金属硫蛋白（MT）保护 CIH 所致的心脏损伤 |
| 1.2.3 NF-E2 相关因子 2 （ Nrf2 ）及其诱导剂莱菔硫烷（Sulforaphane，SFN）在氧化应激中的防御作用 |
| 1.2.4 Nrf2 与 MT 的关系 |
| 第2章 Nrf2 与 MT 的协同作用在保护慢性间歇性低氧所致心脏损伤中的作用 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验所需药品、试剂及抗体 |
| 2.2.3 实验所需主要仪器 |
| 2.2.4 实验方法 |
| 2.2.5 统计方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 Nrf2 和 MT 的表达均在 CIH 早期升高、晚期下降 |
| 2.3.2 Nrf2 基因缺失加重 CIH 诱导的心肌氧化应激损伤、炎症、心肌纤维化和心功能不全 |
| 2.3.3 Nrf2 基因过表达拮抗 CIH 诱导的心肌氧化应激损伤、炎症、心肌纤维化和心功能不全 |
| 2.3.4 CIH 条件下 Nrf2 与 MT 之间的正反馈循环及调节机制 |
| 2.3.5 SFN 对 CIH 所致心脏损伤的具有保护作用 |
| 2.4 讨论 |
| 2.4.1 Nrf2 在 CIH 诱导心脏损伤中的保护作用 |
| 2.4.2 CIH 条件下 Nrf2 和 MT 之间的协同作用及相关机制 |
| 2.4.3 SFN 在 CIH 所致心脏损伤中的保护作用 |
| 2.4.4 SFN 通过调节 Nrf2 保护 CIH 所致心脏损伤 |
| 2.4.5 临床展望 |
| 第3章 结论 |
| 3.1 实验结论 |
| 3.2 创新点 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
四、CIH病毒的免疫及解毒（论文参考文献）
- [1]人类冠状病毒229E（HCoV-229E）感染小鼠肺炎模型的建立及应用[D]. 徐英莉. 中国中医科学院, 2021(02)
- [2]阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与肝损伤的相关性及机制研究[D]. 陈理达. 福建医科大学, 2021(02)
- [3]SIRA型计算机病毒模型的修正与分析[D]. 邹秉辰. 浙江海洋大学, 2020(01)
- [4]慢性间歇性低氧引起大鼠心脏损伤的机制及白藜芦醇的干预研究[D]. 关鹏. 河北中医学院, 2020
- [5]网络中的计算机病毒建模与分析[D]. 李杏. 浙江海洋大学, 2019(02)
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