一、就地制成油乳剂组织灭活苗控制鸡大肠杆菌病（论文文献综述）
丛小钧[1]（2021）在《山东省貂源大肠杆菌生物学特性及灭活苗的初步研究》文中认为近几年,随着山东水貂养殖业迅速发展,山东的养貂数量已经超过其他省份总和。但是随着水貂养殖业集约化程度的提高,水貂的发病率继续上升成为制约水貂业发展的重要因素。目前水貂大肠杆菌病已成为水貂养殖业一大难题。抗菌药物普遍滥用,使得抗生素治疗大肠杆菌病效果越来越差。因此研制出有效的大肠杆菌疫苗来预防水貂大肠杆菌病变得尤其重要。本研究使用山东省动物疫病预防与控制中心实验室保存菌株经平板划线、菌落形态观察、显微镜观察、全自动生化鉴定仪鉴定了56株大肠杆菌。然后通过16S r RNA测序筛选出11种O型抗原血清,并进行玻璃板凝集试验确定其血清型。对主导血清型菌株进行药敏实验、致病力实验,筛选出两株强毒株进行疫苗研究。对主导血清型O91和O103的强毒株分别进行半数致死量(LD50)测定,得出最终疫苗效力试验所用的攻毒剂量。血清型结果显示,56株大肠杆菌分属11种血清型,包括O103、O113、O91、O121、O8、O26、O39、O80、O16、O111、O45。其中O91和O103为主导血清型,共占定型血清的44.6%。药敏实验结果显示主导血清型大肠杆菌对青霉素类抗生素高度耐药,耐药率在88%以上,对头孢类药物耐药率达到了52%,对氨曲南耐药率为44%,对庆大霉素和妥布霉素耐药率分别为32%和40%,对环丙沙星和左氧氟沙星耐药率分别为64%和56%,对复方新诺明耐药率为52%,对培南类药物敏感。根据致病力初筛结果,挑选出H1807021a、H200113Fd进行疫苗研究。H1807021a、H200113Fd半数致死量测定结果分别为5.82×107CFU、5.14×107CFU,与之前报道的相比,本研究貂源大肠杆菌致病力较强。本研究对候选菌株进行体外培养,发现37℃培养12h抗原浓度达到最高;用0.4%甲醛溶液进行灭活24h,灭活完全。比较不同的免疫剂量的免疫,发现以4×108CFU免疫小鼠的效果最佳;通过一次免疫和两次免疫的免疫效果对比,最终得出最佳免疫次数为两次。采用4×108CFU的接种剂量,免疫两次进行免疫效力试验。与对照组相比,疫苗组保护率达到了100%,证明水貂大肠杆菌二价灭活苗制备初步取得成功。本研究初步了解了山东省貂源大肠杆菌的血清型、耐药性、致病力,并制备了水貂大肠杆菌二价灭活疫苗,为水貂大肠杆菌病的防治提供重要的理论依据和技术支撑。
邵启文[2]（2019）在《鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究》文中研究指明禽致病性大肠杆菌（Avian pathogenic Escherichia coli,APEC）常引起家禽发生多种肠道外疾病如心包炎、气囊炎、肝周炎、蜂窝织炎及败血症,具有较高的感染率和死亡率,给养禽业带来严重损失。以本实验室构建的禽致病性大肠杆菌脂多糖缺失株E516△lpxL△lpxM（O1）、E058△lpxL△lpxM（O2）、E522△lpxL△lpxM（078）株作为制苗菌株等比例混合,分别辅以白油佐剂道达尔170、白油佐剂Marc52和铝胶佐剂研制了相应三价灭活疫苗,并对三种佐剂疫苗进行了安全性和免疫效力比较试验,以确定合适的疫苗佐剂。疫苗佐剂确定后,对该三价疫苗的免疫持续期进行研究。现将研究结果报告如下:1、三种不同佐剂疫苗的安全性比较利用制备的三种不同佐剂灭活疫苗,分别以单剂量0.5 mL/羽和双倍剂量1.0 mL/羽接种14日龄SPF鸡进行安全性试验。试验结果表明,注射白油佐剂灭活疫苗组的鸡,以单剂量0.5 mL/羽免疫,接种疫苗后12-24 h,部分鸡出现短时精神沉郁,之后无任何不良反应:以双倍剂量1 mL/羽免疫时,接种疫苗后5-8 h试验鸡出现精神不佳,24 h内恢复正常,由于双倍剂量组免疫剂量较大,部分试验鸡注射部位出现0.1-1.2 cm大小不等的结节,但未出现全身不良反应,免疫一周注射部位结节逐渐消失,生长状况良好。注射铝胶佐剂灭活疫苗组的鸡,在整个观察期内饮食和精神状态均正常,注射部位亦未见异常。以上结果说明我们所研制的油佐剂疫苗具有良好的安全性。2、三种不同佐剂疫苗的免疫效力试验以三种不同佐剂疫苗对14日龄SPF鸡进行免疫,42日龄时分别以亲本株E516（O1）、E058（02）和E522（078）攻毒,进行免疫保护试验。试验结果表明,白油佐剂道达尔170疫苗组攻毒后保护比均为7/10,白油佐剂Marc52疫苗组攻毒后保护比分别为5/10、5/10和7/10,铝胶佐剂疫苗组攻毒后保护比分别为3/10、3/10和5/10,攻毒对照组攻毒后死亡比均为10/10。以上试验结果表明,铝胶佐剂疫苗对同源野生株攻毒鸡的免疫保护效果差,白油佐剂道达尔170和白油佐剂Marc52疫苗尤其是前者对同源野生株攻毒鸡可以提供良好的免疫保护。综合安全性试验和免疫保护试验,我们确定白油佐剂道达尔170佐剂作为研制疫苗的佐剂。3、鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期试验以鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗对14日龄SPF鸡进行免疫,分别在免疫后第30 d、第60 d和第90 d进行亲本株攻毒试验,对保护效力、特异性抗体水平及组织病理变化进行评价。试验结果表明,免疫后第30 d、第60 d和第90 d攻毒,试验鸡均得到不同程度较好保护。由于成年鸡对致病性大肠杆菌的敏感性降低,90日龄试验鸡攻毒对照组死亡比减少属于正常现象。白羽肉鸡的生长周期一般在9周以内,该疫苗应用在白羽肉鸡上,一次性免疫即可得到有效的保护。综合多因素考虑,我们暂定鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期为3个月。
潘廷云[3]（2018）在《鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究》文中研究指明禽致病性大肠杆菌病（AvianColibacillosis,AC）是由禽致病性大肠杆菌（APEC）引起的禽类传染性疾病,是养禽业重要的细菌病之一。由于抗生素治疗存在菌株抗药性和药物残留的缺陷,有效的疫苗防治禽致病性大肠杆菌病至关重要。本研究分别以鸡致病性大肠杆菌常见血清型O1（E516）、02（E058）、078（E522）三个菌株及由本实验室构建的脂多糖缺失E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522△lpxL△lpxM株为抗原,与MontanideTS△71 VG油佐剂制成多价灭活苗。探讨脂多糖缺失灭活疫苗的安全性、最适抗原含量、免疫持续期和疫苗侯选株与流行株的交叉免疫保护。一鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性比较研究选取本实验室保存鸡致病性大肠杆菌E516（01）、E058（02）、E522（078）和构建的脂多糖缺失株 E516△lpxL△lpxM、E058△lpxL△lpxM、E522AlpxL△lpxM分别制成抗原含量为2.0 × 109 CFU/mL、2.0 × 1010 CFU/mL的多价灭活疫苗,以两倍正常剂量免疫进行安全性试验。结果显示,无论是亲本株还是脂多糖缺失多价灭活疫苗,抗原含量为2.0 × 109 CFU/mL免疫组的安全性优于2.0 × 1010 CFU/mL免疫组;在2.0 × 109 CFU/mL免疫组中,脂多糖缺失多价疫苗的安全性优于亲本株多价灭活疫苗。二鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适免疫抗原含量研究本研究制备抗原含量分别为2.0 × 108.5CFU/mL、2.0 × 109 CFU/mL和2.0 × 109.5 CFU/mL的01、02、078血清型亲本株及脂多糖缺失株油佐剂多价灭活疫苗。免疫后对其特异性抗体水平、亲本株攻毒保护率及免疫鸡攻毒后内脏组织病理变化进行研究。研究数据显示,抗原含量为2.0 ×108 5 CFU/mL免疫,亲本株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为50.0%、55.6%、55.6%,脂多糖缺失疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为50.0%、55.6%、66.7%;抗原含量为 2.0 ×109 CFU/mL 免疫,亲本株疫苗对 01、02、078亲本株保护率分别为80.0%、88.9%、88.9%;脂多糖缺失株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为90.0%、88.9%、100.0%;抗原含量为2.0 ×109.5 CFU/mL免疫,亲本株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为70.0%、77.8%、77.8%;脂多糖缺失株疫苗对01、02、078亲本株保护率分别为80.0%、88.9%。、100.0%。因此,本实验室制备的脂多糖缺失多价灭活疫苗不同抗原含量免疫组的保护率均高于相同抗原含量亲本株疫苗组,该疫苗的最适抗原含量2.0 × 109 CFU/mL。三鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期研究本研究以鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗进行免疫,分别在免疫后30 d、60 d、90 d和120 d进行亲本株攻毒,根据特异性抗体水平、亲本株攻毒保护率及鸡内脏组织病理变化进行研究。结果表明,在30 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率分别为88.9%、87.5%、87.5%;在60 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率均为66.7%;在90 d攻毒,疫苗对01、02、078亲本株的保护率分别为50.0%、50.0%、66.7%;在120 d攻毒,免疫组和攻毒对照组均未出现病死鸡。因此,免疫后30 d、60 d、90 d攻毒,鸡均得到不同程度保护。但由于成年鸡对致病性大肠杆菌的敏感性降低,免疫后120 d攻毒免疫组和对照组均未出现病死鸡,所以本研究暂定该疫苗的免疫持续期为3个月。四鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗交叉免疫保护研究本研究以鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗进行免疫,免疫后检测特异性抗体水平,对01、02、078亲本株和近年流行的菌株O1（Y12,T12）、02（E172,E899）、078（Y14,Y48）进行攻毒和免疫鸡内脏组织的病理变化进行研究。研究结果显示,对01血清型E516、Y12、T12菌株的免疫保护率分别为88.9%、80.0%、87.5%;对02血清型E058、E172、E899菌株的免疫保护率分别为87.5%、88.9%、80.0%;对078血清型E522、Y14、Y48菌株的免疫保护率分别为88.9%、80.0%、80.0%。本研究得出此鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗对疫苗候选株和流行株均提供不低于80.0%的保护。
贾忆雪[4]（2018）在《鸡大肠杆菌病脂多糖缺失三价灭活疫苗保存期及被动免疫效力的初步研究》文中研究指明禽大肠杆菌病表现为心包炎、肝周炎、气囊炎等病变,在养殖业造成感染鸡死亡率、种蛋孵化率低等问题。以实验室研制的禽致病性大肠杆菌E516ΔlpxL Δ lpxM（O1）、E058△lpxL △ lpxM（O2）、E522 pxL △ lpxM（O78）三株变株,制备成Montanide TSA 71 VG油佐剂三价灭活疫苗,并对其疫苗保存期和被动免疫效力进行研究,现将研究结果报告如下:1、疫苗保存期:对实验室制备的E516 Δ lpxL Δ lpxM（O1）、E058 Δ lpxL Δ lpxM（02）、E522 △lpxL Δ lpxM（078）MontanideTSA71VG油佐剂三价灭活疫苗,进行保存期实验,研究其保存9个月和12个月时的安全性和免疫保护效力。结果显示,保存9个月和12个月的疫苗免疫鸡,观察7 d,疫苗免疫组实验鸡与健康对照组比较,只有免疫1mL/羽的试验鸡注射后精神状态差,食欲下降,24小时内恢复,注射部位出现0.1 cm～1.2 cm大小不等的结节,但未出现全身不良反应,免疫1周后注射部位结节消失,且平均日增重与健康对照组无显着性差异,说明疫苗保存9和12个月后,仍然具有良好的安全性。免疫效力实验中,无特定病原体（specific pathogen free,SPF）鸡14日龄时进行免疫,35日龄时进行攻毒,免疫后每周采集所有鸡的血清,用禽大肠杆菌血清02型E058株、01型E516株、078型E522株的脂多糖分别致敏红细胞,通过间接血凝方法,对保存9个月和保存12个月疫苗的免疫鸡进行血清抗体效价测定。结果表明,疫苗保存9个月和12个月后,其血清学效力检验结果与新制疫苗无显着差异。攻毒对照组90%及以上的试验鸡死亡。疫苗在2～8℃C保存9个月后其免疫组试验鸡仍可达到60%以上免疫保护,其中对E516具有70%保护率,对E058具有66.67%的保护率,对E522有88.89%的保护率,其中虽有个别试验鸡出现精神萎靡,食欲、饮水降低,但并未死亡。疫苗保存12个月,其免疫组对E516有70%的免疫保护率,对E058有77.78%的保护率,对E522有88.89%的免疫保护率。上述结果表明本疫苗2～8℃保存6个月和12个月以后免疫效力均未明显改变。2、被动免疫试验:对120日龄SPF母鸡进行免疫,0.5 mL/羽;免疫后0.5、1、2、3个月采集母鸡血清,同时,收集母鸡免疫后0.5、1、2、3个月的种蛋孵化。对孵出的雏鸡在7、14日龄时进行采血、抗体测定,同时进行攻毒。结果显示母鸡免疫之前无抗体,母鸡免疫0.5个月后抗体水平在1:8～1:32之间,免疫后1～2个月期间LPS抗体达到1:32～1:128,免疫后3个月LPS抗体稍降至1:16～1:64之间。免疫后0.5个月的母鸡收集的种蛋,孵出雏鸡在7日龄时抗体水平在在1:2～1:16之间,14日龄雏鸡抗体水平在0～1:8之间。免疫后3个月的母鸡收集种蛋,种蛋孵出的7日龄雏鸡抗体水平在1:8～1:32之间,14日龄雏鸡抗体水平在1:4～1:16之间。而免疫母鸡1、2个月后收集种蛋孵出的雏鸡,这2个时间段孵出的7日龄雏鸡抗体水平均在1:16～1:64之间,14日龄雏鸡抗体水平均在1:8～1:32之间。母鸡免疫后0.5、3个月收集种蛋孵出雏鸡攻毒后不能完全保护,0.5个月母鸡种蛋孵出的7日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在12.5%～14.3%之间;14日龄免疫组攻毒后保护率在12.5%～22%之间。免疫后3个月母鸡,种蛋孵出的7日龄免疫组攻毒后保护率在12.5%～22%之间;14日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在37.5%～50%之间。免疫母鸡1、2个月收集种蛋孵出雏鸡攻毒后能完全保护（这2个时间段母鸡抗体均在1:32～1:128之间）;种蛋孵出的7日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在在55.56%～88.89%之间;14日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在60%～88.89%之间;母源抗体达到1:32的雏鸡才能保护;低于1:32的雏鸡攻毒后多数不能保护。上述结果表明母源抗体的高低直接影响雏鸡的被动免疫效力,母鸡抗体水平与雏鸡免疫保护效力成正相关。免疫母鸡0.5、3个月收集种蛋孵出的7、14日龄雏鸡攻毒后不能完全保护,而母鸡免疫后1～2个月间收集种蛋孵出的7日龄雏鸡攻毒后能完全保护。因此,母鸡被动免疫持续期为免疫后的1～2个月。即使母鸡免疫后1～2个月间收集的种蛋孵出的14日龄雏鸡攻毒后也不能完全保护,因此雏鸡的初次免疫应在2周龄左右。
黄立[5]（2017）在《豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究》文中提出目前,鸡大肠杆菌病作为一种重要的细菌性传染病,对我国养鸡业造成了严重危害。根据信阳市疫病检测工程中心（信阳农林学院市级工程中心）对豫南地区主要养鸡集中区的调查,在规模化养鸡场细菌性疾病当中,大肠杆菌发病率一直居于首位。鸡大肠杆菌血清型众多,耐药菌株也在不断增多,给防治本病增加了难度。因此,开展豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与分析,对于有效防治鸡大肠杆菌病,具有重要的理论和实践意义。本研究涉及到豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定、对常用抗菌药物耐药性分析、中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用、利用优势致病菌株研制多价灭活苗等方面。通过系列研究,进一步弄清楚豫南地区鸡大肠杆菌病的流行状况,必将为豫南地区乃至河南的鸡大肠杆菌病科学防治工作,提供重要的理论依据和临床价值。1豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定对于豫南地区送检的164份病鸡样品,经过常规方法培养、纯化及镜检,并进行生理生化鉴定和PCR鉴定,共分离到鸡大肠杆菌121株,鉴定出88株分离菌株血清型,包括17种血清型;主要血清型是02、078、01、018、026、022,共72株,占总分离株的59.50%。给供试雏鸡接种121株分离菌株后,可见发病症状及剖检病变都与本病特征相符;在121株分离菌株中,有64株高致病性菌株、31株中度致病性菌株、26株低致病性菌株,分别占总试验菌株的52.9%、25.6%、21.5%。2对常用抗菌药物耐药性分析采用标准微量稀释法,测定62株鸡大肠杆菌对18种药物的体外最小抑菌浓度（MIC）,并通过PCR方法扩增I型整合酶基因。结果显示,全部菌株呈现多重耐药,耐药谱型达12种之多;对β-内酰胺类、酚胺醇类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类、四环素类等抗菌药物,均表现出不同程度的耐药性;对土霉素、复方新诺明、磺胺嘧啶、强力霉素四种药物,耐药率分别为95.2%、87.1%、80.6%、72.6%;I型整合酶基因检出率为87.1%。由此表明,鸡大肠杆菌临床分离株,对常用抗菌药物都产生了不同程度的耐药性。3中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用采用棋盘稀释法,了解中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用,进而筛选出具有协同抗菌效果的药物组合,为体内试验提供理论基础。结果表明,穿心莲内酯与氨基糖苷类药物联用,主要表现为协同作用;黄芩苷和小檗碱分别与氨基糖苷类药物联用,主要表现为相加作用;蒲公英提取物与氨基糖苷类药物联用,主要表现为无关作用。由此表明,穿心莲内酯与氨基糖苷类药物联合使用,可提高抗菌药物对耐药大肠杆菌的抗菌效果。4鸡大肠杆菌多价灭活苗制备与评价利用毒力强、免疫原性好、具有地方代表性的O1、O2、O78、O22、O26、O18六种优势血清型菌株,研制鸡大肠杆菌氢氧化铝胶多价灭活苗。免疫攻毒试验结果显示,疫苗对各日龄鸡的安全性较好,采用大肠杆菌菌株攻毒,免疫组可获得完全保护,说明该疫苗对大肠杆菌病免疫效果显着。这些研究成果,对于有效防治豫南地区鸡大肠杆菌病,提高豫南地区整体养鸡水平,具有重要指导意义。
张翠翠[6]（2016）在《禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究》文中研究指明禽致病性大肠杆菌主要引起禽类的心包炎、肝周炎、气囊炎、输卵管炎、腹膜炎等,并导致不同程度死亡率,给养殖业造成严重的经济损失。本研究采集江苏地区疑似大肠杆菌病的病鸡的组织进行大肠杆菌的分离鉴定,探究其致病性、耐药性；随后进行基因缺失多价灭活疫苗免疫保护效果的研究。为禽大肠杆菌病的防治提供理论依据,同时为多价灭活疫苗的研发奠定基础。一禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究本研究对江苏省部分地区疑似大肠杆菌病的病死鸡进行大肠杆菌的分离与鉴定,共分离鉴定了162株大肠杆菌。通过玻板凝集和试管凝集试验对大肠杆菌分离株进行O血清型鉴定,其中定型菌株130株,未定型菌株32株,定型率为80.25%。在130株定型菌株中鉴定出34种O血清型,其中主要血清型有O78、O88、O65、O161、O1、O24、O13,占定型菌株的66.92%。通过PCR方法对分离到的162株大肠杆菌进行iss、iroN、tsh、cvaC、 iutA及irp26个与禽致病性大肠杆菌致病力密切相关的毒力基因的检测,其检出率分别为83.33%、80.86%、45.06%、48.76%、75.92%、58.02%,同时携带6个毒力基因的菌株有37株,占总分离菌株的22.83%。选取本研究分离鉴定的菌株64株（主要血清型45株）进行1日龄易感鸡的致病性试验,结果64个分离株中有55株属于高中致病性菌株,占85.94%。其中,高致病性菌株40株（主要血清型33株）,中度致病性菌株15株（主要血清型8株）,低致病性菌株9株。通过1日龄致病性试验并结合6个与禽致病性大肠杆菌致病力密切相关的毒力基因的检测,可以判定本研究分离菌中至少有80%的分离菌具有中高致病力。二禽致病性大肠杆菌耐药性研究本研究选取了16种抗生素（氨苄青霉素、四环素、强力霉素、先锋霉素V、磺胺异恶唑、链霉素、庆大霉素、环丙沙星、卡那霉素、左旋氧氟沙星、氟苯尼考、新霉素、阿奇霉素、诺氟沙星、多粘菌素B、环丙沙星）对60个分离株进行药物敏感性的筛选。60个分离株对强力霉素、氨苄青霉素、四环素、磺胺异嗯唑及环丙沙星的耐药率在80%及以上；对阿奇霉素、庆大霉素及多粘菌素B的耐药率在50%以下；对多粘菌素B的敏感性最高。60个分离株均出现不同程度的多重耐药情况。其中,受检菌株中耐13种药物的菌株最多,占总受检菌株的25.0%（15/60）；有63.33%（38/60）的受检菌株对9种及以上药物耐药。由此可知目前禽致病性大肠杆菌的耐药性严重且耐药谱比较广。三禽致病性大肠杆菌01、02、078菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究本研究利用本实验室保存的01、02、078血清型的野生株及其lpxL、lpxM突变株制备油佐剂多价灭活疫苗,免疫后对其特异性抗体反应水平、对野生株的攻毒保护率及免疫鸡内脏组织的病理变化进行研究。研究数据显示,本研究制备的疫苗的血清特异性抗体水平与攻毒保护率均优于商品疫苗组,突变株疫苗的安全性和免疫应激性优于野生株疫苗。不同佐剂对疫苗免疫保护效果的影响：突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗组的特异性抗体水平与保护率优于白油佐剂疫苗；对01、02、078毒株的保护率：突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗分别为86.67%、93.33%及100%,白油佐剂疫苗分别为对80%、86.67及86.67。不同免疫次数对免疫保护效果的影响：将突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗对鸡进行一次免疫后攻毒,其免疫保护率要优于商品疫苗的二次免疫的免疫保护率,与突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗二次免疫组相比保护率相当,对血清型01、02、078毒株的免疫保护率分别为80%、93.33%、93.33%。因此,本研究制备的突变株Montanide TSA71VG佐剂疫苗免疫一次就足够抵抗大肠杆菌01、02、078的感染,其保护率远远高于商品疫苗免疫组。
李守远[7]（2013）在《济南地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及自家灭活苗研制》文中研究说明鸡大肠杆菌病是由大肠埃希氏菌的某些血清型引起的一类条件性疾病，近些年迅速发展成为养鸡业的主要细菌性疫病，给从业者造成了严重的经济损失。该病发病期间的防治主要是依靠疫苗和药物，但效果均不太明显。为此2008年-2012年间，我们对济南周边五家养鸡场禽病流行情况进行了调查，并从送检的病鸡病料中，进行病原菌分离和鉴定，获得了以下主要研究结果：鸡的常见疫病按照病原性质可基本划分为病毒性、细菌性和寄生虫性三种类型。调查结果显示，病毒型禽病中，禽流感的发生率和死亡率都相对较高，其次为新城疫；细菌型禽病中，大肠杆菌病的发生率与死亡率最高，其次为葡萄球菌病；鸡虱子和鸡球虫病的发生率与死亡率，在2008至2012年间，皆呈现逐步下降的趋势。根据调查统计结果对比，大部分流行性疾病发生率与死亡率正在呈现逐渐下降的趋势，特别是寄生虫性疾病已经得到了很好的控制，而部分病毒性以及细菌性疾病仍然严重危害养鸡业的发展，特别是细菌性疾病中的大肠杆菌病，常与其他病原协同感染，发病率与死亡率都较高，有上升的趋势。自济南及周边地区有典型心包炎和肝周炎的37份病鸡肝脏病料中，分离到大肠杆菌14株。分离菌株经大肠杆菌O抗原鉴定，共有O78、O2、O9、O24、O127、O15、O827种血清型，其中优势菌株为O78、O2、O9、O24，分别占大肠杆菌菌株总数的28.6%、21.4%、14.2%、14.2%。分离菌株药敏试验结果显示：氟苯尼考、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢哌舒、新霉素、磷霉素钠、恩诺沙星等较敏感，将较敏感的药物复配后取得了良好效果，尤其是新霉素与氟苯尼考、阿奇霉素、头孢噻肟、头孢哌舒等药物复配组合后不仅取得较好效果，且大大降低药物费用，具备良好的经济效益。目前很多抗菌药物都不能有效控制鸡群的大肠杆菌病，因此研制安全、有效的大肠杆菌苗是控制大肠杆菌病的有效途径。我们以此次分离到的大肠杆菌地区优势血清型O78、O2、O9和O24四种优势血清型菌株为制苗菌株，研制了多价油佐剂灭活疫苗，然后以各种日龄健康非免疫鸡为实验动物进行疫苗的检验。结果显示：研制的鸡大肠杆菌自家苗，稳定性良好，各项性状指标均符合要求，免疫效果良好。经养鸡场进行田间回归免疫试验，该自家苗具有较好的保护效果。
贺常亮[8]（2011）在《治疗鸡大肠杆菌病的中药方剂筛选及其作用机理研究》文中认为鸡大肠杆菌病（Chicken colibacillosis）是由某些血清型的致病性大肠埃希氏菌（Escherichia coli,简称大肠杆菌E.coli）所引起的传染病。各日龄的鸡均可发病,以雏鸡和中鸡居多。临床表现为多种症型,较常见的有败血症、肉芽肿、心包炎、肝周炎、气囊炎、肠炎、脐炎、全眼球炎、卵黄性腹膜炎、肿头综合征等,发病率为11%-69%,致死率为40.2%-90.3%,与其它病原混合感染时,死淘率会更高,其危害居细菌性疾病之首,常给养鸡业带来巨大经济的损失。目前,鸡大肠杆菌病的防治还存在许多亟待解决的重大问题：一是致病性大肠杆菌血清型众多,我国现已报道的鸡致病性大肠杆菌血清型有60多种,现有的疫苗不能有效预防；二是养鸡场综合防控措施不够完善,为鸡致病性大肠杆菌的滋生和传播提供了外部条件；三是由于抗生素和化学抗菌药物的大量使用,导致病原产生了广泛的耐药性,使治疗效果不断下降,临床又不得不加大剂量并延长给药时间,大幅度提高了治疗难度与成本;四是抗生素和其他化学抗菌药在鸡肉、内脏和鸡蛋等产品中形成有害残留危害食品安全。近年来,采用中药防治鸡大肠杆菌病的报道较多,且多数认为有较好效果。但尚存在下列问题：一是多数研究未从现代传染病学角度证明其有效性；二是未从现代药理学角度阐明其作用机理。为此,研究与开发更加安全、有效的中药制剂并阐明其作用机理将具有重要的理论研究与临床应用价值。我们在中兽医药学理论指导下,根据相关文献报道,确定了清热类、祛湿类、理血类、理气类等114味中草药,以鸡大肠杆菌078作为目标菌株,进行了体外的抑菌试验,筛选出6种具有一定抗菌作用的中药,包括有芦荟、穿心莲、大蒜、锦灯笼、乌梅、石榴皮,其抑菌圈分别是15 mm、12 mm、12 mm、11 mm、11 mm、7 mm。运用硅胶柱层析、凝胶柱层析、ODS柱层析对芦荟的抗菌成分进行了分离、纯化,经过质谱、红外光谱和核磁共振分析了得到的抗菌单体物质,确定为延胡索酸。进一步的抗菌活性研究结果显示,延胡索酸对金黄色葡萄球、链球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC分别是50、50、780和780 gg/ml,MBC分别是100、100、1560和780μg/ml。利用建立的人工感染鸡大肠杆菌病理模型,对39个备选方剂进行了筛选,发现方4、方5、方24与方26的效果较好,死亡率分别是30%、40%、26.7%、26.7%。为了进一步确证这些方剂的有效性,对方4、5、24、26进行了2次重复实验,结果显示4个方剂效果稳定,对实验性鸡大肠杆菌病均有治疗效果,死亡率在46.7%以下。相比之下,26号方效果最好,2次死亡率均为26.7%。通过正交试验对26号方组成药物的用量进行了筛选,确定其最佳配比为香附40g、穿心莲30 g、黄芪30 g,并将该方命名为“香芪汤”。利用人工感染鸡大肠杆菌的病理模型,进一步考察了中药香芪汤的疗效。结果表明,中药香芪汤能改善感染大肠杆菌鸡只的饮水量和采食量。感染大肠杆菌鸡只的死亡率为50%,香芪汤中、高剂量能显着降低死亡率,分别是20%（P<0.05）和13.3%（P<0.01）,且二组对感染鸡只的体增重也有较好的改善作用。血常规指标分析结果显示,攻毒对照组白细胞数极显着高于健康对照组（P<0.01）,中药香芪汤能有效抑制血液白细胞过度的增加,低、中、高剂量组的白细胞数分别显着（P<0.05）和极显着（P<0.01）低于攻毒对照组：攻毒对照组的凝血细胞数显着低于健康对照组（P<0.05）,高剂量的香芪汤能保护凝血细胞免受破坏,其数量显着高于攻毒对照组（P<0.05）,香芪汤对红细胞也具有一定的保护作用；香芪汤能减轻接种大肠杆菌鸡只的病理变化,降低心包炎、肝周炎的发生率,并改善心、肝、脾、肾的脏体指数；通过ELISA法检测各组鸡只血清炎症介质TNF-α、IL-1和sEPCR的水平,结果显示,在相应的时间段内香芪汤能降低这些炎症介质的水平。以上结果表明,香芪汤对人工感染大肠杆菌鸡只具有良好的疗效.并且有可能是通过抗炎和抗凝血两条途径来发挥治疗作用的。我们推测在鸡大肠杆菌致病过程中,微血管内皮细胞(Microvascular endothelial cells,MVECs起到了关键性的作用,因此,在本实验中,通过建立LPS诱导MVECs的炎症模型,考察了香芪汤及其有效成分对MVECs凝血途径相关因子的影响。MVECs长成融合状态的单层时,加入香芪汤、α-香附酮、黄芪甲苷和穿心莲内酯的低、中、高剂量作用细胞3h后,加入LPS刺激,18h收集培养细胞上清液,采用ELISA法测定PAI-1和TF的含量。结果,香芪汤和α-香附酮的低、中、高剂量组,黄芪甲苷中、高剂量组,穿心莲内酯低剂量组的PAI-1含量显着低于LPS对照组（P<0.05或P<0.01）；香芪汤低、中、高剂量组,α-香附酮中、高剂量组,黄芪甲苷高剂量组,穿心莲内酯高剂量组的TF含量显着低于LPS对照组（P<0.05或P<0.01）,表明,香芪汤及其有效成分能抑制LPS诱导MVECs的PAI-1和TF的分泌,减轻凝血反应。半定量RT-PCR结果显示,LPS作用MVECs 6 h后,能过多的提高PAI-1和TF基因mRNA表达的水平、降低上游调控基因KLF2 mRNA表达的水平。香芪汤组能降低PAI-1基因mRNA的表达水平,与LPS对照组比较差异显着（P<0.01）,而穿心莲内酯组,黄芪甲苷和α-香附酮组的PAI-1基因mRNA表达水平与LPS对照组没有显着的差异（P>0.05）；香芪汤组和α-香附酮组的TF基因mRNA表达水平与LPS对照组比较差异极显着（P<0.01）,黄芪甲苷、穿心莲内酯组的TF基因mRNA表达水平与LPS对照组比较差异不显着（P>0.05）。此外,香芪汤组、α-香附酮组、黄芪甲苷组和穿心莲内酯组的KLF2基因mRNA表达水平与LPS对照组比较差异显着（P<0.01）。以上结果表明,香芪汤及其有效成分能够一定程度上抑制LPS诱导的MVECs PAI-1和TF基因mRNA水平的影响,并且对这两个基因的上游调控基因KLF2也有一定的调节作用。利用Western blot方法检测了香芪汤及其有效成分对MVECs分泌TNF-α和表达ICAM-1蛋白以及上游调控蛋白IκB-α、NF-κB p65的影响。结果显示,香芪汤和α-香附酮的低、中、高剂量组,黄芪甲苷的高剂量组,穿心莲内酯中、高剂量组均能极显着降低LPS诱导的MVECs TNF-α的分泌量（P<0.01）；香芪汤、α-香附酮、黄芪甲苷、穿心莲内酯能降低ICAM-1蛋白的表达量,与LPS对照组相比差异极显着（P<0.01）,以上结果表明香芪汤及其有效成分具有较好的抗炎作用。另外,香芪汤及其有效成分不能抑制LPS诱导的MVECs IκB-α蛋白表达量的下降,能够抑制NF-κB p65蛋白表达量的增加,表明,香芪汤及其有效成分的抗炎作用是通过抑制NF-κB p65来介导的。综上所述,本课题利用体外抑菌试验对114味中药进行了筛选,利用人工感染鸡大肠杆菌的病理模型对39个中药复方进行了筛选,得到一个效果最好的中药复方,命名为香芪汤。通过进一步的疗效观察,证明香芪汤对感染鸡只的饮水量、采食量、死亡率、体增重、血液学指标、典型病理变化、脏体指数以及血清炎症介质水平等指标具有良好的改善作用。香芪汤的疗效可能是通过调节KLF2介导的凝血反应和NF-κB介导的炎症反应来完成的。
王广伟[9]（2010）在《枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究》文中研究表明随着养鸡业的发展,大肠杆菌病对枣庄地区养鸡业的危害日趋严重,造成了巨大经济损失。由于该病的普遍存在,加上大肠杆菌血清型复杂,疫苗免疫预防达不到理想效果,临床上表现为滥用药物,这不仅增强了细菌的耐药性,而且易形成药物残留,危害人类健康。本文就枣庄地区鸡大肠杆菌病综合防治进行了研究,探明了其发病原因、发病规律、血清型分布、耐药情况,并通过自家疫苗和复方制剂的防治试验,制定出了较为科学合理的预防和治疗措施,取得了理想的结果。本论文的试验分为三部分:1、流行病学调查采用兽医流行病学调查方法,对枣庄地区鸡大肠杆菌病进行了较系统调查。结果表明,枣庄地区大肠杆菌病的发病原因复杂,发病率为31.6%,死忘率为14.43%,占本地区鸡场全部鸡病的42%以上。不同日龄的鸡均可发病,以15-35日龄为高发日龄段,占大肠杆菌病总发病率的50%-60%,其次是35-40日龄和7-15日龄段,7日龄以下和40日龄以上鸡发病相对较少,蛋鸡在开产前后或产蛋高峰期前后发病最多,育雏阶段发病较少或基本不发病。大肠杆菌病一年四季均可发生,但以寒冷冬季（12月份至第二年的1月份）和高温多雨潮湿季节（7-8月份）及气温多变季节（4-5月份）发病为主,占大肠杆菌发病总数的84%左右。2、病原分离鉴定与药敏试验采用常规细菌分离、鉴定方法,从枣庄市五区一市鸡场采集的27份自然发病鸡大肠杆菌病料中,分离出致病性大肠杆菌22株,分离率为81.49%。鉴定出不同血清型20株(其中O78型9株、O35型4株、O88型2株、O2型1株、O18型1株、O5型1株、O15型1株、O111型1株),共8个血清型,以O78、O35、O88三个血清型为主,占定型菌株的75%,其中O78血清型占定型菌株的45%,为优势血清型。细菌药敏试验结果显示,分离菌株呈现出不同程度的耐药性,其中对阿米卡星、头孢拉啶、头孢噻肟高敏株均占86.36%,对头孢唑啉高敏株占81.82%,对氟苯尼考高敏株占77.27%。但枣庄市辖区内大肠杆菌耐药性和敏感株存在差异。3、枣庄地区鸡大肠杆菌病防治研究从本地区分离的8个血清型大肠杆菌中选择3个主要致病血清型(O78、O（35）、O88)菌株制成三价油乳剂灭活疫苗,经田间免疫试验保护率达到了98%。选用阿米卡星与利巴韦林、地塞米松、VC配成复方制剂,通过对攻毒鸡进行治疗试验,保护率为97.5%,较单方阿米卡星（保护率为90.0%）更有效,且复方制剂采用注射方法临床效果最佳。本研究结果为有效防治鸡大肠杆菌病提供了科学依据和技术支持。
刘英龙[10]（2009）在《潍坊地区鸭大肠杆菌病流行病学调查及防治措施研究》文中指出鸭大肠杆菌病是一种急性败血性传染病,发病急,死亡快,主要侵害2～6周龄的雏鸭。主要特征病变为发生心包炎、肝周炎、气囊炎等。本试验通过对潍坊地区鸭大肠杆菌病进行流行病学调查,并对分离到的菌株进行体外药敏试验,选取高敏药物进行临床治疗,并利用优势血清型制备了自家大肠杆菌灭活疫苗用于临床,为有效防控本地区鸭大肠杆菌病提供理论依据。对潍坊市11个县市区118群大肠杆菌病的流行情况进行调查,大肠杆菌病的高发期是2～4周龄,没有明显的季节性;饲养条件差的鸭群比饲养条件好的鸭群大肠杆菌病发病率高出48%;混合感染的鸭群占发病鸭群总数的83.04%。用大肠杆菌O因子血清（O1～O163）对分离到的112株致病性大肠杆菌的血清型进行鉴定,结果有83株大肠杆菌分属15种血清型,占分离株的74.11%。其中优势血清型为O78、O2、O92、O142,这四种优势血清型的菌株数占总分离株数的56.63%。对112株大肠杆菌分离株进行药敏试验,结果显示:22种药物均出现不同程度的耐药性。其中对头孢噻肟、头孢曲松、氨曲南、氟苯尼考、安普霉素敏感度较高,高敏菌株占66%～98%。93%以上大肠杆菌分离株对6种及6种以上抗生素具有耐药性,经药敏试验后选出的药物用于临床治疗,效果显着好。治愈率均在97%以上。将分离筛选的4株致病性大肠杆菌菌株制成多价油乳剂灭活苗,经田间试验证明所研制的大肠杆菌灭活苗对本地大肠杆菌病具有较好的保护效果。上述研究为潍坊地区鸭大肠杆菌病的防制提供了依据。
二、就地制成油乳剂组织灭活苗控制鸡大肠杆菌病（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、就地制成油乳剂组织灭活苗控制鸡大肠杆菌病（论文提纲范文）
（1）山东省貂源大肠杆菌生物学特性及灭活苗的初步研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 1.1 病原学 |
| 1.1.1 形态及染色特征 |
| 1.1.2 培养特性 |
| 1.1.3 生化反应 |
| 1.2 血清型 |
| 1.3 大肠杆菌的耐药性 |
| 1.3.1 大肠杆菌的耐药现状 |
| 1.3.2 大肠杆菌的耐药机制 |
| 1.3.2.1 酶的释放 |
| 1.3.2.2 细菌外排 |
| 1.3.2.3 抗生素靶位改变 |
| 1.3.2.4 细胞膜通透性的改变 |
| 1.3.3 大肠杆菌耐药性检测意义 |
| 1.4 大肠杆菌的检测方法 |
| 1.4.1 传统检测方法 |
| 1.4.2 酶联免疫吸附技术(ELISA) |
| 1.4.3 量子点荧光探针技术 |
| 1.4.4 免疫层析技术 |
| 1.4.5 PCR检测技术 |
| 1.5 大肠杆菌的致病机理 |
| 1.5.1 黏附素 |
| 1.5.2 肠毒素 |
| 1.5.3 外膜蛋白 |
| 1.5.4 内毒素 |
| 1.6 水貂大肠杆菌病的防治 |
| 1.6.1 饲养管理 |
| 1.6.2 药物预防 |
| 1.6.3 免疫预防 |
| 1.7 疫苗佐剂的概括 |
| 1.7.1 化学类免疫佐剂 |
| 1.7.2 微生物类免疫佐剂 |
| 1.7.3 植物类免疫佐剂 |
| 1.7.4 生化类免疫佐剂 |
| 1.8 大肠杆菌灭活苗的研究进展 |
| 1.8.1 禽大肠杆菌灭活苗概括 |
| 1.8.2 猪大肠杆菌灭活苗概括 |
| 1.8.3 水貂大肠杆菌灭活苗的概括 |
| 1.9 本研究的目的及意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 菌株来源 |
| 2.1.2 实验动物 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.1.4 主要试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 细菌的复苏及纯化鉴定 |
| 2.2.2 细菌的生化鉴定 |
| 2.2.3 分子生物学鉴定 |
| 2.2.4 血清学鉴定 |
| 2.2.5 貂源大肠杆菌药敏实验 |
| 2.2.6 致病力测定 |
| 2.2.6.1 主导血清型菌株致病力初筛试验 |
| 2.2.6.2 半数致死量的测定 |
| 2.2.7 病理切片制作 |
| 2.2.8 水貂大肠杆菌灭活苗的初步研究 |
| 2.2.8.1 疫苗的制备方法 |
| 2.2.8.2 最适接种剂量测定 |
| 2.2.8.3 一次免疫保护效果评估 |
| 2.2.8.4 两次免疫保护效果评估 |
| 2.2.8.5 大肠杆菌二价灭活疫苗免疫效果评估 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 纯化鉴定结果 |
| 3.2 生化鉴定结果 |
| 3.3 16S rRNA鉴定结果 |
| 3.4 O血清型鉴定结果 |
| 3.5 大肠杆菌药敏实验鉴定结果 |
| 3.6 致病力测定结果 |
| 3.6.1 致病力初筛结果 |
| 3.6.2 半数致死量的测定结果 |
| 3.6.2.1 生长曲线测定结果 |
| 3.6.2.2 半数致死量结果 |
| 3.6.3 小白鼠的临床症状以及病理变化 |
| 3.7 小白鼠病理切片结果 |
| 3.8 疫苗免疫保护效果评估 |
| 3.8.1 水貂大肠杆菌二价灭活苗的制备 |
| 3.8.1.1 抗原的制备 |
| 3.8.1.2 灭活检验 |
| 3.8.1.3 菌苗制备 |
| 3.8.1.4 无菌检验 |
| 3.8.1.5 安全性实验 |
| 3.8.2 最适接种剂量 |
| 3.8.3 一次免疫的保护效果评估 |
| 3.8.4 两次免疫保护效果评估 |
| 3.8.5 二价灭活疫苗免疫保护效果评估 |
| 4 讨论 |
| 4.1 大肠杆菌的生化特性及同源性分析 |
| 4.2 大肠杆菌的血清型 |
| 4.3 大肠杆菌的耐药性 |
| 4.4 大肠杆菌的致病性 |
| 4.5 水貂大肠杆菌的灭活苗 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 第一篇 文献综述 |
| 综述一禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 毒力因子 |
| 3 流行病学 |
| 4 临床症状及病理变化 |
| 5 防治 |
| 综述二 禽致病性大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 1 灭活疫苗 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 3 弱毒疫苗 |
| 4 小结 |
| 第二篇 实验研究 |
| 第一章 鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 第二章 鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗的免疫持续期 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
（3）鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 综述一 禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 流行病学 |
| 3 临床症状和病理变化 |
| 4 防治 |
| 综述二 禽致病性大肠杆菌疫苗研究进展 |
| 1 弱毒疫苗 |
| 2 灭活疫苗 |
| 3 亚单位疫苗 |
| 4 菌影疫苗 |
| 参考文献 |
| 第一章 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗的免疫安全性和最适抗原含量研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 疫苗菌株 |
| 1.2 检验菌株 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 培养基的配方和配制 |
| 1.5 主要仪器和设备 |
| 1.6 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 灭活疫苗抗原制备 |
| 2.2 疫苗的制备 |
| 2.3 成品疫苗疫苗质量检查 |
| 2.4 鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性试验 |
| 2.5 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适抗原含量免疫保护试验 |
| 2.6 间接血凝试验测定血清抗体水平 |
| 2.7 病理切片的制备 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡大肠杆菌病亲本株和脂多糖缺失多价灭活疫苗的安全性比较 |
| 3.2 鸡致病性大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗最适抗原含量确定 |
| 4 讨论 |
| 第二章 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期、疫苗候选株与流行株交叉免疫保护研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 疫苗 |
| 1.2 检验菌株 |
| 1.3 试验动物 |
| 1.4 主要仪器和设备 |
| 1.5 主要试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期试验 |
| 2.2 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗交叉保护试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫持续期 |
| 3.2 鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活疫苗免疫保护 |
| 3.3 病理切片 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（4）鸡大肠杆菌病脂多糖缺失三价灭活疫苗保存期及被动免疫效力的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 综述一 禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1. 禽致病性大肠杆菌概述 |
| 1.1 病原学 |
| 1.2 流行病学 |
| 2 禽致病性大肠杆菌的毒力因子 |
| 2.1 粘附素 |
| 2.1.2 I型菌毛 |
| 2.1.2 P型菌毛 |
| 2.1.3 Curli菌毛 |
| 2.2 外膜蛋白(OMPs) |
| 2.3 血清抗性蛋白 |
| 2.4 铁摄取系统 |
| 2.5 温度敏感血凝素 |
| 2.6 脂多糖 |
| 3 防治 |
| 3.1 药物防控 |
| 3.2 疫苗防控 |
| 综述二 禽大肠杆菌病的疫苗研究进展 |
| 1 灭活疫苗 |
| 1.1 油乳剂灭活苗 |
| 1.2 氢氧化铝佐剂灭活苗 |
| 1.3 蜂胶佐剂灭活疫苗 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 2.1 菌毛亚单位疫苗 |
| 2.2 荚膜亚单位疫苗 |
| 3 弱毒疫苗 |
| 3.1 自然分离弱毒疫苗 |
| 3.2 基因工程弱毒疫苗 |
| 第二章 鸡大肠杆菌病多价灭活疫苗的保存期研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 常用培养基及其配置方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 灭活疫苗抗原的制备 |
| 2.2 Montanide TSA 71 VG油佐剂灭活疫苗的制备 |
| 2.3 疫苗质量检测 |
| 2.4 疫苗保存期实验 |
| 2.5 间接血凝方法检测血清中特异性抗体水平 |
| 2.6 病理切片的制备 |
| 3 结果 |
| 3.1 安全性检验 |
| 3.2 免疫保护效力 |
| 4 死亡鸡的临床症状及组织病理学观察结果 |
| 4.1 临床症状 |
| 4.2 病理变化 |
| 5 讨论 |
| 第三章 鸡大肠杆菌病多价灭活疫苗的被动免疫效力 |
| 1 材料 |
| 1.1 菌株 |
| 1.2 常用培养基及其配置方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 疫苗的制备 |
| 2.2 疫苗的接种与攻毒保护试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 免疫后母鸡及雏鸡LPS特异抗体检测结果 |
| 4 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（5）豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词 |
| 第一章 鸡大肠杆菌病研究进展 |
| 1 研究背景 |
| 2 国内外研究进展 |
| 2.1 鸡大肠杆菌病病原学 |
| 2.2 大肠杆菌耐药性 |
| 2.3 中药抑菌作用及机制 |
| 2.4 鸡大肠杆菌疫苗 |
| 2.5 鸡大肠杆菌病防治 |
| 3 研究内容 |
| 3.1 豫南地区鸡大肠杆菌发病状况分析 |
| 3.2 分离菌株药物敏感性测定 |
| 3.3 中药活性成分联合抗菌药物增效作用研究 |
| 3.4 鸡大肠杆菌分离菌株致病性和免疫原性分析 |
| 3.5 鸡大肠杆菌氢氧化铝多价灭活苗研究 |
| 第二章 豫南地区鸡致病性大肠杆菌分离与鉴定 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细菌分离 |
| 2.2 分离培养 |
| 2.3 生化鉴定 |
| 2.4 PCR鉴定 |
| 2.5 血清型鉴定 |
| 2.6 致病性试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 鸡致病性大肠杆菌对常用抗菌药物耐药性分析 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 细菌的最佳生长时期 |
| 2.2 β-内酰胺类药物体外抑菌活性 |
| 2.3 氨基糖苷类药物体外抑菌活性 |
| 2.4 酚胺醇类药物体外抑菌活性 |
| 2.5 喹诺酮类药物体外抑菌活性 |
| 2.6 其他药物体外抑菌活性 |
| 2.7 鸡大肠杆菌耐药谱分析 |
| 2.8 大肠杆菌中I型整合酶基因扩增 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四章 中药活性成分与氨基糖苷类药物体外联合抗菌作用 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 穿心莲内酯联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.2 黄芩苷联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.3 小檗碱联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 2.4 蒲公英提取物联合抗菌药物体外联合抑菌活性 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第五章 鸡大肠杆菌多价灭活苗优势菌株筛选 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 毒力试验 |
| 2.2 免疫原性试验 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第六章 鸡大肠杆菌多价灭活苗制备与评价 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 无菌检验 |
| 2.2 安全检验 |
| 2.3 效力检验 |
| 2.4 免疫持续期试验 |
| 2.5 免疫反应 |
| 2.6 免疫效果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 在读博士学位期间研究成果 |
（6）禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 第一章 文献综述 |
| 综述一 禽致病性大肠杆菌的研究进展 |
| 1 病原学 |
| 2 流行病学 |
| 3 禽致病性大肠杆菌毒力因子的研究 |
| 4 发病机理 |
| 5 临床症状及病理变化 |
| 6 防治 |
| 综述二 鸡大肠杆菌疫苗的研究进展 |
| 1 灭活疫苗 |
| 2 亚单位疫苗 |
| 3 弱毒菌苗 |
| 参考文献 |
| 第二章 禽致病性大肠杆菌的分离鉴定、抗药性及致病性研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 病料来源 |
| 1.2 培养基及其配制方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 2 方法 |
| 2.1 细菌的分离培养 |
| 2.2 细菌的纯化与保存 |
| 2.3 细菌的实验室鉴定 |
| 2.4 分离株O血清型的鉴定 |
| 2.5 分离株毒力基因的检测 |
| 2.6 分离株致病性试验 |
| 2.7 药敏试验 |
| 3 结果 |
| 3.1 细菌的分离培养 |
| 3.2 细菌的形态学观察 |
| 3.3 生化试验结果 |
| 3.4 分离株O血清型鉴定 |
| 3.5 分离株毒力基因的PCR检测结果 |
| 3.6 分离株的致病性试验 |
| 3.7 分离株药物敏感性试验结果 |
| 3.8 大肠杆菌的多重耐药性 |
| 4 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 大肠杆菌多价灭活疫苗的初步研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 制苗菌株 |
| 1.2 常用培养基及其配制方法 |
| 1.3 主要仪器和设备 |
| 1.4 主要试剂 |
| 1.5 实验动物 |
| 1.6 商品疫苗 |
| 2 方法 |
| 2.1 灭活疫苗抗原的制备 |
| 2.2 油佐剂灭活苗的制备 |
| 2.3 疫苗质量检查 |
| 2.4 疫苗的接种与攻毒保护试验 |
| 2.5 间接ELISA方法检测血清中特异性抗体水平 |
| 2.6 病理切片的制备 |
| 3 结果 |
| 3.1 突变株与野生株高剂量疫苗对免疫鸡的影响 |
| 3.2 Montanide TSA 71VG佐剂疫苗两次免疫的保护效果 |
| 3.3 两种不同佐剂突变株疫苗两次免疫的免疫效果比较 |
| 3.4 突变株Montanide TSA 71VG佐剂疫苗与商品疫苗的免疫比较 |
| 3.5 病理切片 |
| 4 小结与讨论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
（7）济南地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及自家灭活苗研制（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 鸡大肠杆菌病的研究综述 |
| 一、病原 |
| 二、流行病学 |
| 三、大肠杆菌与其他病原的协同致病作用 |
| 四、传播途径 |
| 五、临床病症 |
| 六、诊断措施 |
| 七、综合防控措施 |
| 第二章 试验研究内容 |
| 试验一 济南地区鸡场常见病流行病学调查 |
| 摘要 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析和讨论 |
| 试验二 济南地区大肠杆菌病流行情况 |
| 摘要 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析和讨论 |
| 试验三 鸡大肠杆菌的分离鉴定 |
| 摘要 |
| 1. 材料与方法 |
| 2. 结果 |
| 3. 分析和讨论 |
| 试验四 鸡大肠杆菌多价油佐剂灭活疫苗的研制 |
| 摘要 |
| 1. 材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3. 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（8）治疗鸡大肠杆菌病的中药方剂筛选及其作用机理研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一篇 文献综述 鸡大肠杆菌病的研究进展 |
| 1.1 鸡大肠杆菌病及其流行现状 |
| 1.2 鸡大肠杆菌病疫苗免疫现状 |
| 1.3 鸡大肠杆菌耐药性的研究 |
| 1.4 实验性鸡大肠杆菌病的研究 |
| 1.5 中兽药抗鸡大肠杆菌病的现状 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第1章 抗鸡大肠杆菌O_(78)的单味中药及有效成分筛选 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 1.5 小结 |
| 第2章 中药治疗鸡大肠杆菌病的方剂筛选 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第3章 香芪汤对人工诱发鸡大肠杆菌病疗效的观察 |
| 3.1 材料 |
| 3.2 方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第4章 香芪汤及其有效成分对LPS诱导的微血管内皮细胞凝血因子的影响 |
| 4.1 材料 |
| 4.2 方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 第5章 香芪汤及其有效成分对LPS诱导的微血管内皮细胞炎症因子的影响 |
| 5.1 材料 |
| 5.2 方法 |
| 5.3 结果 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 导师简介 |
| 作者简历 |
| 致谢 |
（9）枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 病原学 |
| 1.1.1 形态特征 |
| 1.1.2 抵抗力 |
| 1.1.3 分布 |
| 1.1.4 培养特性 |
| 1.1.5 生化特性 |
| 1.1.6 抗原及血清型 |
| 1.1.7 致病性 |
| 1.2 致病机理 |
| 1.3 流行病学 |
| 1.3.1 发病原因 |
| 1.3.2 发病日龄 |
| 1.3.3 发病率和死亡率 |
| 1.3.4 发病季节 |
| 1.3.5 传染途径 |
| 1.3.6 与其他疾病关系 |
| 1.4 临床症状 |
| 1.5 临诊分型与病变 |
| 1.6 防治现状 |
| 1.6.1 一般防治 |
| 1.6.2 疫苗预防 |
| 1.6.3 微生态制剂防治 |
| 1.6.4 噬菌体防治 |
| 1.6.5 免疫球蛋白疗法 |
| 1.6.6 药物防治 |
| 1.7 本研究的目的和意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 流行病学调查材料 |
| 2.1.2 分离鉴定与药敏试验材料 |
| 2.1.3 防治研究材料 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 流行病学调查方法 |
| 2.2.2 分离鉴定与药敏试验方法 |
| 2.2.3 防治研究方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 流行病学调查结果 |
| 3.1.1 枣庄地区养鸡业发展及鸡病发生现状调查结果 |
| 3.1.2 枣庄地区鸡大肠杆菌病流行特点 |
| 3.1.3 主要临床症状 |
| 3.1.4 典型病变 |
| 3.2 分离鉴定与药敏试验结果 |
| 3.2.1 细菌分离 |
| 3.2.2 细菌分离培养及纯化培养 |
| 3.2.3 革兰氏染色镜检 |
| 3.2.4 生化试验 |
| 3.2.5 动物致病性试验 |
| 3.2.6 血清型鉴定 |
| 3.2.7 药敏试验 |
| 3.3 防治研究结果 |
| 3.3.1 疫苗预防试验 |
| 3.3.2 药物治疗试验 |
| 4 讨论 |
| 4.1 流行病学调查讨论 |
| 4.2 分离鉴定与药敏试验讨论 |
| 4.3 防治研究讨论 |
| 5 结论 |
| 6 参考文献 |
| 7 致谢 |
（10）潍坊地区鸭大肠杆菌病流行病学调查及防治措施研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 引言 |
| 1 鸭大肠杆菌病历史及现状 |
| 2 病原特性 |
| 3 耐药机理 |
| 4 大肠杆菌灭活油乳剂疫苗 |
| 5 综合防治措施 |
| 6 大肠杆菌对人类的危害 |
| 7 本文研究意义 |
| 试验一 潍坊地区鸭大肠杆菌病流行病学调查 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 试验二 鸭致病性大肠杆菌药敏试验及其敏感药物临床应用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 试验三 鸭大肠杆菌灭活疫苗的制备及应用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
四、就地制成油乳剂组织灭活苗控制鸡大肠杆菌病（论文参考文献）
- [1]山东省貂源大肠杆菌生物学特性及灭活苗的初步研究[D]. 丛小钧. 山东农业大学, 2021(01)
- [2]鸡致病性大肠杆菌脂多糖缺失株三价灭活疫苗佐剂的筛选及免疫持续期的初步研究[D]. 邵启文. 扬州大学, 2019(02)
- [3]鸡大肠杆菌病脂多糖缺失多价灭活苗安全性、最适抗原含量、免疫持续期及交叉免疫保护研究[D]. 潘廷云. 扬州大学, 2018(01)
- [4]鸡大肠杆菌病脂多糖缺失三价灭活疫苗保存期及被动免疫效力的初步研究[D]. 贾忆雪. 扬州大学, 2018(01)
- [5]豫南地区鸡大肠杆菌病病原学调查与防控研究[D]. 黄立. 南京农业大学, 2017(07)
- [6]禽致病性大肠杆菌的分离鉴定与O1、O2、O78菌株lpxL、lpxM基因缺失灭活疫苗的初步研究[D]. 张翠翠. 扬州大学, 2016(02)
- [7]济南地区鸡大肠杆菌的分离鉴定及自家灭活苗研制[D]. 李守远. 山东农业大学, 2013(05)
- [8]治疗鸡大肠杆菌病的中药方剂筛选及其作用机理研究[D]. 贺常亮. 吉林大学, 2011(09)
- [9]枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究[D]. 王广伟. 山东农业大学, 2010(05)
- [10]潍坊地区鸭大肠杆菌病流行病学调查及防治措施研究[D]. 刘英龙. 山东农业大学, 2009(03)